1,3-二咖啡酰奎宁酸对乳腺癌细胞增殖、转移抑制作用分子机制的研究

发布时间：2021-05-11 01:14

　　乳腺癌的治疗是癌症治疗中最有难度的一种。术后的化学疗法和放射疗法一直是应用最广泛的传统疗法,但是由于传统化学疗法和放射疗法的局限性,其对人体有着严重的副作用不利于病人的恢复,并且造成了部分乳腺癌的多耐药性,这使得一些病例治疗失败。14-3-3τ在乳腺癌的发生和转移中起着至关重要的作用,可以用作新的药物靶蛋白。二咖啡酰奎宁酸（Dicaffeoylquinic acid,DCQAs）是天然产物,具有抗氧化剂,抗微生物剂和抗炎活性。一些研究表明,某些二咖啡酰奎宁酸对胃癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、乳腺癌等多种类型肿瘤具有很好的抑制作用。二咖啡酰奎宁酸的药效学作用的开发和探索将成为新药开发中的另一个热点。在本研究中,我们研究了DCQA对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞系的抗癌作用以及对三阴性乳腺癌细胞（Triple negative breast cancer,TNBC）的作用机理。首先,我们利用生物学方法和表面等离子共振技术（Surface Plasmon Resonance,SPR）分析筛选了可以与14-3-3τ结合并且对乳腺癌细胞具有明显抑制作用的1,3-DCQA和1,5-DC... 

【文章来源】：安徽大学安徽省 211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
缩略词表
第一部分 引言
    1.1 乳腺癌简介及目前治疗现状
    1.2 乳腺癌靶向治疗研究进展
    1.3 天然产物抗肿瘤介绍和研究现状
    1.4 咖啡酰奎宁酸简介和应用现状
    1.5 14 -3-3 蛋白与肿瘤的关系
    1.6 本研究目的
第二部分 材料与方法
    2.1 材料试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 细胞传代
        2.3.3 细胞冻存
        2.3.4 细胞复苏
        2.3.5 细胞计数
        2.3.6 细胞总蛋白质的提取
        2.3.7 蛋白浓度的测定
        2.3.8 蛋白免疫印迹(Western Blot分析)
        2.3.9 MTT法
        2.3.10 软琼脂克隆形成实验
        2.3.11 Transwell细胞迁移实验
        2.3.12 流式细胞仪检测细胞周期
        2.3.13 流式细胞仪检测细胞凋亡
        2.3.14 质粒转染
        2.3.15 挑单克隆摇菌
        2.3.16 质粒提取
        2.3.17 细胞转染
        2.3.18 真核细胞转录组测序分析
        2.3.19 细胞总RNA的提取
        2.3.20 qRT-PCR验证分析
        2.3.21 统计学分析
第三部分 实验结果
    3.1 14 -3-3τ表达特异性检验
    3.2 1,3-DCQA与1,5-DCQA对乳腺癌细胞抑制作用比较
        3.2.1 1 ,3-DCQA与1,5-DCQA对乳腺癌细胞增殖的影响
        3.2.2 1 ,3-DCQA与1,5-DCQA对 MCF-7 细胞克隆形成能力的影响
        3.2.3 1 ,3-DCQA与1,5-DCQA对 MDA-MB-231 细胞迁移能力的影响
        3.2.4 1 ,3-DCQA与1,5-DCQA影响乳腺癌细胞凋亡的比较
    3.3 1,3-DCQA诱导乳腺癌细胞凋亡的研究
        3.3.1 1 ,3-DCQA诱导MDA-MB-231 细胞凋亡的形态学观察
        3.3.2 1 ,3-DCQA诱导乳腺癌细胞的死亡方式分析
    3.4 14 -3-3τ是1,3-DCQA的靶标蛋白
    3.5 1 ,3-DCQA抑制MDA-MB-231 细胞增值的信号通路分析
    3.6 1 ,3-DCQA对乳腺癌细胞中14-3-3蛋白亚型影响分析
    3.7 1 ,3-DCQA调节乳腺癌细胞中PI3K/AKT和RAF/ERK信号通路
第四部分 讨论
参考文献
硕士期间论文发表情况
致谢



本文编号：3180427