MCM6通过MEK/ERK通路促进肝癌的侵袭转移并可作为预测早期复发的血液学指标
发布时间：2021-07-04 16:00
研究背景原发性肝癌是全球肿瘤相关致死率位居第二的恶性肿瘤,每年超过一半的新发病例和死亡病例发生在中国。肝癌起病隐匿,进展迅速,预后极差;多数患者即使接受根治性肝癌切除,术后仍会出现肝内或肝外转移,其中术后（1年内）早期复发是影响肝癌患者长期生存的主要因素。MCM6基因在多种肿瘤中发挥促癌作用,但在肝癌领域内的研究相对局限,尤其关于肝癌侵袭转移及早期复发中的功能及其机制的研究,尚未见报道。目的和意义1.明确MCM6在人肝癌细胞系、肝癌组织及其匹配癌旁无瘤肝组织中的表达水平,及其在肝癌患者预后评估的价值;2.探讨肝癌发生发展过程中MCM6的功能及调控机制,以寻求肝癌侵袭转移新的理论依据;3.评价血清MCM6表达水平在肝癌根治切除术后早期复发中的预测价值。研究内容与方法1.MCM6在肝癌组织中的表达及其与肝癌临床病理参数的关系（1）免疫组织化学染色法检测70例肝癌组织及其匹配癌旁肝组织和30例正常肝组织中MCM6的表达情况;（2）通过Kaplan-Meier生存分析、log-rank检验及单因素、多因素COX回归模型,分析MCM6表达与肝癌患者预后的关系;通过χ2检验或Fisher概率法分析...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ＭＣＭ６在各肝癌细胞株中的表达情况（Ａ）荧光定量ＰＣＲ检测在侵袭性不同的肝癌??细胞系中ＭＣＭ６的表达情况；（Ｂ）?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ显示在侵袭性不同的肝癌细胞系中ＭＣＭ６??的表达情况??
扩增曲线得到各样品ＭＣＭ６和ＧＡＰＤＨ的ＣＴ值，计算ＡＣｔ值，以Ｓｃｒａｍｂｌｅ为??对照，运用２＿ＡＡＱ法计算ｓｈＲＮＡ病毒相对阴性对照的ＭＣＭ６的表达倍数和千扰??效率（图２－３Ａ）。结果显示，ＨＣＣ－ＬＭ３和Ｓ－ＭＭＣ７７２１细胞中ＭＣＭ６干扰效??果均具有显著性统计学差异（户＜?０．０５）。通过分别检测干扰组与阴性对照组细??胞中ＭＣＭ６的相对表达量，结果显示干扰组细胞中的ＭＣＭ６?ｍＲＮＡ水平较??Ｓｃｒａｍｂｌｅ组明显降低，在ＨＣＣ－ＬＭ３细胞中，三种ｓｈＲＮＡ敲低效率分别达到??６９．３％、７３．０％、８６．０％?（Ｐ＜?０．０５）；在?ＳＭＭＣ７７２１?细胞中，三种?ｓｈＲＮＡ?敲低效??率分别达到?７７．２％、６７．８％、８２，８％?（图?２－３Ａ）。??进一步三种ｓｈＲＮＡ的干扰效果通过蛋白免疫印迹实验进行验证（详见图??２－３Ｂ），实验结果显示ＨＣＣ－ＬＭ３和ＳＭＭＣ７７２１中ＭＣＭ６蛋白水平的表达量明??４３??
免疫荧光结果显示：肝癌细胞中，ＭＣＭ６蛋白主要定位于细胞核中；??ＨＣＣ－ＬＭ３及ＳＭＭＣ７７２１细胞感染ｓｈＲＮＡ３－ＭＣＭ６慢病毒后ＭＣＭ６在细胞核中??的表达下降（详见图２－３Ｃ）。??Ｊ＼?＼?ｎ?Ｏｊ??八?ＨＣＣ－ＬＭ３?ＳＭＭＣ７７２１?＾?＃?＃??１?＜／?／?／?／??卜＿????１?０．８?－?■?■?ＭＣＭ６?鱗???Ｉ??■?■?■?￣Ｔ?ｇ??■。４?■?■?＊?＊?■?＊?＊?ＧＡＰ〇Ｈ?｜＿＿＿叫＂??ｒ?［＂?Ｐｆｉｒｌｎ?，，厂?－６?卜?￣ｊ?謹??屬夕＇祕，－１－—，丨１??４４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cdt1和Mcm6在视网膜母细胞瘤中的表达和意义[J]. 吴星,宋志刚,尹东芳,李朝辉. 海南医学院学报. 2015(06)
[2]供肝短缺背景下我国肝癌患者肝移植的策略[J]. 沈中阳. 中华器官移植杂志. 2013 (09)
[3]MCM7蛋白在人 大鼠 树鼩肝癌组织中的表达和意义[J]. 朱伶群,杨春,秦虹,卢晓旭,李瑗,欧超,苏建家,曹骥. 中国肿瘤临床. 2013(16)
[4]ERK/MAPK信号转导通路与消化系肿瘤[J]. 沈雁,吕宾,丁莺. 胃肠病学. 2011(02)
[5]细胞外信号调节激酶（ERK）与宫颈癌关系的研究进展[J]. 章丽霞,刘钧. 川北医学院学报. 2010(05)
[6]肝细胞癌切除术标准及其临床意义[J]. 黄修燕,黄自丽,汤钊猷,郑起. 中国肿瘤临床. 2010(09)
[7]靶向ERK信号转导通路抗肿瘤的研究进展[J]. 罗威,曹亚. 国际病理科学与临床杂志. 2006(03)
[8]Serum tumor markers for detection of hepatocellular carcinoma[J]. Lin Zhou Feng Luo,Division of Biotherapy for Cancer,Cancer Center,West China Hospital of Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,ChinaJia Liu,Cancer Center,West China Hospital of Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2006(08)
[9]ERK1/2的研究进展[J]. 马莲环,刘建. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2005(03)
[10]抑制ERK增强白血病和卵巢癌耐药细胞系化疗敏感性[J]. 李登举,张瑶珍,黄伟,孟凡凯. 中国实验血液学杂志. 2003(06)
博士论文
[1]基于临床与分子预后因素建立根治性肝切除HCC预后评估系统的研究[D]. 吕文平.第三军医大学 2005
本文编号：3265092
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１?ＭＣＭ６在各肝癌细胞株中的表达情况（Ａ）荧光定量ＰＣＲ检测在侵袭性不同的肝癌??细胞系中ＭＣＭ６的表达情况；（Ｂ）?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ显示在侵袭性不同的肝癌细胞系中ＭＣＭ６??的表达情况??
扩增曲线得到各样品ＭＣＭ６和ＧＡＰＤＨ的ＣＴ值，计算ＡＣｔ值，以Ｓｃｒａｍｂｌｅ为??对照，运用２＿ＡＡＱ法计算ｓｈＲＮＡ病毒相对阴性对照的ＭＣＭ６的表达倍数和千扰??效率（图２－３Ａ）。结果显示，ＨＣＣ－ＬＭ３和Ｓ－ＭＭＣ７７２１细胞中ＭＣＭ６干扰效??果均具有显著性统计学差异（户＜?０．０５）。通过分别检测干扰组与阴性对照组细??胞中ＭＣＭ６的相对表达量，结果显示干扰组细胞中的ＭＣＭ６?ｍＲＮＡ水平较??Ｓｃｒａｍｂｌｅ组明显降低，在ＨＣＣ－ＬＭ３细胞中，三种ｓｈＲＮＡ敲低效率分别达到??６９．３％、７３．０％、８６．０％?（Ｐ＜?０．０５）；在?ＳＭＭＣ７７２１?细胞中，三种?ｓｈＲＮＡ?敲低效??率分别达到?７７．２％、６７．８％、８２，８％?（图?２－３Ａ）。??进一步三种ｓｈＲＮＡ的干扰效果通过蛋白免疫印迹实验进行验证（详见图??２－３Ｂ），实验结果显示ＨＣＣ－ＬＭ３和ＳＭＭＣ７７２１中ＭＣＭ６蛋白水平的表达量明??４３??
免疫荧光结果显示：肝癌细胞中，ＭＣＭ６蛋白主要定位于细胞核中；??ＨＣＣ－ＬＭ３及ＳＭＭＣ７７２１细胞感染ｓｈＲＮＡ３－ＭＣＭ６慢病毒后ＭＣＭ６在细胞核中??的表达下降（详见图２－３Ｃ）。??Ｊ＼?＼?ｎ?Ｏｊ??八?ＨＣＣ－ＬＭ３?ＳＭＭＣ７７２１?＾?＃?＃??１?＜／?／?／?／??卜＿????１?０．８?－?■?■?ＭＣＭ６?鱗???Ｉ??■?■?■?￣Ｔ?ｇ??■。４?■?■?＊?＊?■?＊?＊?ＧＡＰ〇Ｈ?｜＿＿＿叫＂??ｒ?［＂?Ｐｆｉｒｌｎ?，，厂?－６?卜?￣ｊ?謹??屬夕＇祕，－１－—，丨１??４４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cdt1和Mcm6在视网膜母细胞瘤中的表达和意义[J]. 吴星,宋志刚,尹东芳,李朝辉. 海南医学院学报. 2015(06)
[2]供肝短缺背景下我国肝癌患者肝移植的策略[J]. 沈中阳. 中华器官移植杂志. 2013 (09)
[3]MCM7蛋白在人 大鼠 树鼩肝癌组织中的表达和意义[J]. 朱伶群,杨春,秦虹,卢晓旭,李瑗,欧超,苏建家,曹骥. 中国肿瘤临床. 2013(16)
[4]ERK/MAPK信号转导通路与消化系肿瘤[J]. 沈雁,吕宾,丁莺. 胃肠病学. 2011(02)
[5]细胞外信号调节激酶（ERK）与宫颈癌关系的研究进展[J]. 章丽霞,刘钧. 川北医学院学报. 2010(05)
[6]肝细胞癌切除术标准及其临床意义[J]. 黄修燕,黄自丽,汤钊猷,郑起. 中国肿瘤临床. 2010(09)
[7]靶向ERK信号转导通路抗肿瘤的研究进展[J]. 罗威,曹亚. 国际病理科学与临床杂志. 2006(03)
[8]Serum tumor markers for detection of hepatocellular carcinoma[J]. Lin Zhou Feng Luo,Division of Biotherapy for Cancer,Cancer Center,West China Hospital of Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,ChinaJia Liu,Cancer Center,West China Hospital of Sichuan University,Chengdu 610041,Sichuan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2006(08)
[9]ERK1/2的研究进展[J]. 马莲环,刘建. 国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2005(03)
[10]抑制ERK增强白血病和卵巢癌耐药细胞系化疗敏感性[J]. 李登举,张瑶珍,黄伟,孟凡凯. 中国实验血液学杂志. 2003(06)
博士论文
[1]基于临床与分子预后因素建立根治性肝切除HCC预后评估系统的研究[D]. 吕文平.第三军医大学 2005
本文编号：3265092
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