桂皮醛通过PI3K/AKT信号通路对于肠癌细胞生物学行为的影响及其作用机制

发布时间：2021-03-26 00:03

　　目的：观察桂皮醛对肠癌细胞增殖、侵袭与黏附、细胞凋亡的影响及与PI3K/Akt信号通路的关系。方法：①MTT法检测不同浓度桂皮醛（0,20,40,60,80μg/ml）作用于人肠癌细胞（Lovo、 SW480、HCT116） 12、24、48h后对细胞增殖能力的影响；②根据第一部分实验最终采用(0，20,40,80μg/ml的浓度及给药后24小时观察的方式进行第二部分实验。使用基质粘附实验及Transwell小室实验检测桂皮醛对细胞侵袭及粘附能力的影响；Western blot法检测检测侵袭粘附相关蛋白（E-cadherin、MMP-2、MMP-9）的表达量。③Hoechst33258荧光染色检测桂皮醛对细胞凋亡形态学的影响；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot法检测细胞凋亡相关基因（Bcl-2、Bax、PARP、cleaved-PARP）的表达量。④进一步探讨桂皮醛对于PI3K/Akt通路的影响,使用40μg/ml的中等剂量处理三种细胞株24h后Western blot法检测PI3K, p-PI3K, Akt及p-Akt的表达量。为明确桂皮醛对于该通路的阻断效果及阻断位... 

【文章来源】：南京中医药大学江苏省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 理论研究
    1. 肠癌的中医学认识和研究
        1.1 病名溯源
        1.2 肠癌的基本病因病机
    2. 肠癌的中医中药治疗研究概况
        2.1 单味中药在肠癌方面的治疗研究进展
        2.2 中药单体诱导肠癌细胞凋亡、抑制侵袭转移的研究
    3. PI3K/AKT信号传导通路在肠癌中的研究进展
        3.1 PI3K/Akt信号通路的组成与功能
        3.2 PI3K/Akt信号通路在肠癌中的表达及调控
第二部分 实验研究
    1. 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 试剂
        1.3 主要仪器及设备
        1.4 实验试剂及药物的配置
    2. 实验方法
        2.1 四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验方法
        2.2 侵袭实验的方法与步骤
        2.3 基质粘附实验的方法与步骤
        2.4 Annexin-V/PI双染法
        2.5 Hochest33258染色
        2.6 蛋白提取以及Western Blot实验
        2.7 Bradford法测蛋白浓度
        2.8 蛋白电泳及具体Western Bolt实验步骤
        2.9 统计学分析
    3. 实验结果
        3.1 桂皮醛对HCT116、LoVo、SW480细胞增殖的影响
        3.2 桂皮醛对HCT116、LoVo、SW480细胞体外侵袭的抑制作用
        3.3 桂皮醛对HCT116、LoVo、SW480细胞粘附能力的影响
        3.4 桂皮醛对HCT116、LoVo、SW480侵袭粘附相蛋白表达的影响
        3.5 桂皮醛对HCT116、LoVo、SW480凋亡的影响
        3.6 桂皮醛对肠癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响
        3.7 桂皮醛通过调节PI3K/Akt信号通路诱导结肠癌细胞凋亡
第三部分 讨论
    1. 细胞侵袭转移
    2. 细胞凋亡
    3. PI3K/AKT信号通路与细胞凋亡
第四部分 结语
参考文献
附录
    附录一 中英文缩写对照
    附录二 攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢



本文编号：3100567