METTL3通过甲基化调控CRNDE介导Hippo通路在胰腺癌中作用及机制
发布时间：2021-05-16 10:38
研究背景:胰腺癌是一种恶性程度极高的消化道肿瘤,其发病机制一直以来都没有完全阐明,严重影响了胰腺癌诊断和治疗的发展,因此研究胰腺癌发生发展的分子机制对于改善胰腺癌患者的诊断和预后意义重大。CRNDE作为一种长链非编码RNA,在多种恶性肿瘤中高表达,与癌症的发生发展密切相关。然而,CRNDE在胰腺癌中的调控机制尚不清楚。课题组以往研究证实CRNDE可以调控Hippo通路的活化过程,介导胰腺癌的发生发展,但其具体的调控机制仍不明确。研究发现在非小细胞肺癌中,METTL3可以通过调控MALAT1上调YAP蛋白表达,从而诱导肿瘤耐药和恶性转移。我们推测在胰腺癌中,METTL3可能通过类似途径,也就是通过调控CRNDE的表达间接调控Hippo通路,从而介导肿瘤的发生发展。研究目的:本研究围绕METTL3调控CRNDE甲基化介导Hippo通路在胰腺癌中作用及机制进行研究,旨在阐明METTL3是否通过CRNDE的甲基化修饰机制影响Hippo通路,促进胰腺癌的发生发展。研究方法:本研究首先检测了METTL3在胰腺癌组织和细胞中的表达情况;接着,通过CCK8、流式细胞术、Transwell等细胞离体实验...
【文章来源】：电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第一章 绪论
1.1 胰腺癌研究现状
1.2 M~6A甲基转移酶在肿瘤发生发展中的作用
1.2.1 m~6A甲基转移酶概述
1.2.2 m~6A甲基转移酶在肿瘤中的作用机制
1.3 HIPPO信号通路对胰腺癌发生发展的影响
1.4 CRNDE调控HIPPO通路的机制
1.5 本文的主要贡献与创新
1.6 本课题研究方案
1.6.1 本课题技术路线
1.6.2 本课题研究内容
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验组织标本
2.1.2 实验细胞
2.1.3 实验试剂与耗材
2.1.4 实验仪器与设备
2.1.5 主要溶液配制
2.1.6 PCR引物序列
2.1.7 干扰序列
2.2 实验方法
2.2.1 组织PCR
2.2.2 细胞培养
2.2.3 细胞转染
2.2.4 细胞PCR
2.2.5 蛋白免疫印迹实验
2.2.6 细胞增殖实验
2.2.7 细胞凋亡实验
2.2.8 细胞侵袭实验
2.2.9 数据分析
2.3 本章小结
第三章 实验结果
3.1 METTL3在胰腺癌组织和细胞中的表达水平
3.2 METTL3表达对胰腺癌细胞恶性行为学影响
3.2.1 METTL3和CRNDE敲低效率
3.2.2 METTL3对胰腺癌细胞增殖的影响
3.2.3 METTL3对胰腺癌细胞凋亡的影响
3.2.4 METTL3对胰腺癌细胞侵袭的影响
3.3 METTL3通过调控CRNDE影响HIPPO通路
3.3.1 METTL3表达对CRNDE表达的影响
3.3.2 CRNDE表达对METTL3表达的影响
3.3.3 METTL3对胰腺癌细胞中Hippo通路的影响
3.4 讨论
3.5 本章小结
第四章 全文总结与展望
4.1 全文总结
4.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]Pancreatic cancer: A review of clinical diagnosis, epidemiology, treatment and outcomes[J]. Andrew McGuigan,Paul Kelly,Richard C Turkington,Claire Jones,Helen G Coleman,R Stephen McCain. World Journal of Gastroenterology. 2018(43)
[2]Reversible RNA Modification N1-methyladenosine（m1A） in mRNA and tRNA[J]. Chi Zhang,Guifang Jia. Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2018(03)
本文编号：3189542
【文章来源】：电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第一章 绪论
1.1 胰腺癌研究现状
1.2 M~6A甲基转移酶在肿瘤发生发展中的作用
1.2.1 m~6A甲基转移酶概述
1.2.2 m~6A甲基转移酶在肿瘤中的作用机制
1.3 HIPPO信号通路对胰腺癌发生发展的影响
1.4 CRNDE调控HIPPO通路的机制
1.5 本文的主要贡献与创新
1.6 本课题研究方案
1.6.1 本课题技术路线
1.6.2 本课题研究内容
第二章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验组织标本
2.1.2 实验细胞
2.1.3 实验试剂与耗材
2.1.4 实验仪器与设备
2.1.5 主要溶液配制
2.1.6 PCR引物序列
2.1.7 干扰序列
2.2 实验方法
2.2.1 组织PCR
2.2.2 细胞培养
2.2.3 细胞转染
2.2.4 细胞PCR
2.2.5 蛋白免疫印迹实验
2.2.6 细胞增殖实验
2.2.7 细胞凋亡实验
2.2.8 细胞侵袭实验
2.2.9 数据分析
2.3 本章小结
第三章 实验结果
3.1 METTL3在胰腺癌组织和细胞中的表达水平
3.2 METTL3表达对胰腺癌细胞恶性行为学影响
3.2.1 METTL3和CRNDE敲低效率
3.2.2 METTL3对胰腺癌细胞增殖的影响
3.2.3 METTL3对胰腺癌细胞凋亡的影响
3.2.4 METTL3对胰腺癌细胞侵袭的影响
3.3 METTL3通过调控CRNDE影响HIPPO通路
3.3.1 METTL3表达对CRNDE表达的影响
3.3.2 CRNDE表达对METTL3表达的影响
3.3.3 METTL3对胰腺癌细胞中Hippo通路的影响
3.4 讨论
3.5 本章小结
第四章 全文总结与展望
4.1 全文总结
4.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]Pancreatic cancer: A review of clinical diagnosis, epidemiology, treatment and outcomes[J]. Andrew McGuigan,Paul Kelly,Richard C Turkington,Claire Jones,Helen G Coleman,R Stephen McCain. World Journal of Gastroenterology. 2018(43)
[2]Reversible RNA Modification N1-methyladenosine（m1A） in mRNA and tRNA[J]. Chi Zhang,Guifang Jia. Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2018(03)
本文编号：3189542
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