组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A和帕比司他调节遗传性牙龈纤维瘤细胞增殖及机制研究

发布时间：2021-04-27 14:18

　　目的:本实验研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（Trichostatina A）和帕比司他（Panobinostat LBH589）对遗传性牙龈纤维瘤来源间充质干细胞（H-GMSC）的细胞周期、增殖凋亡是否有影响及其相关分子机制,为遗传性牙龈纤维瘤病的临床治疗提供新的手段。方法:1.遗传性牙龈纤维瘤来源间充干细胞（H-GMSC）的分离、培养及鉴定。第三代健康牙龈间充质干细胞（N-GMSC）由本课题组内提供。H-GMSC分离自遗传性牙龈纤维瘤病患者牙龈组织,选取生长状态良好遗传性牙龈纤维瘤来源间充质干细胞,流式检测H-GMSC表面的干细胞标记分子的表达情况。并对分离所得牙龈间充质干细胞进行成骨成脂分化诱导,分别通过茜素红染色、油红O染色鉴定间充质干细胞成骨成脂的多潜能分化能力。2.组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（Trichostatina A TSA）和帕比司他（Panobinostat LBH589）对H-GMSC的细胞周期、增殖凋亡的调节及其分子机制通过MTT和Annexin V法检测不同浓度TSA和LBH589,即0 nM,50 nM,100 nM,200 nM,500 n... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、遗传性牙龈纤维瘤来源间充质干细胞（H-GMSC）的分离培养鉴定
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验设备及试剂
        1.1.2 牙龈组织获取
        1.1.3 人牙龈间充质干细胞分离培养
        1.1.4 倒置显微镜观察
        1.1.5 流式细胞术检测H-GMSC表面抗原
        1.1.6 成骨诱导及染色
        1.1.7 成脂诱导及染色
    1.2 结果
        1.2.1 显微镜观察细胞形态
        1.2.2 流式细胞术检测发现H-GMSC表达干细胞表面标志分子
        1.2.3 H-GMSC体外成骨诱导分化具有矿化结节形成能力
        1.2.4 H-GMSC体外成脂诱导分化油红O染色呈阳性
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、组蛋白去乙酰化酶抑制剂对H-GMSC细胞周期、增殖凋亡的调节作用及其分子机制
    2.1 对象和方法
        2.1.1 主要实验试剂及设备
        2.1.2 MTT法检测不同浓度TSA和 LBH589对H-GMSC增殖的影响…
        2.1.3 AnnexinV检测不同浓度TSA和 LBH589对H-GMSC凋亡的影响
        2.1.4 流式细胞术检测不同浓度TSA和 LBH589对H-GMSC细胞周期的影响
Waf/Cip1的表达">        2.1.5 半定量RT-PCR及 Western-blot检测TSA和 LBH589对H-GMSC中p21^Waf/Cip1的表达
    2.2 结果
        2.2.1 MTT法检测显示TSA和 LBH589 抑制H-GMSC增殖并具有浓度依赖性
        2.2.2 AnnexinV检测显示TSA和 LBH589 促进H-GMSC凋亡并具有浓度依赖性
        2.2.3 流式细胞显示TSA和 LBH589 影响H-GMSC细胞周期的G1 期
Waf/Cip1调节H-GMSC细胞周期抑制细胞增殖">        2.2.4 TSA和 LBH589 通过上调p21^Waf/Cip1调节H-GMSC细胞周期抑制细胞增殖
    2.3 讨论
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 组蛋白乙酰化修饰在肿瘤发生、发展、治疗中的作用研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3163620