七鳃鳗PHB2对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的影响

发布时间：2021-04-20 23:05

　　根据世界卫生组织的《世界癌症报告》,肺癌约占癌症死亡总人数的20%。肺癌中80%为非小细胞肺癌,其中30%的原癌基因KRAS发生了突变。KRAS突变的非小细胞肺癌患者数量很多,但有效的临床治疗方法并不多,因此对KRAS突变的非小细胞肺癌的研究显得尤为重要。真核生物中抗增殖蛋白含有两个同源亚型抗增殖蛋白1（Prohibitin1,PHB1）和抗增殖蛋白2（Prohibitin2,PHB2）。近年来研究表明PHB2与肿瘤的发生和发展密切相关,所以PHB2在癌症治疗中的价值值得进一步深入研究。七鳃鳗是研究脊椎动物进化和适应性免疫的重要模式生物。与哺乳动物PHB2的广泛研究相反,七鳃鳗的PHB2的研究很少。本研究课题首先通过q PCR、Western blot和细胞免疫荧光三种方法探究PHBs在非小细胞肺癌NCI-H1650细胞、A549细胞、Calu-1细胞和NCI-H226细胞的表达情况,发现PHBs在肺腺癌NCI-H1650细胞,A549细胞和Calu-1细胞中高表达。在本课题组前期工作基础之上,将纯化的r Lm-PHB2（Recombinant lamprey PHB2 protein... 

【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 Prohibitins研究进展
        1.1.1 PHBs的结构
        1.1.2 PHBs的表达及功能
        1.1.3 PHBs在肿瘤发生发展中的作用
    1.2 非小细胞研究进展
        1.2.1 非小细胞肺癌研究进展
        1.2.2 KRAS突变的非小细胞肺癌
        1.2.3 KRAS非小细胞肺癌的研究意义
    1.3 七鳃鳗PHB2的研究价值
        1.3.1 七鳃鳗的概况
        1.3.2 七鳃鳗的研究进展
        1.3.3 七鳃鳗的研究价值
    1.4 本论文的研究目的和意义
第二章 PHBs在人肺细胞与人非小细胞肺癌细胞中的表达与定位
    2.1 phbs基因在人肺细胞与人非小细胞肺癌细胞中m RNA的表达
        2.1.1 实验材料、试剂与设备
        2.1.2 实验方法
        2.1.3 实验结果
    2.2 PHBs在人肺细胞与人非小细胞肺癌细胞中蛋白的表达
        2.2.1 实验材料、试剂及设备
        2.2.2 实验方法
        2.2.3 实验结果
    2.3 PHB2在人肺细胞与人非小细胞肺癌细胞中的亚细胞定位
        2.3.1 实验材料、试剂及设备
        2.3.2 实验方法
        2.3.3 实验结果
    2.4 讨论
第三章 rLm-PHB2 蛋白对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
    3.1 rLm-PHB2 蛋白的原核表达和纯化
        3.1.1 实验材料、试剂与设备
        3.1.2 实验方法
        3.1.3 实验结果
    3.2 rLm-PHB2 对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
        3.2.1 实验材料、试剂与设备
        3.2.2 实验方法
        3.2.3 实验结果
    3.3 rLm-PHB2 对非小细胞肺癌细胞周期的影响
        3.3.1 实验材料、试剂与设备
        3.3.2 实验方法
        3.3.3 实验结果
    3.4 讨论
第四章 真核过表达Lm-PHB2蛋白对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
    4.1 真核pEGFP-N1-Lm-PHB2 过表达载体的构建及表达
        4.1.1 实验材料、试剂与设备
        4.1.2 实验方法
        4.1.3 实验结果
    4.2 Lm-PHB2蛋白对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
        4.2.1 实验材料、试剂与设备
        4.2.2 实验方法
        4.2.3 实验结果
    4.3 Lm-PHB2蛋白对非小细胞肺癌细胞周期的影响
        4.3.1 实验材料、试剂与设备
        4.3.2 实验方法
        4.3.3 实验结果
    4.4 讨论
第五章 Lm-PHB2 下调Calu-1 细胞周期蛋白的表达和磷酸化水平
    5.1 Lm-PHB2 蛋白下调Calu-1 细胞相关周期蛋白的m RNA表达
        5.1.1 实验材料、试剂与设备
        5.1.2 实验方法
        5.1.3 实验结果
    5.2 Lm-PHB2 下调Calu-1 细胞相关周期蛋白的表达和磷酸化水平
        5.2.1 实验材料、试剂与设备
        5.2.2 实验方法
        5.2.3 实验结果
    5.3 讨论
第六章 Lm-PHB2对非小细胞肺癌细胞迁移的影响
    6.1 Lm-PHB2对非小细胞肺癌细胞迁移的影响
        6.1.1 实验材料、试剂与设备
        6.1.2 实验方法
        6.1.3 实验结果
    6.2 Lm-PHB2对非小细胞肺癌细胞迁移相关蛋白表达的影响
        6.2.1 实验材料、试剂与设备
        6.2.2 实验方法
        6.2.3 实验结果
    6.3 讨论
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
附录
    附录 A pEGFP-N1 质粒图谱
    附录 B七鳃鳗PHB2真核过表达载体质粒图谱、测序结果及序列比对
致谢



本文编号：3150575