结直肠癌组织和结肠癌细胞株LoVo中DCLK1 + /Ki67表型癌干细胞的数量、特征及其病理学意义

发布时间：2021-06-24 23:20

　　目的：观察DCLK1和Ki67在正常肠粘膜组织、癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织中的表达；分析DCLK1和Ki67在结直肠癌组织中的表达与临床病理学参数及的意义；着重研究DCLK1+/Ki67-细胞在实体瘤和人结肠癌细胞株LoVo中的分布、形态特征、数量等,探讨其在腺癌组织中与临床病理学参数、患者预后的关系,进而确定结直肠癌干细胞的特异性免疫表型及生物学特征,为抗肿瘤治疗提供新靶点。方法：选取150例结直肠癌组织、34例腺瘤组织、10例正常肠粘膜和10例癌旁组织手工制作组织芯片；HE染色观察不同病理类型组织和LoVo细胞中细胞的形态特征、排列方式、分布位置等：免疫组织化学染色显示DCLK1和Ki67在正常肠粘膜组织、癌旁组织、腺瘤组织和腺癌组织中的表达情况；免疫组化双重标记腺癌组织中DCLK1和Ki67的表达并与相邻切片HE染色的细胞形态进行比较；利用免疫组织荧光染色和化学染色双重标记DCLK1+/Ki67-细胞在人结肠癌细胞株LoVo中的分布、形态特征、数量；利用统计学软件SPSS19.0分析DCLK1、Ki67及DCLK1+/Ki67细胞在结直肠癌组织的表达与临床病理学参数及预后的意义... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 正常肠粘膜、腺瘤组织及结直肠癌组织中DCLK1和Ki67的表达及其临床病理学意义
    材料与方法
        1 研究对象
        2 研究方法与试剂
            2.1 手工制作组织芯片
                2.1.1 方法
                2.1.2 仪器与试剂
            2.2 免疫组织化学染色(EnliVision plus法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 仪器与试剂
        3 结果判定
        4 数据分析
    结果
        1 Ki67在正常肠黏膜组织、癌旁组织及腺瘤组织中的表达
        2 DCLK1在正常肠黏膜组织、癌旁组织及病变组织中的表达
        3 DCLK1和Ki67蛋白的表达与临床病理参数的关系
        4 DCLK1和Ki67在结直肠组织中表达的相关性
    讨论
第二部分 结直肠癌组织中DCLK1~+/Ki67~-细胞的形态特征、位置、数量及其病理学意义
    材料与方法
        1 研究对象
        2 研究方法与试剂
            2.1 免疫组织化学双重染色(DouSP法)
                2.1.1 方法
                2.1.2 仪器与试剂
            2.2 苏木素-伊红染色(HE)
                2.2.1 方法
                2.2.2 仪器与试剂
        3 结果判定
        4 统计学分析
    结果
        1 HE染色下正常肠粘膜组织、腺瘤组织和腺癌组织的组织学形态
        2 DCLK1~+/Ki67~-细胞在结直肠癌组织中的形态、分布位置及百分比
        3 DCLK1~+/Ki67~-细胞的表达与临床病理参数间的关系
        4 DCLK1~+/Ki67~-细胞在正常肠粘膜、腺瘤及腺癌中的表达
        5 DCLK1~+/Ki67~-细胞在结直肠癌组织中的表达与预后的关系
    讨论
第三部分 人结肠癌细胞株LoVo中DCLK1~+/Ki67~-细胞的数量及细胞形态特征
    材料与方法
        1 研究对象
        2 研究方法与试剂
            2.1 细胞培养与爬片
                2.1.1 方法
                2.1.2 试剂与仪器
            2.2 免疫组织化学双重染色(DouSP法)
                2.2.1 方法
                2.2.2 仪器与试剂
            2.3 苏木素-伊红染色(HE)
                2.3.1 方法
                2.3.2 仪器与试剂
            2.4 免疫组织荧光双重染色
                2.4.1 方法
                2.4.2 仪器与试剂
    结果
        1 HE染色下人结肠癌细胞株LoVo的细胞组织学形态
        2 DCLK1~+/Ki67~-细胞的形态及数量百分比
    讨论
结论
附图
参考文献
英文缩写
附录
在校期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]一种简便实用的组织芯片制作方法[J]. 张登才,刘斌,张丽华,董亮,苏勤军,史敏,杨艳丽.  诊断病理学杂志. 2013(11)
[2]Doublecortin-like kinase 1 exhibits cancer stem cell-like characteristics in a human colon cancer cell line[J]. Lianna Li,Charles F. Bellows.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)
[3]Report of incidence and mortality in China cancer registries, 2009[J]. Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Ping Zhao,Guanglin Li,Lingyou Wu,Jie He.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(01)
[4]Colorectal cancer in inflammatory bowel disease:What is the real magnitude of the risk?[J]. Jessica K Dyson,Matthew D Rutter.  World Journal of Gastroenterology. 2012(29)
[5]结直肠癌CD44+/ki-67-癌干细胞特征及其与临床病理关系[J]. 韩军平,刘斌,杨艳丽,苏勤军,史敏,钱震,董亮,张彩兰,哈英娣.  世界华人消化杂志. 2011(34)



本文编号：3248016