mTOR信号通路在幽门螺旋杆菌CagA介导的细胞生理学变化中的作用
发布时间：2021-03-02 05:08
胃癌是世界上发病率第四高的癌症,每年胃癌会夺走700,000条生命,超过60%的胃癌由幽门螺杆菌感染引发。幽门螺杆菌的病原性有多个来源,其中CagA蛋白对细胞的影响尚未被完全揭露。CagA由幽门螺杆菌通过Type IV Secretion System注入宿主细胞从而影响细胞正常的信号通路,从而影响细胞的代谢和结构,最终导致细胞癌变。在实验室的前期研究中,我们发现无论是直接将幽门螺杆菌加入细胞培养基中,或是在细胞中诱导表达外源CagA,都能使细胞产生外貌的改变,从而变得细长,这种变化给予细胞转移能力,与胃上皮细胞癌变有密切关系。这种变化由于形似蜂鸟的嘆,所以被称为humming bird phenotype。通过药物筛选,我们发现抑制mTOR信号通路的药物Rapamycin可以阻止CagA带来的形变。本文以AGS胃癌细胞构筑的tet-off诱导CagA表达的A10细胞为模型,通过运用基因敲低、蛋白质免疫印迹分析、荧光实时定量PCR、倒置显微镜观察计数等实验方法,探究mTOR信号通路与CagA诱导的细胞形变之间的关系。通过实验我们发现,对NF-kB信号通路进行阻断不能阻断细胞形变,唯有m...
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１?ＣａｇＡ的结构多样性［３１］??Ｆｉｇ?ＬＩ?ＣａｇＡ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ??
侵袭和转移［１２５］。有趣的是，即使在Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ存在的情况下，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ还是??能够促进细胞侵袭和转移。这是如何做到的呢？其中一个推测是，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??能够和ＦＧＦＲ１相结合，诱导ＭＡＰＫ－ＥＲＫ通路的持续激活（图１．３）?［１２６］。或??．者，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达也许能够增强肿瘤基质细胞和内皮细胞的相互作用，促进??肿瘤存活和进出循环。确实也有实验结果表明，在血管中表达Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的黑??色素瘤细胞更容易被发现［１２７］；同样拥有异常表达Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的骨髓瘤细胞能更??顽强地留在骨髓中，并和Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ阳性的成骨细胞相互作用，造成造成溶骨??性病变，抑制成骨分化［１２８］。Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ介导的肿瘤细胞和肌成纤维细胞的异型??接触暗示着肿瘤迀移力变强的机制之一是肌成纤维细胞的高活动性［１２９］。肌成纤??维细胞能够分泌许多不同的蛋白酶到肿瘤微环境中。通过蛋白酶水解切割累积??大量可溶性Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ胞外域能够刺激内皮细胞的ＦＧＦ信号，促进血管生成??（图１．３）。总的来说，以上研宄证明了?Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在肿瘤发展过程中的重要正??性作用。??１．３．８?Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ也像Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?—样能够促进肿瘤迁徙和浸润，但是也有报道发??现Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ具有相反作用例如
＼?ｐ７＜３Ｓ６Ｋ?Ａｋｔ??图１．３?ｍＴＯＲｃｌ与ｍＴ０Ｒｃ２在胰岛素信号通路中［１４９］??Ｆｉｇ?１．?３?ｍＴＯＲｃｌ／２?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｓｕｌｉｎ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ??能方面处于核心地位［１４９］。在哺乳动物细胞中，存在着两种结构，功能不同的??ｍＴＯＲ?复合物。ｍＴＯＲｃｌ?含有?ｒａｐｔｏｒ?（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ｍＴＯＲ），??ｍＬＳＴ８和ＰＲＡＳ４０。ｍＬＳＴ８的功能尚不清楚，但ｒａｐｔｏｒ调控ｍＴＯＲ的方式是作??为骨架来募集ｍＴＯＲ的底物。ＰＲＡＳ４０的Ｔ２４６由Ａｋｔ磷酸化，从而停止它对??ｍＴＯＲ?的抑制作用。ｍＴＯＲｃｌ?的主要底物为两个，４ＥＢＰ１?（ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ?ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ??４Ｅ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｒｏｔｅｉｎ－１）和?Ｓ６Ｋ１?（ｒｉｂｏｓｏｍａｌ?ｐ７０Ｓ６?ｋｉｎａｓｅ）＾３Ｇ］，两个都是调控蛋白翻译??的重要因子。ｍＴＯＲｃｌ在Ｓ６Ｋ１的Ｔ３８０磷酸化并激活它，Ｓ６Ｋ１从而磷酸化并激??活核糖体蛋白Ｓ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer-associated fibroblasts in digestive tumors[J]. Lei Huang,A-Man Xu,Sha Liu,Wei Liu,Tuan-Jie Li. World Journal of Gastroenterology. 2014(47)
本文编号：3058668
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１?ＣａｇＡ的结构多样性［３１］??Ｆｉｇ?ＬＩ?ＣａｇＡ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ??
侵袭和转移［１２５］。有趣的是，即使在Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ存在的情况下，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ还是??能够促进细胞侵袭和转移。这是如何做到的呢？其中一个推测是，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??能够和ＦＧＦＲ１相结合，诱导ＭＡＰＫ－ＥＲＫ通路的持续激活（图１．３）?［１２６］。或??．者，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达也许能够增强肿瘤基质细胞和内皮细胞的相互作用，促进??肿瘤存活和进出循环。确实也有实验结果表明，在血管中表达Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的黑??色素瘤细胞更容易被发现［１２７］；同样拥有异常表达Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的骨髓瘤细胞能更??顽强地留在骨髓中，并和Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ阳性的成骨细胞相互作用，造成造成溶骨??性病变，抑制成骨分化［１２８］。Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ介导的肿瘤细胞和肌成纤维细胞的异型??接触暗示着肿瘤迀移力变强的机制之一是肌成纤维细胞的高活动性［１２９］。肌成纤??维细胞能够分泌许多不同的蛋白酶到肿瘤微环境中。通过蛋白酶水解切割累积??大量可溶性Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ胞外域能够刺激内皮细胞的ＦＧＦ信号，促进血管生成??（图１．３）。总的来说，以上研宄证明了?Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在肿瘤发展过程中的重要正??性作用。??１．３．８?Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ??Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ也像Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?—样能够促进肿瘤迁徙和浸润，但是也有报道发??现Ｐ－ｃａｄｈｅｒｉｎ具有相反作用例如
＼?ｐ７＜３Ｓ６Ｋ?Ａｋｔ??图１．３?ｍＴＯＲｃｌ与ｍＴ０Ｒｃ２在胰岛素信号通路中［１４９］??Ｆｉｇ?１．?３?ｍＴＯＲｃｌ／２?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｓｕｌｉｎ?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ??能方面处于核心地位［１４９］。在哺乳动物细胞中，存在着两种结构，功能不同的??ｍＴＯＲ?复合物。ｍＴＯＲｃｌ?含有?ｒａｐｔｏｒ?（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｏｆ?ｍＴＯＲ），??ｍＬＳＴ８和ＰＲＡＳ４０。ｍＬＳＴ８的功能尚不清楚，但ｒａｐｔｏｒ调控ｍＴＯＲ的方式是作??为骨架来募集ｍＴＯＲ的底物。ＰＲＡＳ４０的Ｔ２４６由Ａｋｔ磷酸化，从而停止它对??ｍＴＯＲ?的抑制作用。ｍＴＯＲｃｌ?的主要底物为两个，４ＥＢＰ１?（ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ?ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ??４Ｅ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｐｒｏｔｅｉｎ－１）和?Ｓ６Ｋ１?（ｒｉｂｏｓｏｍａｌ?ｐ７０Ｓ６?ｋｉｎａｓｅ）＾３Ｇ］，两个都是调控蛋白翻译??的重要因子。ｍＴＯＲｃｌ在Ｓ６Ｋ１的Ｔ３８０磷酸化并激活它，Ｓ６Ｋ１从而磷酸化并激??活核糖体蛋白Ｓ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer-associated fibroblasts in digestive tumors[J]. Lei Huang,A-Man Xu,Sha Liu,Wei Liu,Tuan-Jie Li. World Journal of Gastroenterology. 2014(47)
本文编号：3058668
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