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CARD10通过调节NF-κB信号通路促进肾癌进展

发布时间:2021-04-17 12:10
  【研究背景】肾细胞癌(简称肾癌)是泌尿科常见的肿瘤,近年来每年新发病例数一直显现逐年上升的情形。肾癌的早期症状不明显,诊断时约1/4-1/3病人已发生转移。发生转移的肾癌往往失去手术机会,但发展至此阶段的病人药物治疗效果不佳,因此需要进一步研究肾癌的发生机制,为治疗提供新的方向。CARD10(半胱天冬酶募集结构蛋白10)又叫做CARMA3,已经有研究表明CARD10的表达与肿瘤的发生密切相关,其作用主要是通过激活转录因子NF-κB促进肿瘤进展。然而,此信号通路在肾癌中的是否存在仍不清楚。【研究目的】CARD10是否在肾癌细胞中高表达,抑制CARD10表达是否能抑制肾癌细胞的增殖、侵袭、迁移、上皮间质转化和促进其凋亡,及其能否通过NF-κB信号通路进行调节?【研究方法】1.首先培养ACHN细胞、786-O细胞和HK-2细胞,并提取其总蛋白,使用蛋白免疫印迹法检测CARD10在三种细胞的表达情况。2.然后用sh RNA进行细胞转染肾癌ACHN和786-O细胞,形成不含目的基因(sh GFP)转染的阴性对照组和含目的基因(特异性CARD10sh RNA)转染的实验组细胞,在蛋白分子水平检测其... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

CARD10通过调节NF-κB信号通路促进肾癌进展


经特异性CARD10shRNA转染后,肾癌细胞(786-O和ACHN)的增殖活力明显降低

肾癌,细胞,转染


安徽医科大学硕士学位论文25图3:经转染后,肾癌786-O和ACHN细胞DNA复制受到明显抑制。A,C:786-O-shCARD10与另外两组细胞相比,G1期细胞百分比较高,而S期细胞百分比减低(*p<0.05,**p<0.05);786-O和786-O-shGFP组细胞未见明显差异。B,D:ACHN-shCARD10与ACHN和ACHN-shGFP组细胞相比,G1期细胞比例较高,而S期细胞比例减低(*p<0.05)。Fig3:GenereplicationofRCCcellswassignificantlyinhibitedbyspecificCARD10shRNAtransfection.A,C:Comparedwith786-O-shCARD10and786-O-shGFP,thepercentageofG1stagecellswashigher,whilethatofSstagecellswaslower(*p<0.05,**p<0.05);therewasnosignificantdifferencebetween786-Oand786-O-shGFP.B,D:comparedwithACHNandACHN-shGFP,theproportionofcellsinG1phasewashigher,whilethatinSphasewaslower(*p<0.05).CDABCDA图4:经特异性CARD10shRNA转染后,肾癌细胞(786-O和ACHN)凋亡比率明显升高。

细胞,肾癌,转染,凋亡


安徽医科大学硕士学位论文25图3:经转染后,肾癌786-O和ACHN细胞DNA复制受到明显抑制。A,C:786-O-shCARD10与另外两组细胞相比,G1期细胞百分比较高,而S期细胞百分比减低(*p<0.05,**p<0.05);786-O和786-O-shGFP组细胞未见明显差异。B,D:ACHN-shCARD10与ACHN和ACHN-shGFP组细胞相比,G1期细胞比例较高,而S期细胞比例减低(*p<0.05)。Fig3:GenereplicationofRCCcellswassignificantlyinhibitedbyspecificCARD10shRNAtransfection.A,C:Comparedwith786-O-shCARD10and786-O-shGFP,thepercentageofG1stagecellswashigher,whilethatofSstagecellswaslower(*p<0.05,**p<0.05);therewasnosignificantdifferencebetween786-Oand786-O-shGFP.B,D:comparedwithACHNandACHN-shGFP,theproportionofcellsinG1phasewashigher,whilethatinSphasewaslower(*p<0.05).CDABCDA图4:经特异性CARD10shRNA转染后,肾癌细胞(786-O和ACHN)凋亡比率明显升高。

【参考文献】:
期刊论文
[1]转移性肾癌靶向治疗和免疫治疗的现状与进展[J]. 吴海欧,于常华.  现代肿瘤医学. 2019(21)
[2]上皮间质转化在肿瘤侵袭转移中的研究进展[J]. 张彦璐,陈影,应国清.  浙江化工. 2019(07)
[3]肾癌基础研究新进展[J]. 刘浩然,叶章群.  现代泌尿生殖肿瘤杂志. 2017(05)
[4]表皮生长因子及其作用机制[J]. 胡莹莹,王琦,陈瑛.  哈尔滨师范大学自然科学学报. 2013(03)
[5]CARMA3: A novel scaffold protein in regulation of NF-κB activation and diseases[J]. Jiyuan Sun, Department of Neuro-Oncology, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Houston, Texas, TX 77030, United States.  World Journal of Biological Chemistry. 2010(12)



本文编号:3143430

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