长链非编码RNA20MALAT1促进肝癌细胞系迁移的机制研究

发布时间：2021-05-09 12:39

　　目的探索长链非编码RNA（lncRNA）肺腺癌转移相关转录子1（metastasis20associated20lung20adenocarcinoma20transcript201,MALAT1）在肝细胞癌（hepatocellular20carcinoma,HCC;简称肝癌）细胞中是否可作为竞争性内源RNA（competing20endogenous20RNA,ceRNA）发挥促迁移功能。方法在Hep20G2细胞中通过瞬时转染MALAT1的小干扰RNA（small20interfering20RNA,siRNA）敲低MALAT1的表达;利用Transwell实验检测敲低MALAT1后对细胞迁移能力的影响;利用RNA20pull-down实验确认MALAT1是否可直接吸附miR-126*;荧光定量逆转录PCR（quantitative20reverse20transcription20PCR,qRT-PCR）和Western印迹检测敲低MALAT1后miR-126*靶基因的mRNA和蛋白水平的变化;利用公共数据集癌症基因组图谱（The20Cancer20Genome20Atlas,T... 

【文章来源】：军事医学. 2017,41(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞株
    1.2 主要试剂
    1.3 细胞培养
    1.4 siRNA的瞬时转染
    1.5 RNA的提取及qRT-PCR检测RNA表达量
    1.6 蛋白提取和Western印迹实验
    1.7 细胞迁移实验
    1.8 载体构建
    1.9 RNA pull-down实验
    1.1 0 统计学方法
2 结果
    2.1 敲低MALAT1可显著抑制肝癌细胞的迁移能力
    2.2 MALAT1可直接吸附miR-126*
    2.3 MALAT1可正向调控miR-126*的靶基因CXCL12的表达
    2.4 MALAT1和miR-126*在HCC临床样本中异常表达且与患者预后显著相关
3 讨论



本文编号：3177319