RMP通过ATM/NFκB通路促进肝癌细胞的DNA损伤修复

发布时间：2021-04-09 05:22

　　目的:研究在肝癌中RMP（RPB5 Mediating Protein）介导的DNA损伤修复及其分子机制。方法:1、肝癌细胞以及肝正常细胞经60Coγ射线处理后,Real-time PCR和Western blot检测RMP的mRNA和蛋白表达水平。2、通过Real-time PCR检测各细胞株辐照后不同时间点Rad50、Mre11和Ku70的mRNA表达水平。3、通过Western blot检测各细胞株辐照后不同时间点Rad50、Mre11、Ku70、ATM、p-ATM、p65、p-p65、AKT、p-AKT、IκB的蛋白表达水平。4、通过免疫共沉淀实验检测RMP与Mre11的相互作用。5、通过Western blot检测瞬时转染不同剂量RMP过表达质粒pCDNA3.1-RMPo的HepG2细胞中p65、p-p65、IκB的蛋白表达水平。6、通过Western blot检测ATM抑制剂Ku55933处理后各细胞株p65入核情况。7、通过Western blot检测NFκB磷酸化抑制剂Bay 11-7082处理后各细胞株中p65和p-p65的蛋白表达水平。8、通过彗星电泳实验检测NFκ... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
引言
材料与方法
    1 材料
    2 主要仪器设备
    3 实验方法
实验结果
    1 肝癌细胞系（HepG2、SMMC-7721）和肝正常细胞系（QSG-7701、HL-7702）辐照之后不同时间点RMP基因的mRNA表达量
    2 肝癌细胞系（HepG2、SMMC-7721）和肝正常细胞系（QSG-7701、HL-7702）辐照之后不同时间点RMP基因的蛋白表达水平
    3 检测RMP对DNA损伤修复相关基因mRNA表达量的影响
    4 检测RMP对DNA损伤修复相关基因蛋白表达量的影响
    5 RMP与Mre11蛋白的相互作用情况
    6 RMP表达对ATM表达量及其磷酸化水平的影响
    7 RMP表达对p65表达量及其磷酸化水平的影响
    8 RMP表达量的不同对p65磷酸化水平的影响
    9 抑制剂Ku55933抑制p65入核
    10 检测Bay 11-7082对肝癌细胞内p-p65蛋白表达的影响
    11 抑制剂Bay 11-7082抑制RMP对肝癌细胞DNA损伤修复的促进作用
    12 RMP、p-ATM、p-p65在临床病例中的表达
结论
讨论
参考文献
综述：关于DNA双链损伤修复信号通路的研究
    参考文献
展望
本文受下列资金资助
缩略词表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]原发性肝癌放射治疗进展[J]. 代丽,赵恒芳,刘孜.  胃肠病学. 2008(11)
[2]肿瘤细胞放射敏感性与放射诱导凋亡关系的研究[J]. 钟军,熊戴群,罗辉,陈文学.  实用癌症杂志. 2007(06)



本文编号：3127000