TRIP13通过Wnt信号通路及EMT调控肺癌增殖和侵袭的机制研究

发布时间：2021-04-01 11:33

　　肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,并且其发病率逐年递增,其中大约85%-90%的肺癌病例被诊断为非小细胞肺癌。非小细胞肺癌主要分为肺腺癌、鳞状细胞癌和大细胞癌等,其中最常见的是肺腺癌。非小细胞肺癌患者的5年生存率很低,根据肿瘤发生的部位和分期的不同,患者生存率在4%-17%之间。因此,探索新的生物标记（癌基因/抑癌基因）对非小细胞肺癌的预防、诊断和治疗起到重要的作用。Wnt信号通路与癌细胞的增殖、侵袭相关。Wnt信号通路中,Wnt蛋白与Frizzled（Fz）家族受体相互结合,包括脂蛋白受体相关蛋白LRP5/6,从而抑制GSK3复合物的活性,促使了β-catenin在细胞浆中的积聚,并进入细胞核,之后通过与TCF/LEF转录因子结合,诱导Wnt通路靶基因的激活。TRIP13是ATPase家族蛋白的成员,是最早在小鼠中发现的一种有丝分裂检查点相关蛋白。大量研究证实,TRIP13可以调控有丝分裂检查点相关蛋白并且对前列腺癌、结肠直肠癌、上皮性卵巢癌等肿瘤的发生发展相关。我们的研究发现TRIP13在肺鳞癌及肺腺癌中均高表达,且TRIP13的表达水平与肺癌患者的预后相关。体外实验结果显示,TRIP1... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

TRIP13在肺癌中的表达情况及其与患者生存率的关系

中国医科大学硕士学位论文10高于对照组（P<0.05）。而干扰TRIP13的表达后，细胞的增殖率和菌落数明显低于对照组细胞（P<0.05）（图3a–b）。Matrigel侵袭实验测定表明，过表达TRIP13之后细胞的侵袭能力明显高于对照组（P<0.05），而干扰TRIP13之后，细胞的侵袭能力明显低于对照组（图3c）。图2TRIP13在肺癌细胞中的定位和表达情况。（a）通过免疫荧光检测（400×），发现在正常支气管上皮细胞（HBE）和肺癌细胞中，TRIP13定位于细胞质。（b）Westernblot分析TRIP13在细胞系中的蛋白表达水平，GAPDH作为内参。

中国医科大学硕士学位论文11图3TRIP13对肺癌细胞增殖，集落形成和侵袭能力的影响。（a）在A549和H1299细胞中使用CCK8进行细胞增殖检测，（b）集落形成实验检测（c）Matrigel侵袭检测。*，P<0.05，**，P<0.01；NC，阴性对照细胞；TRIP13，使用TRIP13质粒转染的细胞；SiNC，使用对照siRNA转染的细胞；SiTRIP13，使用TRIP13-siRNA转染的细胞。3.3TRIP13促进Wnt信号通路的激活本研究检测了Wnt信号通路相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况。与对照组相比，在H1299和A549细胞系中过表达TRIP13后，LRP6，Activeβ-catenin和转录因子TCF4和LEF1的表达水平上调，而在干扰TRIP13后，蛋白水平发生下调。GSK3β的表达在TRIP13过表达后降低，在干扰TRIP13后表达升高。此外，Wnt信号通路相关靶蛋白（包括c-Myc，MMP7和CyclinD1）的水平在TRIP13过表达后表达升高，而在干扰TRIP13后，蛋白水平发生下调。（图4）


本文编号：3113262