EphA2通过调控Grb2表达参与肝癌细胞侵袭的机制研究
发布时间：2021-04-16 02:54
目的:检测促红细胞生成素肝细胞受体A2（EphA2）蛋白在肝细胞肝癌中的表达及其参与调控肝癌细胞侵袭的可能机制。方法:培养人肝细胞HL-7702和肝癌细胞株MHCC97H、Hep3B,采用siRNA干扰法抑制肝癌细胞中EphA2、生长因子受体结合蛋白2（Grb2）的表达,设立未处理组（未处理肝癌细胞）,对照组（加入对照siRNA）和siRNA干扰组（加入siRNA干扰EphA2或Grb2）,Western blot法检测不同处理前后细胞中EphA2、Grb2蛋白的表达情况,Transwell小室检测细胞侵袭性。结果:体外侵袭实验结果显示MHCC97H、Hep3B、HL-7702穿透细胞的数量分别为:（401±3）/10HPF、（111±4）/10HPF、（31±3）/10HPF,人正常肝细胞与人肝癌细胞相比具有统计学意义（P<0.05）,EphA2、Grb2蛋白在人正常肝细胞与人肝癌细胞中的相对表达量相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;siRNA抑制EphA2表达后,Hep3B和MHCC97H细胞系未处理组、对照组、siRNA干扰组穿透的细胞数量分别为:（111±4）...
【文章来源】：西安医学院陕西省
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
使用Transwell小室检测HL-7702、Hep3B和MHCC97H细胞的穿透细胞数，与HL-7702相比，P＜0.05,＃与Hep3B相比，P＜0.05
图 1：使用 Transwell 小室检测 HL-7702、Hep3B 和 MHCC97H 细胞的穿透细胞数， 与 HL-7702 相比，P＜0.05,＃与 Hep3B 相比，P＜0.05。2 Western blot 实验结果EphA2 蛋白、Grb2 蛋白在人正常肝细胞株 HL-7702 和肝癌细胞株 MHCC97H、Hep3B 的表达如图所示，人正常肝细胞细胞株 HL-7702 和肝癌细胞株 MHCC97H、Hep3B 表 达 相 比 ， 差 异 均 具 有 统 计 学 意 义 （ P<0.05 ）， 见 图 2 。
西安医学院临床医学硕士专业学位论文25⑥将上述500μL的混合液加入6孔板内，充分混匀；⑦将6孔板置于孵箱内继续培养4-6h，用原培养基替换上述培养基，继续培养48h，后收集细胞用于实验。实验分组：未处理组（未进行任何转染的肝癌细胞），对照组（加入对照siRNA）和siRNA干扰组（加入siRNA干扰EphA2）。2.3实验结果1Transwell侵袭实验结果体外侵袭实验结果显示400倍显微镜下肝癌细胞株MHCC97H未处理组、对照组、siRNA干扰组侵袭细胞数分别为（405±5）/10HPF、（399±4）/10HPF、（155±7）/10HPF，肝癌细胞株Hep3B未处理组、对照组、siRNA干扰组侵袭细胞数分别为（111±4）/10HPF、（108±5）/10HPF、（53±3）/10HPF，siRNA干扰组较对照组明显降低（P<0.05），见下图3、4。图3：siRNA干扰法抑制EphA2表达后，Transwell小室检测肝癌细胞Hep3B和MHCC97H的穿透细胞数，与对照组相比，P＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Fascin-1在胰腺癌中的表达及意义[J]. 苏宝威,和华,詹勇,刘海潮,白明辉. 河南医学研究. 2019(21)
[2]甲状腺乳头状癌BRAFV600E基因突变对VEGF和MMP-9表达的影响[J]. 于婧,王凤琴,姚文娟,吴冬梅,刘大鹏. 基础医学与临床. 2019(11)
[3]VEGF表达下调抑制人宫颈癌细胞增殖转移相关机制研究[J]. 史爱英. 中国实验诊断学. 2019(10)
[4]Eph/ephrin信号系统与肿瘤的关系[J]. 刘正,王静,沈伟,赵舒煊,袁文华,周海宇. 华南国防医学杂志. 2019(08)
[5]EphA2和Twist蛋白在宫颈病变中的表达及与宫颈癌患者预后的关系[J]. 叶俊良,陈晓宇,赵卫东,陈先侠. 实用医学杂志. 2019(15)
[6]Fascin-1在肝内胆管细胞癌中的表达及意义[J]. 苏宝威,白明辉,刘海潮. 广东医学. 2019(08)
[7]原发性肝癌治疗进展[J]. 万赤丹,王国斌. 腹部外科. 2019(01)
[8]β-catenin与Fascin-1在结肠癌中的表达及与肿瘤病情的相关性[J]. 邹佩钢,贾映东,杨学军. 临床和实验医学杂志. 2019(03)
[9]2018全球癌症统计报告解读[J]. 王宁,刘硕,杨雷,张希,袁延楠,李慧超,季加孚. 肿瘤综合治疗电子杂志. 2019(01)
[10]利用TCGA数据库分析GRB2在肝细胞肝癌中的表达及临床意义[J]. 王锃涵,党钦,史青苗,何玉婷. 河南医学研究. 2019(02)
博士论文
[1]MMP-9在食管鳞癌上皮间质转化中的作用及机制研究[D]. 白雪.郑州大学 2017
[2]Notch信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移的机制研究[D]. 周亮.第四军医大学 2013
本文编号：3140600
【文章来源】：西安医学院陕西省
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
使用Transwell小室检测HL-7702、Hep3B和MHCC97H细胞的穿透细胞数，与HL-7702相比，P＜0.05,＃与Hep3B相比，P＜0.05
图 1：使用 Transwell 小室检测 HL-7702、Hep3B 和 MHCC97H 细胞的穿透细胞数， 与 HL-7702 相比，P＜0.05,＃与 Hep3B 相比，P＜0.05。2 Western blot 实验结果EphA2 蛋白、Grb2 蛋白在人正常肝细胞株 HL-7702 和肝癌细胞株 MHCC97H、Hep3B 的表达如图所示，人正常肝细胞细胞株 HL-7702 和肝癌细胞株 MHCC97H、Hep3B 表 达 相 比 ， 差 异 均 具 有 统 计 学 意 义 （ P<0.05 ）， 见 图 2 。
西安医学院临床医学硕士专业学位论文25⑥将上述500μL的混合液加入6孔板内，充分混匀；⑦将6孔板置于孵箱内继续培养4-6h，用原培养基替换上述培养基，继续培养48h，后收集细胞用于实验。实验分组：未处理组（未进行任何转染的肝癌细胞），对照组（加入对照siRNA）和siRNA干扰组（加入siRNA干扰EphA2）。2.3实验结果1Transwell侵袭实验结果体外侵袭实验结果显示400倍显微镜下肝癌细胞株MHCC97H未处理组、对照组、siRNA干扰组侵袭细胞数分别为（405±5）/10HPF、（399±4）/10HPF、（155±7）/10HPF，肝癌细胞株Hep3B未处理组、对照组、siRNA干扰组侵袭细胞数分别为（111±4）/10HPF、（108±5）/10HPF、（53±3）/10HPF，siRNA干扰组较对照组明显降低（P<0.05），见下图3、4。图3：siRNA干扰法抑制EphA2表达后，Transwell小室检测肝癌细胞Hep3B和MHCC97H的穿透细胞数，与对照组相比，P＜0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Fascin-1在胰腺癌中的表达及意义[J]. 苏宝威,和华,詹勇,刘海潮,白明辉. 河南医学研究. 2019(21)
[2]甲状腺乳头状癌BRAFV600E基因突变对VEGF和MMP-9表达的影响[J]. 于婧,王凤琴,姚文娟,吴冬梅,刘大鹏. 基础医学与临床. 2019(11)
[3]VEGF表达下调抑制人宫颈癌细胞增殖转移相关机制研究[J]. 史爱英. 中国实验诊断学. 2019(10)
[4]Eph/ephrin信号系统与肿瘤的关系[J]. 刘正,王静,沈伟,赵舒煊,袁文华,周海宇. 华南国防医学杂志. 2019(08)
[5]EphA2和Twist蛋白在宫颈病变中的表达及与宫颈癌患者预后的关系[J]. 叶俊良,陈晓宇,赵卫东,陈先侠. 实用医学杂志. 2019(15)
[6]Fascin-1在肝内胆管细胞癌中的表达及意义[J]. 苏宝威,白明辉,刘海潮. 广东医学. 2019(08)
[7]原发性肝癌治疗进展[J]. 万赤丹,王国斌. 腹部外科. 2019(01)
[8]β-catenin与Fascin-1在结肠癌中的表达及与肿瘤病情的相关性[J]. 邹佩钢,贾映东,杨学军. 临床和实验医学杂志. 2019(03)
[9]2018全球癌症统计报告解读[J]. 王宁,刘硕,杨雷,张希,袁延楠,李慧超,季加孚. 肿瘤综合治疗电子杂志. 2019(01)
[10]利用TCGA数据库分析GRB2在肝细胞肝癌中的表达及临床意义[J]. 王锃涵,党钦,史青苗,何玉婷. 河南医学研究. 2019(02)
博士论文
[1]MMP-9在食管鳞癌上皮间质转化中的作用及机制研究[D]. 白雪.郑州大学 2017
[2]Notch信号通路参与肝癌细胞侵袭迁移的机制研究[D]. 周亮.第四军医大学 2013
本文编号：3140600
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