长链非编码RNA XIST促进TGF-β诱导的非小细胞肺癌上皮—间质转化的机制
发布时间：2021-07-06 11:43
【研究背景与目的】肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,其中很大部分（85%）是非小细胞肺癌（Non-small-cell lung cancer,NSCLC）。目前NSCLC的远期治疗效果仍然不理想,NSCLC进展期发生肿瘤转移是导致治疗失败的主要原因。因此发现并阐明肺癌发生侵袭和转移过程中的分子机制对提高患者的生存率非常重要。转化生长因子-beta信号通路（TGF-βsignal pathway）介导的上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）在肺癌的侵袭转移过程中起到了十分关键的作用。TGF-β信号通路在肿瘤细胞中的作用受到多种机制调节,近年来非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）在基因表达调控中的作用日益受到重视。X染色体失活基因（X inactivate-specific transcript,XIST）与多种肿瘤的发生发展密切相关,有研究表明XIST在NSCLC中表达上调,且在促进NSCLC细胞迁移和侵袭过程中发挥作用。本研究旨在探讨XIST促进TGF-β诱导的NSCLC细胞EMT过程的作用机制,阐明XIST与...
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
psiCHECK-2载体图谱和多克隆位点
1. XIST 和 ZEB2 在不同转移状态的非小细胞肺癌患者中的表达情况为了明确在不同转移状态的 NSCLC 患者中 XIST 和 ZEB2 的表达情况，我们收集了 40 例 NSCLC 患者的手术切除肿瘤组织样本，并根据不同的肿瘤转移程度将所有样本分为 2 组：无淋巴结转移组（N0，包括 UICC 分期 Ia，Ib，以及部分IIa 期的患者组织）20 例；伴淋巴结转移组（N1-2，包括 UICC 分期 IIIa，部分 IIIb以及 IV 期的患者组织）20 例。采用实时定量 PCR 法检测全部 40 例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中 XIST 和 ZEB2 的表达水平，结果显示 XIST 在伴淋巴结转移组的NSCLC 组织中的表达明显高于无淋巴结转移组（P<0.01），与此同时 ZEB2 在伴淋巴结转移组的 NSCLC 组织中的表达也明显高于无淋巴结转移组（P<0.01）（图 2）。以上结果表明，XIST 及 ZEB2 均在高转移状态的 NSCLC 表达上调，可能与 NSCLC肿瘤组织的转移性存在相关性。
2. MiR-367-3p、miR-141-3p 及 ZEB2 在 NSCLC 细胞株与正常支气管上皮细胞株中的表达情况我们选取了 5 株不同的非小细胞肺癌细胞株 A549 (腺癌)，H226（鳞癌），95(巨细胞癌低转移株), 95D (巨细胞癌高转移株), H1299 (非小细胞癌)以及 1 株人正常支气管上皮细胞（HBE）为研究对象，运用实时定量 PCR 方法检测其中miR-367-3p、miR-141-3p （内参：U6）的表达以及 ZEB2 mRNA（内参：β-actin的表达水平。检测结果显示：与正常支气管上皮细胞比较，miR-367-3p、miR-141-3的表达水平在非小细胞肺癌细胞株中呈现出不同程度的下调，且在高转移的 95细胞表达水平较低转移的 95C 细胞更低。ZEB2 mRNA 的表达水平在非小细胞肺癌细胞株中呈现出不同程度的上调（图 3）。ZEB2 mRNA 与 miR-367-3p、miR-141-3呈现为相反的表达趋势。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人长链非编码RNA基因SPRY4-IT1对肺癌细胞A549侵袭和迁移能力的影响[J]. 柴松,安文婷,郭丽丽,姜乐,高志嵩,李书军. 中国肺癌杂志. 2015(08)
[2]长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响[J]. 陈志强,尹凌帝,孙倩,刘博巽,秦宇,孙明,德伟,刘志军. 南京医科大学学报(自然科学版). 2015(05)
[3]长链非编码RNA HOTAIR在食管鳞癌中的表达及意义[J]. 张曌玥,尹越,牟笑,吴诗,毛朝明,陈德玉. 江苏大学学报(医学版). 2014(03)
[4]Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions[J]. ZHU JuanJuan,FU HanJiang,WU YongGe,ZHENG XiaoFei. Science China（Life Sciences）. 2013(10)
[5]人肺腺癌转移相关转录因子1在非小细胞肺癌中的表达分析[J]. 马春平,陆亚东,丁浩. 中国综合临床. 2013 (11)
本文编号：3268178
【文章来源】：苏州大学江苏省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
psiCHECK-2载体图谱和多克隆位点
1. XIST 和 ZEB2 在不同转移状态的非小细胞肺癌患者中的表达情况为了明确在不同转移状态的 NSCLC 患者中 XIST 和 ZEB2 的表达情况，我们收集了 40 例 NSCLC 患者的手术切除肿瘤组织样本，并根据不同的肿瘤转移程度将所有样本分为 2 组：无淋巴结转移组（N0，包括 UICC 分期 Ia，Ib，以及部分IIa 期的患者组织）20 例；伴淋巴结转移组（N1-2，包括 UICC 分期 IIIa，部分 IIIb以及 IV 期的患者组织）20 例。采用实时定量 PCR 法检测全部 40 例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中 XIST 和 ZEB2 的表达水平，结果显示 XIST 在伴淋巴结转移组的NSCLC 组织中的表达明显高于无淋巴结转移组（P<0.01），与此同时 ZEB2 在伴淋巴结转移组的 NSCLC 组织中的表达也明显高于无淋巴结转移组（P<0.01）（图 2）。以上结果表明，XIST 及 ZEB2 均在高转移状态的 NSCLC 表达上调，可能与 NSCLC肿瘤组织的转移性存在相关性。
2. MiR-367-3p、miR-141-3p 及 ZEB2 在 NSCLC 细胞株与正常支气管上皮细胞株中的表达情况我们选取了 5 株不同的非小细胞肺癌细胞株 A549 (腺癌)，H226（鳞癌），95(巨细胞癌低转移株), 95D (巨细胞癌高转移株), H1299 (非小细胞癌)以及 1 株人正常支气管上皮细胞（HBE）为研究对象，运用实时定量 PCR 方法检测其中miR-367-3p、miR-141-3p （内参：U6）的表达以及 ZEB2 mRNA（内参：β-actin的表达水平。检测结果显示：与正常支气管上皮细胞比较，miR-367-3p、miR-141-3的表达水平在非小细胞肺癌细胞株中呈现出不同程度的下调，且在高转移的 95细胞表达水平较低转移的 95C 细胞更低。ZEB2 mRNA 的表达水平在非小细胞肺癌细胞株中呈现出不同程度的上调（图 3）。ZEB2 mRNA 与 miR-367-3p、miR-141-3呈现为相反的表达趋势。
【参考文献】：
期刊论文
[1]人长链非编码RNA基因SPRY4-IT1对肺癌细胞A549侵袭和迁移能力的影响[J]. 柴松,安文婷,郭丽丽,姜乐,高志嵩,李书军. 中国肺癌杂志. 2015(08)
[2]长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响[J]. 陈志强,尹凌帝,孙倩,刘博巽,秦宇,孙明,德伟,刘志军. 南京医科大学学报(自然科学版). 2015(05)
[3]长链非编码RNA HOTAIR在食管鳞癌中的表达及意义[J]. 张曌玥,尹越,牟笑,吴诗,毛朝明,陈德玉. 江苏大学学报(医学版). 2014(03)
[4]Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions[J]. ZHU JuanJuan,FU HanJiang,WU YongGe,ZHENG XiaoFei. Science China（Life Sciences）. 2013(10)
[5]人肺腺癌转移相关转录因子1在非小细胞肺癌中的表达分析[J]. 马春平,陆亚东,丁浩. 中国综合临床. 2013 (11)
本文编号：3268178
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3268178.html
