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miR-1207-5p通过调节Tryptase alpha-1诱导口腔癌转移

发布时间:2021-06-26 00:13
  背景:口腔癌转移已经成为全球所面对的健康问题。制定有效的口腔癌治疗策略是降低该疾病死亡率的关键。近年来,microRNA(miRNA)作为一组小的非编码RNA在肿瘤转移中起着至关重要的作用。本实验的目的是研究miR-1207-5p对口腔癌转移的调控作用及具体机制。方法:在本研究中,在临床组织水平,我们对24个口腔癌患者临床病理组织中的miRNA表达谱进行了系统的评价,这些临床样本包括了8个癌旁组织样本,7个原位癌组织样本和9个转移癌组织样本;采用DChip技术鉴定临床口腔肿瘤组织中差异表达的miRNA,采用LTQ/MS鉴定肿瘤组织中差异表达的蛋白质。在体外细胞水平,采用生长曲线、克隆形成、Transwell实验和划痕实验研究miR-1207-5p对口腔癌转移的影响;定量实时PCR用于研究miR-1207-5p对靶基因和上皮细胞-间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、Wnt通路、TGF-β通路及干细胞生成过程等信号通路标志物的表达水平的影响;Western印迹分析用于检测miR-1207-5p对靶蛋白表达的影响。结果:在临床组织水平,m... 

【文章来源】:大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
1 文献综述MicroRNAs:口腔癌早期诊断的有效生物标志物
    1.1 背景
    1.2 miRNA在口腔癌中的表达
    1.3 miRNA在口腔癌发生发展中的作用
        1.3.1 Ras/MAPK信号通路
        1.3.2 PI3K/AKT信号通路
        1.3.3 JAK/STAT信号通路
        1.3.4 Wnt/β-catenin信号通路
        1.3.5 Notch信号通路
        1.3.6 TGF-β/SMAD信号通路
        1.3.7 细胞周期相关的信号通路
        1.3.8 细胞凋亡途径
        1.3.9 转录因子和DNA甲基化
    1.4 展望
2 实验材料与方法
    2.1 实验试剂与药品
    2.2 实验仪器与设备
    2.3 主要溶液的配置
    2.4 实验方法
        2.4.1 临床口腔癌组织样本的获取
        2.4.2 细胞水平研究
3 miR-1207-5p在转移与原位口腔癌组织及细胞中的表达及对口腔癌转移的作用
    3.1 引言
    3.2 转移与原位口腔癌组织中的miRNAs差异表达
    3.3 miR-195对口腔癌迁移能力的影响
        3.3.1 Primer5.0软件设计miRNA引物
        3.3.2 miR-195转染效率检测
        3.3.3 miR-195对口腔癌细胞迁移能力的影响
    3.4 miR-1207-5p对口腔癌增殖、迁移及侵袭等能力的影响
        3.4.1 qRT-PCR法检测口腔癌细胞中miR-1207-5p的表达
        3.4.2 miR-1207-5p转染效率检测
        3.4.3 miR-1207-5p对口腔癌细胞表型的影响
        3.4.4 miR-1207-5p对口腔癌细胞增殖能力的影响
        3.4.5 miR-1207-5p对口腔癌细胞克隆形成能力的影响
        3.4.6 miR-1207-5p对口腔癌细胞迁移能力的影响
        3.4.7 miR-1207-5p对口腔癌细胞侵袭能力的影响
        3.4.8 miR-1207-5p所在cluster中miRNAs对口腔癌细胞迁移能力的影响
    3.5 讨论
    3.6 本章小结
4 miR-1207-5p对类胰蛋白酶α-1以及转移相关信号通路的影响研究
    4.1 引言
    4.2 临床口腔癌病人组织中差异表达的蛋白
    4.3 miR-1207-5p对Tryptase-alpha-1蛋白的影响
        4.3.1 预测miR-1207-5p与Tryptase-alpha-1的结合位点
        4.3.2 细胞水平miR-1207-5p对TPSAB1蛋白的影响
    4.4 miR-1207-5p调控转移的相关机制研究
        4.4.1 miR-1207-5p对EMT信号通路的调控作用
        4.4.2 miR-1207-5p与Wnt信号通路标志物的作用关系
        4.4.3 miR-1207-5p与TGF-β信号通路标志物的作用关系
        4.4.4 miR-1207-5p与干细胞表面标志物的影响
    4.5 讨论
    4.6 本章小结
5 结论
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号:3250232

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