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磷酸化RelA/p65 Ser536在胃癌中的表达及作用

发布时间:2021-05-22 19:40
  [目的]研究表明,NF-κB与肿瘤的发生、发展及侵袭转移密切相关,一般认为NF-κB主要起抗凋亡和促肿瘤作用,因此NF-κB被作为治疗靶点,其抑制剂被用于癌症治疗。然而,数以千计的NF-κB抑制剂却未能发挥预期的临床效果。随着研究的深入,人们发现NF-κB不同位点的磷酸化状态可表现出截然相反的功能。国外已有研究表明,NF-κB Rel A/p65第536位丝氨酸位点磷酸化(p-p65 Ser536)对结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌有抑制作用。本课题对p-p65 Ser536在胃癌中的表达及作用进行研究。[方法]使用组织芯片结合免疫组织化学法(SP法)检测NF-κB p-p65 Ser536在正常胃粘膜、癌旁组织及胃癌中的表达,并分析其表达的临床意义;Western blot检测胃癌细胞和永生化胃粘膜上皮细胞中的表达情况;使用间接免疫荧光染色法检测NF-κB p65 Ser536的表达及观察其磷酸化入核情况;建立NF-κB p65第536位丝氨酸位点磷酸化与非磷酸化细胞模型,通过使用Transwell迁移、侵袭小室实验和划痕实验检测NF-κB p-p65 Ser536对胃癌细胞迁移与侵袭能力... 

【文章来源】:南华大学湖南省

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
中英文缩略词表
第1章 绪论
第2章 实验材料与试验方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验主要试剂
        2.1.2 实验所需主要仪器
        2.1.3 实验标本
        2.1.4 实验试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 免疫组化
        2.2.3 Westernblot
        2.2.4 细胞免疫荧光
        2.2.5 迁移实验
        2.2.6 侵袭实验
        2.2.7 划痕实验
        2.2.8 统计分析
第3章 实验结果
    3.1 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌细胞中低表达
    3.2 NF-κBp-p65 Ser536在胃癌细胞中低表达
    3.3 免疫荧光检测RelA/p65 Ser536磷酸化蛋白入核情况
    3.4 质粒载体构建及胃癌SGC7901细胞转染模型建立
    3.5 Transwell迁移与侵袭实验结果
    3.6 划痕实验结果
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
    1 NF-κB概述
    2 RelA/p65的磷酸化调控
    3 小结与展望
    参考文献
攻读硕士学位期间研究成果
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]Treatment of gastric cancer[J]. Michele Orditura,Gennaro Galizia,Vincenzo Sforza,Valentina Gambardella,Alessio Fabozzi,Maria Maddalena Laterza,Francesca Andreozzi,Jole Ventriglia,Beatrice Savastano,Andrea Mabilia,Eva Lieto,Fortunato Ciardiello,Ferdinando De Vita.  World Journal of Gastroenterology. 2014(07)



本文编号:3201560

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