DNA损伤诱导肿瘤PD-L1表达相关分子调节机制研究

发布时间：2021-02-07 22:04

　　目的:PD-L1是PD-1的配体蛋白,激活PD-1后发挥负性免疫调节作用。本课题主要研究放疗直接诱导肿瘤细胞PD-L1蛋白表达机制及其表达升高后对T细胞影响。在转录水平及翻译后水平深入探讨放疗诱导PD-L1表达的分子调节机制,寻找调节PD-L1的新临床靶点。方法:1、在不同癌种细胞系中Western Blot检测放疗诱导PD-L1蛋白表达,选取目的细胞系,使用化学裂解法分离细胞膜、浆及核,WB检测放疗诱导PD-L1表达亚细胞水平。放疗不同剂量及时间梯度下,WB和免疫荧光法检测PD-L1蛋白表达的放疗时间及剂量依赖性。qPCR检测放疗后不同时间条件下,PD-L1mRNA表达。使用放线菌酮阻断细胞mRNA翻译过程后,检测PD-L1放疗前后表达。2、将PC-3细胞行小剂量（0.1Gy）放疗后与Jurkat细胞共培养,WB及Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测放疗照射PC-3细胞后共培养的Jurkat细胞PD-1/SHP-2通路激活及凋亡。使用PD-L1 siRNA预先敲低PC-3细胞PD-L1表达和PD-1抗体阻断PD-L1/PD-1后再次检测共培养Jurkat的PD-1/SH... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：129 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同癌种细胞系中放疗诱导PD-L1的表达情况

放疗诱导MDA-MB-231细胞系PD-L1表达的时间依赖性

天津医科大学博士学位论文 一、放疗直接诱导肿瘤细胞 PD-L1 表达情况A-B. 不同时间梯度 MDA-MB-231 细胞系中 PD-L1 蛋白表达（IR=5Gy）。C. 不同时间梯度 MDA-MB-231 细胞系中 PD-L1 mRNA 表达（IR=5Gy）。1.2.2.2 放疗诱导 PD-L1 表达的剂量依赖性不同放疗剂量下 Western Blot 检测显示，MDA-MB-231 及 PC-3 细胞系在0.1Gy 放疗照射下，PD-L1 即开始表现升高，可见放疗诱导 PD-L1 表达为剂量非依赖型。A B

【参考文献】：
期刊论文
[1]放射治疗联合阻断PD-1/PD-L1通路肿瘤免疫治疗的新进展[J]. 蔡尚,田野,徐波.  中华放射医学与防护杂志. 2016 (03)
[2]性别对高、低发区食管癌患者生存期的影响[J]. 汤萨,黄佳,董金城,袁果,李燕,张朋,宋昕,赵学科,范宗民,雷茜琳,王立东.  肿瘤防治研究. 2014(03)
[3]Level of circulating PD-L1 expression in patients with advanced gastric cancer and its clinical implications[J]. Zhixue Zheng,Zhaode Bu,Xijuan Liu,Lianhai Zhang,Ziyu Li,Aiwen Wu,XiaojiangWu,Xiaojing Cheng,Xiaofang Xing,Hong Du,Xiaohong Wang,Ying Hu,Jiafu Ji.  Chinese Journal of Cancer Research. 2014(01)



本文编号：3022887