miR-101/RUNX1反馈调节环路影响肺癌细胞耐药性及侵袭转移能力机制初探
发布时间：2021-07-04 19:57
[研究背景与目的]肺癌是世界范围内死亡率最高的恶性肿瘤之一。在男性恶性肿瘤发病率中肺癌排第一位,在女性中排第二位,严重威胁着人类健康。肺癌中最常见的类型为非小细胞肺癌,占肺癌所有种类的80%左右。非小细胞肺癌早期诊断率低、恶性程度高、对化疗放疗敏感性较低,即便是可以经手术治疗的早期非小细胞肺癌,经手术治疗后其五年生存率也不超过60%。造成非小细胞肺癌预后不佳的主要原因为发生侵袭转移以及对化疗药物产生耐药。所以,深入研究肺癌发生侵袭转移的分子机制,阐明其调控网络,筛选其中影响肺癌进程的关键节点分子,鉴定可以用于阻断肺癌侵袭转移及耐药进程的分子靶标具有重要的临床意义。MicroRNA （MiRNA,微小RNA）分子因其具有在时间性和空间性多调控精度的特点而越来越受到人们关注。miRNA分子几乎参与包括肺癌在内的所有肿瘤发生发展的过程,与肿瘤起始、肿瘤生长、肿瘤侵袭转移、肿瘤异位定植、肿瘤新生血管形成等各个方面均有密切关系。虽然目前关于miRNA分子与肺癌的相关性已有不少的研究,但鉴于miRNA分子调控具有“一对多”的特性,在同一类型肿瘤中有许多不同的miRNA分子在发挥作用,即便是同一mi...
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图３－１．ｑＲＴ－ＰＣＲ检测非小细胞肺癌及其配对癌旁正常组织中ｍｉ民－１０１的表达模式（黑色柱??形图表示癌旁正常组织，灰鱼柱形图表示肺癌组织，呼＜化０１，＃Ｐ＜０．０５）??
的表达均显著低于ＭＲＣ５细胞中ｍｉＲ－１０１的表达水平，两者比较差异具有显著??性（Ｐ?＜?０．０５），而ＲＵＮＸ１的表达则在肺癌细胞株中明显升高，与其在ＭＲＣ５??细胞中的表达水平相比较，差异具有统计学意义（？＜化〇５）（图３－４Ａ）。因??ｍｉＲＮＡ的调控作用最终是影响靴基因在蛋白质水平的表达，而蛋白质水平也是??一个分子执行生物学功能的最终形式，所Ｗ我们进一步抽提细胞的总蛋白，采??用ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ的方法检测了不同细胞株中ＲＵＮＸ１的表达。结果显示，与??ｍＲＮＡ水平相一致，蛋白质水平的ＲＵＮＸ１在肺癌细胞株中显著高于ＭＲＣ５细??胞（图３－４Ｂ）。据此我们可Ｗ看出，肺癌细胞中ｍｉＲ－１０１表达下调，这一点其??在肺癌组织中的表达模式相符合，而ＲＵＮＸ１在肺癌细胞株中的表达模式也与??其在肺癌组织中的表达模式相一致。且初步可Ｗ看出，ｍｉＲ－１０１的表达与??３１??
（Ｕ２）?ｍｇ／Ｌ，?ｍｉＲ－ｌＯｌ过表达组其ＩＣ５０值降低为（１．０１?±?０．０６）?ｍｇ／Ｌ，两者比??较差异具有统计学意义（Ｐ＜?０．０５），提示ｍｉＲ－１０１过表达可显著提高肺癌细??胞对化疗药物顺钻的敏感性（图３－８，图３－１１，表３－１）。为了证实这一结果，??我们在肺癌细胞ＷＤ中重复了这一实验。结果与Ｈ口９９细胞相一致。在使用??ｍｉ民－１０１特异性ｍｉｍｉｃｓ导致细胞中ｍｉＲ－１０１表达上调后，细胞中蛋白水平??ＲＵＮＸ１表达显著下调。同样使用不同浓度的顺钻处理细胞后，ｍｉＲ－１０１过表达??组细胞的活性明显降低。对顺钻的ＩＣ５０值也由对照组中的（６．４３?±?０．５１）?ｍｇ／Ｌ??下降到了（１．６７?±０．０１）?ｍｇ／Ｌ，两者比较差异具有统计学意义（Ｐ＜?０．０５）。??Ａ。。。＂。、於物?Ｈ１２９９?Ｂ?妒。Ｗ。、知如巧?９５０??ｊＥＴ?細關?Ｘ１?ＲＵＮＸ１??ＮｉｉＭＩｐＨ?Ｍｃｔｉｎ?４Ｍ＞｜?ｐ－ａｃｔｉｎ??２．５？ｊ?ＳＣ巧ｍｂ言ｅ?ｃｏｎｔｒｏ：?時ｓｃｉ＊ａｍｂ！ｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｂ?ｍ巧－１０１?ｍｉｍｉｃｓ?—?ｍ巧－１０１?ｍｉｍ比ｓ??｜２－。－??！ｉ．ｓ．Ｉ＂＂?＼＼??１。５－?ｆｓ．??Ｏ．Ｏ－Ｈ￣Ｉ￣Ｉ￣Ｉ＿Ｉ?ｏ．ｏｉ－，一，￣￣，誦??０?０．５?１?２?４?８?１６?３２?０?０．５?１?２?４?８?１６?３２??ｃＤＤＰ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（ｍｇ／Ｌ）?ｃＤＤＰ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（ｍｇ／Ｌ）??图３－８．肺癌细胞系Ｈ口９９和９５Ｄ中
【参考文献】：
期刊论文
[1]Epigenetics of hepatocellular carcinoma:Role of microRNA[J]. Sharad Khare,Qiong Zhang,Jamal A Ibdah. World Journal of Gastroenterology. 2013(33)
[2]miR-18a对A549细胞的放射增敏作用及其机制[J]. 吴磊,孙建国,徐睿,李德志,徐燕梅,马虎,李雪涛,彭丽娜,陈正堂. 第三军医大学学报. 2013(09)
本文编号：3265437
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图３－１．ｑＲＴ－ＰＣＲ检测非小细胞肺癌及其配对癌旁正常组织中ｍｉ民－１０１的表达模式（黑色柱??形图表示癌旁正常组织，灰鱼柱形图表示肺癌组织，呼＜化０１，＃Ｐ＜０．０５）??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Epigenetics of hepatocellular carcinoma:Role of microRNA[J]. Sharad Khare,Qiong Zhang,Jamal A Ibdah. World Journal of Gastroenterology. 2013(33)
[2]miR-18a对A549细胞的放射增敏作用及其机制[J]. 吴磊,孙建国,徐睿,李德志,徐燕梅,马虎,李雪涛,彭丽娜,陈正堂. 第三军医大学学报. 2013(09)
本文编号：3265437
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