转谷氨酰胺酶2对肝癌肿瘤干细胞存活及细胞迁移、侵袭力的影响
发布时间：2021-06-09 05:34
目的:肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上第五大常见的癌症,目前死亡率位居癌症死亡率第三位。HCC起病隐匿,恶性程度高、多数患者发现时已伴有肝内或肝外转移,往往错过手术等治疗的最佳时机,总体治疗效果仍然不佳。癌细胞的转移通常与肿瘤干细胞（Cancer Stem cells,CSCs）的存在有关。转谷氨酰胺酶2（Tissue transglutaminase,TG2）是转谷氨酰胺酶家族中的一员,在细胞内广泛存在,有研究表明TG2与肿瘤的干细胞特性及转移扩散、耐药有关。通过检测TG2在不同分化程度肝癌组织、不同转移潜能肝癌细胞系中的表达情况明确TG2在肝癌中的表达。对TG2进行沉默及过表达后检测其对肝癌CSCs及细胞转移能力的影响,探索TG2通过与整合素β1（ITGB1）结合,调节下游通路影响肝癌细胞转移的机制。研究方法:1.选择不同分化程度的肝癌组织26例,按照肝癌分化程度分为:低分化组15例、高分化组11例、对应癌旁组织各5例。应用免疫组织化学染色检测不同组的TG2表达水平,并进行单因素方差分析,p<0.05为有统计学意义。2.选择不同迁移...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TG2在不同分化程度肝癌及癌旁组织中的表达A低分化组织（100X）B.低分化组织（400X）C.高分化组织（100X）D.低分化组织（400X）
中国医科大学硕士学位论文16LO2中几乎不表达。(图3.2)因此选择HCC-LM3作为沉默TG2细胞系，smmc-7721作为过表达TG2细胞系。图2q-PCR及Westernblot测定在不同迁移能力肝癌细胞系中TG2表达A.q-PCRmRNA测定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相对表达水平B.Westernblot测定蛋白表达。差异有统计学意义（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3构建稳定沉默TG2的HCC-LM3细胞系携带沉默TG2基因表达的shRNA的慢病毒载体成功转染HCCLM3细胞后，使用RT-PCR及WesternBlot检测HCCLM3细胞、LW977细胞、LW978细胞、LW979细胞及空病毒载体细胞NCTG2mRNA及蛋白的相对表达水平。结果示，NCTG2mRNA及蛋白相对表达水平与HCCLM3细胞相似，无差异无统计学意义（P＞0.05）；LW978、LW979细胞TG2mRNA及蛋白相对表达水平较NC显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见图3。图3LW978为干扰效果最佳序列
中国医科大学硕士学位论文16LO2中几乎不表达。(图3.2)因此选择HCC-LM3作为沉默TG2细胞系，smmc-7721作为过表达TG2细胞系。图2q-PCR及Westernblot测定在不同迁移能力肝癌细胞系中TG2表达A.q-PCRmRNA测定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相对表达水平B.Westernblot测定蛋白表达。差异有统计学意义（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3构建稳定沉默TG2的HCC-LM3细胞系携带沉默TG2基因表达的shRNA的慢病毒载体成功转染HCCLM3细胞后，使用RT-PCR及WesternBlot检测HCCLM3细胞、LW977细胞、LW978细胞、LW979细胞及空病毒载体细胞NCTG2mRNA及蛋白的相对表达水平。结果示，NCTG2mRNA及蛋白相对表达水平与HCCLM3细胞相似，无差异无统计学意义（P＞0.05）；LW978、LW979细胞TG2mRNA及蛋白相对表达水平较NC显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见图3。图3LW978为干扰效果最佳序列
本文编号：3220046
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TG2在不同分化程度肝癌及癌旁组织中的表达A低分化组织（100X）B.低分化组织（400X）C.高分化组织（100X）D.低分化组织（400X）
中国医科大学硕士学位论文16LO2中几乎不表达。(图3.2)因此选择HCC-LM3作为沉默TG2细胞系，smmc-7721作为过表达TG2细胞系。图2q-PCR及Westernblot测定在不同迁移能力肝癌细胞系中TG2表达A.q-PCRmRNA测定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相对表达水平B.Westernblot测定蛋白表达。差异有统计学意义（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3构建稳定沉默TG2的HCC-LM3细胞系携带沉默TG2基因表达的shRNA的慢病毒载体成功转染HCCLM3细胞后，使用RT-PCR及WesternBlot检测HCCLM3细胞、LW977细胞、LW978细胞、LW979细胞及空病毒载体细胞NCTG2mRNA及蛋白的相对表达水平。结果示，NCTG2mRNA及蛋白相对表达水平与HCCLM3细胞相似，无差异无统计学意义（P＞0.05）；LW978、LW979细胞TG2mRNA及蛋白相对表达水平较NC显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见图3。图3LW978为干扰效果最佳序列
中国医科大学硕士学位论文16LO2中几乎不表达。(图3.2)因此选择HCC-LM3作为沉默TG2细胞系，smmc-7721作为过表达TG2细胞系。图2q-PCR及Westernblot测定在不同迁移能力肝癌细胞系中TG2表达A.q-PCRmRNA测定TG2在SMMC-7721、HCCLM3、LO2中的mRNA相对表达水平B.Westernblot测定蛋白表达。差异有统计学意义（*代表P＜0.05，**，＜0.01)。3.3构建稳定沉默TG2的HCC-LM3细胞系携带沉默TG2基因表达的shRNA的慢病毒载体成功转染HCCLM3细胞后，使用RT-PCR及WesternBlot检测HCCLM3细胞、LW977细胞、LW978细胞、LW979细胞及空病毒载体细胞NCTG2mRNA及蛋白的相对表达水平。结果示，NCTG2mRNA及蛋白相对表达水平与HCCLM3细胞相似，无差异无统计学意义（P＞0.05）；LW978、LW979细胞TG2mRNA及蛋白相对表达水平较NC显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见图3。图3LW978为干扰效果最佳序列
本文编号：3220046
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3220046.html
