沉默SCAMP1-TV2通过结合PUM2促进INSM1 mRNA降解抑制乳腺癌细胞的恶性生物学行为的机制研究
发布时间：2021-04-14 11:35
目的:乳腺癌是目前女性最常见的癌症之一,也是影响女性生命的疾病之一。目前乳腺癌的发病机制尚不明确。在治疗方面,分子靶向治疗在乳腺癌的综合治疗中发挥重要作用,然而仍有部分乳腺癌患者,特别是三阴性乳腺癌患者的5年生存期未见明显改善。探索乳腺癌发生发展的机制,对于乳腺癌治疗策略的选择十分重要。越来越多的研究表明,长链非编码RNAs（long noncoding RNA,lncRNA）在包括乳腺癌在内的多种恶性肿瘤的进展中发挥重要调节作用。LncRNAs是一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA。研究表明,lnRNAs能够调控多种肿瘤的发生发展,发挥促癌基因或抑癌基因的作用。LncRNA SCAMP1-TV2（Homo sapiens secretory carrier membrance protein l transcript variant 2,genebank,NR110855）是SCAMP1基因的一个转录本,此转录本无法翻译成蛋白质。目前尚未见关于lncRNA SCAMP1-TV2在乳腺癌等癌症中的相关报道。RNA结合蛋白（RNA binding ptotein...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
SCAMP1-TV2在乳腺癌组织和细胞中的表达，以及沉默SCAMP1-TV2对乳腺癌细胞生物学行为的影响
中国医科大学博士学位论文16图2.PUM2在乳腺癌组织和细胞中的表达，以及过表达PUM2对乳腺癌细胞生物学行为的影响(A)PUM2在癌旁、luminalA乳腺癌和三阴性乳腺癌中的表达。数据表示为平均值±标准差(n=20)，**P<0.01，与癌旁组织组相比。(B)PUM2在乳腺癌(luminalA)组织及癌旁组织中的表达水平。数据表示为平均值±标准差(n=20)，**P<0.01，与癌旁组织组相比。(C)乳腺癌(三阴性)组织及癌旁组织中PUM2的表达水平。数据表示为平均值±标准差(n=20)，
啾龋琒CAMP1-TV2与PUM2在MCF-7、MDA-MB-231细胞中产生富集。沉默SCAMP1-TV2后，PUM2与SCAMP1-TV2的富集度显著降低。随后本研究进行了RNApull-down实验进一步明确SCAMP1-TV2与PUM2的结合作用。如图3C-D所示，在MCF-7、MDA-MB-231细胞系中，应用PUM2抗体进行检测，只在野生型SCAMP1-TV2正义链RNA探针Pull-Down样本中检测到PUM2的存在，而在突变型SCAMP1-TV2正义链RNA探针、SCAMP1-TV2反义链RNA探针Pull-Down样本中均未检测到PUM2的存在。上述结果表明SCAMP1-TV2能够靶向结合PUM2，沉默SCAMP1-TV2降低了二者的结合作用。图3.SCAMP1-TV2与PUM2存在特异性结合序列(A)PUM2与SCAMP1-TV2的结合序列。(B)用抗PUM2抗体对MCF-7和MDA-MB-231细胞裂解液进行RNA免疫沉淀，qRT-PCR检测SCAMP1-TV2表达水平。数据显示为平均值
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳腺肿瘤微环境靶向治疗的研究进展[J]. 杨云松,江一舟,胡欣,邵志敏. 中国癌症杂志. 2019(12)
[2]长链非编码RNA与肿瘤关系研究进展[J]. 高荧苒,王大勇,李涛,姬新颖. 河南大学学报(医学版). 2016(03)
本文编号：3137245
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
SCAMP1-TV2在乳腺癌组织和细胞中的表达，以及沉默SCAMP1-TV2对乳腺癌细胞生物学行为的影响
中国医科大学博士学位论文16图2.PUM2在乳腺癌组织和细胞中的表达，以及过表达PUM2对乳腺癌细胞生物学行为的影响(A)PUM2在癌旁、luminalA乳腺癌和三阴性乳腺癌中的表达。数据表示为平均值±标准差(n=20)，**P<0.01，与癌旁组织组相比。(B)PUM2在乳腺癌(luminalA)组织及癌旁组织中的表达水平。数据表示为平均值±标准差(n=20)，**P<0.01，与癌旁组织组相比。(C)乳腺癌(三阴性)组织及癌旁组织中PUM2的表达水平。数据表示为平均值±标准差(n=20)，
啾龋琒CAMP1-TV2与PUM2在MCF-7、MDA-MB-231细胞中产生富集。沉默SCAMP1-TV2后，PUM2与SCAMP1-TV2的富集度显著降低。随后本研究进行了RNApull-down实验进一步明确SCAMP1-TV2与PUM2的结合作用。如图3C-D所示，在MCF-7、MDA-MB-231细胞系中，应用PUM2抗体进行检测，只在野生型SCAMP1-TV2正义链RNA探针Pull-Down样本中检测到PUM2的存在，而在突变型SCAMP1-TV2正义链RNA探针、SCAMP1-TV2反义链RNA探针Pull-Down样本中均未检测到PUM2的存在。上述结果表明SCAMP1-TV2能够靶向结合PUM2，沉默SCAMP1-TV2降低了二者的结合作用。图3.SCAMP1-TV2与PUM2存在特异性结合序列(A)PUM2与SCAMP1-TV2的结合序列。(B)用抗PUM2抗体对MCF-7和MDA-MB-231细胞裂解液进行RNA免疫沉淀，qRT-PCR检测SCAMP1-TV2表达水平。数据显示为平均值
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳腺肿瘤微环境靶向治疗的研究进展[J]. 杨云松,江一舟,胡欣,邵志敏. 中国癌症杂志. 2019(12)
[2]长链非编码RNA与肿瘤关系研究进展[J]. 高荧苒,王大勇,李涛,姬新颖. 河南大学学报(医学版). 2016(03)
本文编号：3137245
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