基于PDX模型的肺癌靶向耐药机制研究

发布时间：2021-02-15 02:48

　　背景:EGFR基因敏感突变或ALK基因融合的非小细胞肺癌（NSCLC）患者在接受特异性酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）治疗后可获得显著疗效。但患者接受靶向治疗一段时间后,部分肿瘤细胞会对该类药物产生继发性突变从而形成耐药。对此,我们从两位肺癌患者恶性胸腔积液中分离出的新鲜肿瘤细胞对小鼠进行人源移植瘤模型（PDX）的建立以研究靶向药物的耐药机制。方法:对患者肿瘤组织标本和建成的PDX同时进行形态学比较和遗传背景方面的检测（全外显子组基因测序,WES）。基于不同的基因分型临床方面分别使用克唑替尼或奥斯替尼进行靶向治疗,并对所建PDX施以不断的诱导用药致其产生耐药。以PDX瘤体体积大小作为治疗后的观测指标,病理染色选用HE染色法。实验结果:PDX与患者母体肿瘤在组织学特征和治疗疗效上具有相似性。全外显子组基因测序表明PDX与患者母体肿瘤在遗传背景上也具有相似性（EML4-ALK gene fusion in Patient/PDX CTC15035;EGFR L858R and T790M gene mutations in Patient/PDX CTC15063）。在诱导产生耐药后,ALK ... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：92 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

实验基本流程图

受试者在化疗失败后肿瘤继续增大并伴有恶性胸腔积液（见图2B）。此时获取恶性胸腔积液标本用于 PDX 建模并成功[62,63]。经检测活检肿瘤母体及 PDX 均表现 ALK 基因融合阳性，因此对受试者使用克唑替尼靶向治疗，疾病控制时间长达 18 个月（见图 2C）。通过对比在克唑替尼治疗前受试者母体肿瘤（见图 2D）与 CTC15035 PDX（见图 2E）的组织学特征具有高度相似性。

例二一位 52 岁男性受试者（实验编号 CTC15063）为 IV 期肺癌伴多发远处转移。该患者经手术完整切除肿瘤随访4年半后出现肿瘤复发伴右胸膜转移（见图3A）。手术标本检测提示 EGFR 21 L858R 突变。因此该患者使用厄洛替尼靶向治疗 26个月后出现病情进展伴恶性胸腔积液（见图 3B）。此时获取恶性胸腔积液标本用于 PDX 建模。经检测胸水包埋标本及 PDX 均为 EGFR 21 L858R 突变阳性和 20T790M 突变阳性。随后患者使用奥斯替尼靶向治疗控制病情长达 13 个月（见图3C）。在奥斯替尼治疗前受试者母体肿瘤（见图 3D，3E）与 CTC15035PDX 的组织学特征对比具有高度相似性。

【参考文献】：
期刊论文
[1]肺癌PDTX模型的研究进展[J]. 秦保东,焦晓栋,原凌燕,柳珂,臧远胜.  中国肺癌杂志. 2017(10)
[2]肺癌的驱动基因与靶向治疗研究进展[J]. 王莉洁,梁志欣,喻航,陈良安.  国际呼吸杂志. 2017 (04)
[3]非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药机制及其治疗方案的研究进展[J]. 冯炜红,杜学明.  实用心脑肺血管病杂志. 2016(12)
[4]非小细胞肺癌EGFR基因T790M耐药的机制和逆转耐药治疗策略[J]. 王莹,钱军,谭洁.  临床医药文献电子杂志. 2016(46)
[5]肺腺癌表皮生长因子受体T790M突变裸鼠模型的建立与评价[J]. 李亚清,应希旺,严建平,曹立名,邬盛昌,刘元顺.  医学研究杂志. 2016(10)
[6]非小细胞肺癌靶向治疗及耐药机制[J]. 华静娜,史丽霞.  继续医学教育. 2016(07)
[7]人体肿瘤PDX移植模型的优与劣[J]. 胡斌权,陈城明,张同弟,李天,师长宏.  实验动物科学. 2015(05)
[8]Mechanisms of resistance to EGFR tyrosine kinase inhibitors[J]. Lihua Huang,Liwu Fu.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)



本文编号：3034295