m 6 A甲基化转移酶METTL3对HCT-116细胞生物学特性影响的探究

发布时间：2021-03-14 15:05

　　N6-甲基腺苷（m⁶A）是发生在腺苷N6位的甲基化,这是真核m RNA上最普遍的内部修饰。而METTL3作为m⁶A甲基化转移酶的核心成分,介导m⁶A甲基化的“写入”过程,已被证实在多种癌症中发挥着致癌或者抑癌的作用。可谓METTL3之于癌症是一把双刃剑。而结肠癌作为十大恶性肿瘤之一,严重威胁人类健康。虽然目前采用手术,化疗以及分子靶向治疗的方法提高了患者治疗效果,但全球每年仍增加超过100万新病例以及大约60万人死亡。为了研究METTL3对人结肠癌HCT-116生物学特性的影响,通过CRISPER/Cas9基因编辑技术,构建METTL3敲低载体,转染结肠癌HCT-116细胞,有限稀释法筛选目的克隆,利用Western Blot筛选建立METTL3敲低细胞系。另外,通过构建METTL3基因过表达的慢病毒载体,将PLVSIN-METTL3、PLVSINEV载体与辅助质粒共转染HEK-293T细胞,进行慢病毒的包装。利用包装好的病毒感染结肠癌HCT-116细胞系,利用Western Blot筛选建立METTL3过表达细胞系。并... 

【文章来源】：哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

m6ARNA甲基化的过程和分子功能[35]

RNAm6A修饰对人类癌症的作用[57]

本研究影响生物学行为的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA甲基化与肺癌关系的研究进展[J]. 王黎明,罗秋华,刘洋,许顺.  解剖科学进展. 2019(04)
[2]N6 -methyl-adenosine （m6 A） in RNA: An Old Modification with A Novel Epigenetic Function[J]. Yamei Niu,Xu Zhao,Yong-Sheng Wu,Ming-Ming Li,Xiu-Jie Wang,Yun-Gui Yang.  Genomics, Proteomics & Bioinformatics. 2013(01)
[3]DNA甲基化——肿瘤产生的一种表观遗传学机制[J]. 张丽丽,吴建新.  遗传. 2006(07)



本文编号：3082415