肌细胞增强因子MEF2D在肝癌免疫逃逸中的作用和分子机制研究

发布时间：2021-06-15 21:41

　　肝癌是世界上最常见也是致死率最高的癌症类型之一,而现有的靶向治疗手段对其疗效甚微。肌细胞增强因子（myocyte enhancer factor 2,MEF2）作为一个被广泛研究的转录因子家族,其参与并调控肌肉和神经发育过程。值得一提的是,该家族成员中,MEF2D的蛋白结构特异性以及在肿瘤中的作用逐渐被人们关注。MEF2D作为转录因子,其蛋白结构的N端包含一个MADS/MEF2结构域,介导MEF2D自身的二聚化、MEF2D与DNA的结合以及与其他蛋白的相互作用,该结构域在MEF2家族各成员中具有保守性。而MEF2D蛋白的C端则包含多个转录激活结构域,且与MEF2家族其他成员有明显差异。MEF2D在以肝癌为主的多种肿瘤中高表达,并提示疾病的进展和不良预后。具体作用上,MEF2D可以促进肿瘤的生长、侵袭转移和血管化等过程,不仅调控肿瘤细胞自身生物学行为,也影响整个肿瘤微环境。由于炎症相关的发病机制,很多肝癌都具有免疫原性,反映为其微环境中有各种类型的免疫细胞浸润。其中一些免疫细胞,如效应性T细胞介导的抗肿瘤免疫反应可以抑制肝癌的进程。相反,肝癌也利用各种机制进行免疫逃逸。尽管有前期研究关注... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

MEF2D促进H22肝癌细胞在同源野生型小鼠体内成瘤

陆军军医大学博士学位论文192.3.2临床肝癌样本中的肿瘤细胞MEF2D表达与T细胞瘤内浸润负相关，与CD8+T细胞耗竭正相关。为了在临床肝癌标本中验证上述结论并进一步探索机制，我们利用流式细胞术检测了20例肝癌患者肿瘤细胞中MEF2D的表达，以及瘤内浸润的各类免疫细胞数量和耗竭程度（免疫细胞耗竭程度反映为PD-1和Tim-3阳性细胞占各类免疫细胞的百分比），并分析两者的相关性（图2A）。免疫组化染色技术检测125例肝癌患者肿瘤细胞中MEF2D的表达及其与瘤内浸润T细胞数量以及临床预后的相关性（图2B、C）。检测结果表明：MEF2D与瘤内浸润的CD3，CD4和CD8阳性T细胞数呈现显著负相关，与瘤内浸润的CD8阳性细胞耗竭程度呈现显著正相关；生存分析发现肝癌MEF2D高表达且T细胞瘤内浸润少的组中，患者生存时间明显短于其他各组，即MEF2D高表达且T细胞浸润少联合提示患者的不良预后。图2肝癌组织中肿瘤细胞MEF2D表达与免疫细胞瘤内浸润情况分析。（A）流式细胞术检测

陆军军医大学博士学位论文21图3敲除MEF2D抑制肝癌细胞移植瘤生长的过程依赖CD8+T细胞。（A）CD4和CD8功能阻断抗体系统干预条件下，敲除MEF2D及对照H22细胞在同源野生型BALB/c小鼠体内成瘤能力检测；（B）各组荷瘤同源野生型小鼠生存分析。2.4讨论我们之前的研究发现MEF2D可以促进肝癌和结直肠癌的血管化过程，首次报道了MEF2D对肿瘤微环境的塑造作用[16]。然而肿瘤微环境不仅有血管存在，还包含各种细胞，例如肿瘤浸润的免疫细胞，肿瘤相关的成纤维细胞等，以及存在各种细胞因子，缺氧以及酸性环境等[25,26]。肝癌由于其炎症相关的发病机制，属于具有免疫原性的肿瘤类型，其微环境中往往存在大量的免疫细胞。已有大量研究表明，这些浸润的免疫细胞在肝癌的发生发展过程中发挥重要作用[2]。而在以往MEF2D的各项研究中，免疫系统对MEF2D促进肿瘤发生发展中可能存在的作用一直被忽略。在本章的研究中，我们利用野生型和免疫缺陷型小鼠原位移植瘤模型，以及人临床标本进行研究分析，首次发现抑制肝癌细胞MEF2D的表达限制肿瘤的生长依赖于小鼠自身T细胞介导的抗肿


本文编号：3231813