17-AAG与Belinostat协同抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和侵袭
发布时间：2021-04-07 08:29
乳腺癌是威胁女性健康最常见的癌症之一,其中三阴性乳腺癌的治疗更为棘手。乳腺癌的临床治疗主要以切除或化疗为主,但很大程度上面临着耐药和转移的风险。药物联合策略在近几年被广泛用于临床,能有效减少因单一药物化疗而产生的不良副作用,也有助于克服乳腺癌临床治疗中常见的耐药性。HSP90和HDAC作为在治疗癌症疾病中潜在的靶点,具有重大的研究意义。在本研究中,HSP90抑制剂17-AAG和HDAC6抑制剂Belinostat处理不同类型的乳腺癌细胞,通过细胞增殖实验检测抑制剂对各种乳腺癌细胞的联用指数（CI）差异,再通过RNA测序技术和细胞划痕迁移等实验探究药物联用组合在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞中的相关机制。我们发现17-AAG和Belinostat联用在三阴性乳腺癌中具有较高的敏感性,与单药相比,联合用药使得MDA-MB-231细胞的增殖抑制和凋亡率均显著提高,三个浓度组的联用指数均小于1。初步探究给药组对HSP90、tubulin和HDAC6调控网络的影响。RNA测序数据分析显示,药物联用组的差异显著基因与细胞迁移密切相关,TEAD家族蛋白的mRNA和蛋白表达水平明显降低,YAP的...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
三阴性乳腺癌治疗药物的结构式
第1章引言6应激和细胞死亡是相互联系的，响应应激而诱导的HSP似乎在细胞凋亡控制的关键调控点起重要作用。HSP的抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白与多种细胞蛋白相互作用，它们的表达水平可以决定细胞应激死亡。伴侣蛋白通常根据其分子量分为HSP40、HSP60、HSP70、HSP90、HSP100和小分子HSPs，它们参与多种蛋白质组的维护，包括从头折叠、变性蛋白质的重折叠、寡聚组装、蛋白质运输和蛋白水解降解的帮助。其中HSP70的HSC70和应激诱导型形式是蛋白质折叠和蛋白稳态控制中的重要角色。研究表明，增加HSP70水平可有效预防疾病模型中的毒性蛋白质聚集[39]。HSP90是一种分子伴侣蛋白，它与促进癌细胞生长和生存的多种突变、嵌合和过表达的信号蛋白的稳定性和功能相关。HSP90形成了一个蛋白质稳定中心，控制着真核细胞中许多重要的信号通路，这些功能包括细胞周期进程、端粒维持、细胞凋亡、有丝分裂信号转导、囊泡介导的转运、先天免疫和靶向蛋白质降解等[40]。如图1.2所示，总结了HSP90部分胞内胞外的客户蛋白，胞内研究的客户蛋白已经超过了100种。图1.2细胞内和细胞外HSP90客户蛋白的部分列表[41]已有报道全长的HSP90晶体结构，提供给人们许多有用的信息[42]。HSP90是由其C端结构域组装亚基的二聚体，N末端结构域结合并水解ATP，并通过中间结构域与C末端结构域连接。中间结构域参与底物结合并与AHA1相互作用。与其他分子伴侣相似，HSP90二聚体经历了ATP驱动的反应循环，并伴有相当大的结构重排[43]，见图1.3。与ATP结合导致N末端结构域的二聚化，形成HSP90“分子钳”。水解后，ATPase结构域解离，HSP90单体在N端分开，
第1章引言7多种辅助因子调节该循环包括CDC37将某些激酶底物传递给HSP90，抑制ATPase活性，而HOP抑制N端二聚化；AHA1刺激ATP水解，而p23在ATP水解之前稳定HSP90的二聚形式[44]。图1.3HSP90分子伴侣的ATP酶循环系统[44]HSP90占细胞总蛋白含量的1%，在癌细胞中的表达量是正常细胞的10倍，它是维持癌细胞中许多重要的客户蛋白质的稳定性和活性所必需的[45]。由于癌细胞依赖于癌蛋白，单个癌蛋白的失活通常会导致癌细胞停止增殖或癌细胞死亡[46]。突变蛋白的稳定性不如正常蛋白，但其稳定性依赖于HSP90，与正常细胞相反，癌细胞要承受多种压力，例如低pH，缺氧和营养缺乏等，因此，癌细胞高度依赖于HSP90分子伴侣机制的活性[47]。HSP90对于许多参与引发信号转导通路异常的蛋白稳定性和活性是密切相关的，HSP90常被称为癌症伴侣[41]。因此，抑制HSP90伴侣蛋白活性可以有助于癌症治疗。1.2.2靶向HSP90抗肿瘤的药物近年来，越来越多的HSP90小分子抑制剂被报道。由于HSP90抑制剂在癌细胞中比在正常细胞中更容易与HSP90结合，以HSP90为靶点的药物在肿瘤治
本文编号：3123149
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
三阴性乳腺癌治疗药物的结构式
第1章引言6应激和细胞死亡是相互联系的，响应应激而诱导的HSP似乎在细胞凋亡控制的关键调控点起重要作用。HSP的抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白与多种细胞蛋白相互作用，它们的表达水平可以决定细胞应激死亡。伴侣蛋白通常根据其分子量分为HSP40、HSP60、HSP70、HSP90、HSP100和小分子HSPs，它们参与多种蛋白质组的维护，包括从头折叠、变性蛋白质的重折叠、寡聚组装、蛋白质运输和蛋白水解降解的帮助。其中HSP70的HSC70和应激诱导型形式是蛋白质折叠和蛋白稳态控制中的重要角色。研究表明，增加HSP70水平可有效预防疾病模型中的毒性蛋白质聚集[39]。HSP90是一种分子伴侣蛋白，它与促进癌细胞生长和生存的多种突变、嵌合和过表达的信号蛋白的稳定性和功能相关。HSP90形成了一个蛋白质稳定中心，控制着真核细胞中许多重要的信号通路，这些功能包括细胞周期进程、端粒维持、细胞凋亡、有丝分裂信号转导、囊泡介导的转运、先天免疫和靶向蛋白质降解等[40]。如图1.2所示，总结了HSP90部分胞内胞外的客户蛋白，胞内研究的客户蛋白已经超过了100种。图1.2细胞内和细胞外HSP90客户蛋白的部分列表[41]已有报道全长的HSP90晶体结构，提供给人们许多有用的信息[42]。HSP90是由其C端结构域组装亚基的二聚体，N末端结构域结合并水解ATP，并通过中间结构域与C末端结构域连接。中间结构域参与底物结合并与AHA1相互作用。与其他分子伴侣相似，HSP90二聚体经历了ATP驱动的反应循环，并伴有相当大的结构重排[43]，见图1.3。与ATP结合导致N末端结构域的二聚化，形成HSP90“分子钳”。水解后，ATPase结构域解离，HSP90单体在N端分开，
第1章引言7多种辅助因子调节该循环包括CDC37将某些激酶底物传递给HSP90，抑制ATPase活性，而HOP抑制N端二聚化；AHA1刺激ATP水解，而p23在ATP水解之前稳定HSP90的二聚形式[44]。图1.3HSP90分子伴侣的ATP酶循环系统[44]HSP90占细胞总蛋白含量的1%，在癌细胞中的表达量是正常细胞的10倍，它是维持癌细胞中许多重要的客户蛋白质的稳定性和活性所必需的[45]。由于癌细胞依赖于癌蛋白，单个癌蛋白的失活通常会导致癌细胞停止增殖或癌细胞死亡[46]。突变蛋白的稳定性不如正常蛋白，但其稳定性依赖于HSP90，与正常细胞相反，癌细胞要承受多种压力，例如低pH，缺氧和营养缺乏等，因此，癌细胞高度依赖于HSP90分子伴侣机制的活性[47]。HSP90对于许多参与引发信号转导通路异常的蛋白稳定性和活性是密切相关的，HSP90常被称为癌症伴侣[41]。因此，抑制HSP90伴侣蛋白活性可以有助于癌症治疗。1.2.2靶向HSP90抗肿瘤的药物近年来，越来越多的HSP90小分子抑制剂被报道。由于HSP90抑制剂在癌细胞中比在正常细胞中更容易与HSP90结合，以HSP90为靶点的药物在肿瘤治
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