调控MnSOD/FoxM1表达介导金雀异黄素逆转H460源性肺癌干细胞样细胞表型
发布时间：2021-03-05 00:10
第一部分NCI-H460源性肺癌干细胞样细胞的扩增与鉴定目的从体外培养NCI-H460细胞系得到第2代球细胞,与NCI-H460细胞对照,鉴别NCI-H460细胞系第2代球细胞是否具有肺癌干细胞样细胞（lung cancer stem-like cells,LCSLC）性质。方法干细胞条件培养基超低粘附培养板悬浮培养得到NCI-H460细胞系第2代球细胞。肿瘤球形成法对比测定NCI-H460细胞和NCI-H460细胞系第2代球细胞自我更新;创口愈合法和Transwell小室细胞侵袭试验对比检测细胞迁移和侵袭能力;藻红蛋白（PE）标记流式细胞术和蛋白质印迹对比分析肿瘤干细胞标志物（CD133、CD44和ALDH1）和多能性转录因子（Bmi1、Nanog和OCT4）以及上皮间充质转化（epithelial-mesenchmal transition,EMT）标志物（E-cadherin和N-cadherin）与EMT相关调节因子（Twist1和Snail1）蛋白表达水平;细胞有限稀释裸鼠皮下移植瘤实验对比检查体内致瘤性。结果1.干细胞条件培养基超低粘附培养板悬浮培养获得的NCI-H460源...
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：222 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
H460细胞系单层贴壁生长细胞的倒置相差显微镜图像(放大倍率：200)
1-2 NCI- H460 细胞系不同球细胞传代培养次数的球形成率比原代(第 1 代)、第 2 代、第 3 代和第 4 代球细胞的球形成率。与原代球细.05。 P<0.05，与第 1 次、第 2 次和第 4 次球细胞培养相比：#P<0.05。±标准差(Mean±SD, n=3)。确定 NCI-H460 细胞系第 2 代球细胞具有自我更新能力，我们球细胞悬液稀释成每毫升 500 个细胞的密度，然后，稀释的单L 接种于超低粘附 96 孔培养板(Corning Inc., Corning, NY, USA干细胞条件培养基。标记只有一个细胞的孔，观察单个细胞成在接种的第 1d、第 3d、第 6d 和第 9d 照相。图 1-3 可见：随隆性非粘附 NCI-H460 源性肿瘤球逐渐增大。
图 1-2 NCI- H460 细胞系不同球细胞传代培养次数的球形成率比较图示原代(第 1 代)、第 2 代、第 3 代和第 4 代球细胞的球形成率。与原代球细胞培养相比：*P<0.05。 P<0.05，与第 1 次、第 2 次和第 4 次球细胞培养相比：#P<0.05。3 次独立实验的均数±标准差(Mean±SD, n=3)。为了确定 NCI-H460 细胞系第 2 代球细胞具有自我更新能力，我们将分散得到的单个球细胞悬液稀释成每毫升 500 个细胞的密度，然后，稀释的单细胞悬液每孔 2 μL 接种于超低粘附 96 孔培养板(Corning Inc., Corning, NY, USA)，再加入150 μL 干细胞条件培养基。标记只有一个细胞的孔，观察单个细胞成球的时间过程，并在接种的第 1d、第 3d、第 6d 和第 9d 照相。图 1-3 可见：随着时间的延长，克隆性非粘附 NCI-H460 源性肿瘤球逐渐增大。
【参考文献】：
期刊论文
[1]7-difluoromethoxyl-5,4’-di-n-octylgenistein inhibits growth of gastric cancer cells through downregulating forkhead box M1[J]. Hong-Lin Xiang, Fei Liu, Mei-Fang Quan, Jian-Guo Cao, Yuan Lv, Laboratory of Medical Engineering, Medical College, Hunan Normal University, Changsha 410013, Hunan Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(33)
本文编号：3064194
【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】：222 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
H460细胞系单层贴壁生长细胞的倒置相差显微镜图像(放大倍率：200)
1-2 NCI- H460 细胞系不同球细胞传代培养次数的球形成率比原代(第 1 代)、第 2 代、第 3 代和第 4 代球细胞的球形成率。与原代球细.05。 P<0.05，与第 1 次、第 2 次和第 4 次球细胞培养相比：#P<0.05。±标准差(Mean±SD, n=3)。确定 NCI-H460 细胞系第 2 代球细胞具有自我更新能力，我们球细胞悬液稀释成每毫升 500 个细胞的密度，然后，稀释的单L 接种于超低粘附 96 孔培养板(Corning Inc., Corning, NY, USA干细胞条件培养基。标记只有一个细胞的孔，观察单个细胞成在接种的第 1d、第 3d、第 6d 和第 9d 照相。图 1-3 可见：随隆性非粘附 NCI-H460 源性肿瘤球逐渐增大。
图 1-2 NCI- H460 细胞系不同球细胞传代培养次数的球形成率比较图示原代(第 1 代)、第 2 代、第 3 代和第 4 代球细胞的球形成率。与原代球细胞培养相比：*P<0.05。 P<0.05，与第 1 次、第 2 次和第 4 次球细胞培养相比：#P<0.05。3 次独立实验的均数±标准差(Mean±SD, n=3)。为了确定 NCI-H460 细胞系第 2 代球细胞具有自我更新能力，我们将分散得到的单个球细胞悬液稀释成每毫升 500 个细胞的密度，然后，稀释的单细胞悬液每孔 2 μL 接种于超低粘附 96 孔培养板(Corning Inc., Corning, NY, USA)，再加入150 μL 干细胞条件培养基。标记只有一个细胞的孔，观察单个细胞成球的时间过程，并在接种的第 1d、第 3d、第 6d 和第 9d 照相。图 1-3 可见：随着时间的延长，克隆性非粘附 NCI-H460 源性肿瘤球逐渐增大。
【参考文献】：
期刊论文
[1]7-difluoromethoxyl-5,4’-di-n-octylgenistein inhibits growth of gastric cancer cells through downregulating forkhead box M1[J]. Hong-Lin Xiang, Fei Liu, Mei-Fang Quan, Jian-Guo Cao, Yuan Lv, Laboratory of Medical Engineering, Medical College, Hunan Normal University, Changsha 410013, Hunan Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(33)
本文编号：3064194
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