PD-1表达水平对非霍金淋巴瘤中肿瘤相关巨噬细胞功能影响的研究

发布时间：2021-03-30 02:16

　　背景:巨噬细胞是参与固有免疫的重要细胞,根据不同的微环境信号而表现出极高的可塑性是巨噬细胞重要的生物学特点。肿瘤组织招募外周循环中的单核细胞后,诱导其成为肿瘤相关巨噬细胞,主要表现出M2型巨噬细胞的极化特点和功能特点,是参与肿瘤免疫逃逸的重要机制,也被认为与非霍奇金淋巴瘤肿瘤发生有着密切关系。而机体参与肿瘤免疫逃逸的另一关键所在是以PD-1为代表的免疫检查点。PD-1主要表达于活化的T细胞表面,但在B细胞、NK细胞、巨噬细胞、DC细胞表面均可表达。PD-1的表达具有抑制T细胞活化和活性的作用。但其在巨噬细胞表面表达所带来的影响尚未能完全理解。通过某些疾病模型,我们发现PD-1阳性的巨噬细胞的抗炎功能出现缺损,从而促进免疫逃逸;PD-1阳性单核细胞的增多,会促进单核巨噬细胞分泌IL-10,造成巨噬细胞功能紊乱。PD-1阳性的肿瘤相关巨噬细胞比例可能随着肿瘤分期的进展而增加,同时巨噬细胞表面PD-1的表达会抑制巨噬细胞吞噬功能。基于以上理论,我们试图通过检测非霍奇金淋巴瘤患者病理组织中肿瘤相关巨噬细胞与PD-1的共表达情况,并初步探索PD-1表达水平对非霍奇金淋巴瘤中肿瘤相关巨噬细胞功能的... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１Ｔ－ＮＨＬ病理组织中ＴＡＭｓ表型（ＣＤ６８、ＣＤ２０６）表达情况??

为１７３０±１３８．６；而作为对照的ＰＤ－１表达野生型ＴＨＰ－１细胞株（ＭＯＣＫ组）中，??ＰＤＣＤ１?的ＡＣｔ?值为?１５．８４士０．１１，其表达丰度（２＿ＡＡＣｔ）为?１．００±０．０７，因此?ＯＥ?组??中ＰＤＣＤ１基因表达水平显著高于ＭＯＣＫ组（；？＝０．００２，见图３）。??２０００ｎ?Ｉ?Ｉ??ｐ＝０．００２?—ｌｙ—??趔?１５００－??价??刼醫??５〇〇－??ｎ??ＵＪ?１?１???图３?ＯＥ组与ＭＯＣＫ组ＴＨＰ－１细胞株中ＰＤＣＤ－１基因表达丰度??３．３流式细胞术检测ＰＤ－１髙表达ＴＨＰ－１细胞株ＰＤ－１表达情况??根据流式结果显示，ＯＥ组ＰＤ－１平均荧光强度为１０３８．０５，ＭＯＣＫ组ＰＤ－１??平均荧光强度为１５．７３，因此ＯＥ组ＰＤ－１表达强度显著高于ＭＯＣＫ组（；？＜０．０５，??如图４。??２８??

组ＰＤ－１表达的Ｄｏｔ－Ｇｒａｐｈ和Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ，?Ｃ和Ｄ分别为ＭＯＣＫ组ＰＤ－１表达??的?Ｄｏｔ－Ｇｒａｐｈ?和?Ｈｉｓｔｏｇｒａｍ。??４．讨论??在本课题的第二部分，我们通过慢病毒转染的方式构建了?ＰＤ－１高表达的单??核细胞株。我们选择了?ＴＨＰ－１细胞株作为实验对象，该细胞株来源于急性单核??细胞白血病，经验证，其野生型ＰＤ－１表达丰度低，有助于与构建的ＰＤ－１高表??达细胞株形成有效的对比。而ＴＨＰ－１细细胞再适宜浓度的ＰＭＡ刺激后，会贴壁??分化为巨噻细胞，进而可以受到细胞因子、肿瘤分泌因子的影响，分化成不同类??型的巨噬细胞，并表现出相应的巨噬细胞功能特点。??慢病毒转染则主要利用慢病毒载体，将目的基因导入宿主细胞内表达或复制，??而慢病毒属于逆转录病毒科，以１型人免疫缺陷病毒为代表，不同于普通病毒载??体可能因随机整合引起突变、经免疫反应而迅速降解、外源基因容易发生基因沉??默等特点［５７］，慢病毒载体具有转移基因片段容量大、不易诱发宿主免疫反应、安??全性较好，不经能感染分裂细胞，且能感染终末分化细胞和非分裂细胞的特点，??

【参考文献】：
期刊论文
[1]用慢病毒载体制备转基因动物的研究进展[J]. 邓继先,沈伟.  中国生物工程杂志. 2004(09)



本文编号：3108658