长链非编码RNA RoR通过Wnt/β-catenin信号通路增强胰腺癌细胞干性
发布时间：2021-07-09 07:02
胰腺癌是世界上最具破坏性和致死率的消化道恶性肿瘤之一,发病率逐年增高,由于胰腺癌起病隐匿,早期缺乏特征性临床表现,导致早期诊断困难,大多数胰腺癌患者确诊时已经是晚期,丧失了手术治疗的最佳时机,并且放化疗对胰腺癌治疗效果欠佳,当前有效的免疫治疗手段匮乏,同时由于胰腺癌发病机制不明,疾病进展迅速,早期易发生转移,导致预后极差,5年生存率不足5%。因此,探索胰腺癌发生发展的相关分子机制,为临床进一步研究胰腺癌基因靶向治疗奠定基础显得尤为重要。肿瘤干细胞（CSCs）是指肿瘤细胞中极少数的处于分裂静止状态的未分化细胞,具有一定的自我更新能力,并且具有独特的可塑性、代谢能力以及增强的放化疗抵抗能力。研究表明,在胰腺癌中,胰腺癌干细胞（PCSCs）驱动了肿瘤的发生和发展,并且在肿瘤转移、复发以及耐药中起到了重要作用,胰腺癌高度恶性生物学行为可能由胰腺癌组织内的PCSCs所决定。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类200个以上核苷酸组成的不编码蛋白的RNA分子,多项研究表明lncRNA是胚胎发育、细胞代谢等多种细胞生物学行为中的关键调控因子,其异常表达与肿瘤的...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Wnt/β-catenin信号通路示意图
江苏大学硕士学位论文21图2.1荧光定量PCR检测人胰腺癌细胞中Linc-RoR表达Fig.2.1DetectionoftheexpressionofLinc-RoRinhumanpancreaticcancercellsbyqRT-PCR2.2.2质粒转染胰腺癌细胞的转染效率2.2.2.1验证pCDH-RoR质粒转染效率依据Linc-RoR在不同胰腺癌细胞株中的差异性表达，我们通过质粒转染技术在Linc-RoR表达量相对较低的BxPC-3、SW1990细胞中转入pCDH-RoR及其对照pCDH-Vector，采用荧光定量PCR的方法检测显示转入pCDH-RoR的胰腺癌细胞中Linc-RoR的相对表达量明显高于对照组（图2.2），转染有效，差异具有统计学意义（P<0.05）。图2.2BxPC-3和SW1990细胞株中上调Linc-RoR表达（*P<0.05）Fig.2.2Up-regulatingLinc-RoRinBxPC-3andSW1990cells(*P<0.05)2.2.2.2验证sh-RoR质粒转染效率依据Linc-RoR在不同胰腺癌细胞株中的差异性表达，我们通过质粒转染技术在Linc-RoR表达量相对较高的SW1990、PaTu-8988细胞中转入sh-RoR与sh-NC，结果表明转入sh-RoR后胰腺癌细胞中Linc-RoR的相对表达量明显低于对照组（图2.3），差异具有统计学意义（P<0.05）。
长链非编码RNARoR通过Wnt/β-catenin信号通路增强胰腺癌细胞干性22图2.3SW1990和PaTu-8988细胞株中下调Linc-RoR表达（*P<0.05）Fig.2.3Down-regulatingLinc-RoRinSW1990andPaTu-8988cells(*P<0.05)2.2.3Linc-RoR调节胰腺癌细胞干性2.2.3.1Westernblot技术检测干性相关基因的表达通过Westernblot技术从蛋白水平检测转染后的胰腺癌细胞中干性相关基因CD133、C-myc、Nanog、Oct4、Sox2的表达，结果表明上调胰腺癌细胞BxPC-3和SW1990中Linc-RoR的表达后，干性相关基因的蛋白表达量与对照组（pCDH-Vector组）相比明显增高，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2.4）；同时，下调胰腺癌细胞SW1990和PaTu-8988中Linc-RoR的表达后，干性相关基因的蛋白表达量与对照组（sh-NC组）相比明显下降，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2.5）。2.4上调Linc-RoR，WesternBlot检测胰腺癌细胞中干性相关基因的表达BA
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer stem cell plasticity and tumor hierarchy[J]. Marina Carla Cabrera,Robert E Hollingsworth,Elaine M Hurt. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions[J]. ZHU JuanJuan,FU HanJiang,WU YongGe,ZHENG XiaoFei. Science China（Life Sciences）. 2013(10)
本文编号：3273278
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Wnt/β-catenin信号通路示意图
江苏大学硕士学位论文21图2.1荧光定量PCR检测人胰腺癌细胞中Linc-RoR表达Fig.2.1DetectionoftheexpressionofLinc-RoRinhumanpancreaticcancercellsbyqRT-PCR2.2.2质粒转染胰腺癌细胞的转染效率2.2.2.1验证pCDH-RoR质粒转染效率依据Linc-RoR在不同胰腺癌细胞株中的差异性表达，我们通过质粒转染技术在Linc-RoR表达量相对较低的BxPC-3、SW1990细胞中转入pCDH-RoR及其对照pCDH-Vector，采用荧光定量PCR的方法检测显示转入pCDH-RoR的胰腺癌细胞中Linc-RoR的相对表达量明显高于对照组（图2.2），转染有效，差异具有统计学意义（P<0.05）。图2.2BxPC-3和SW1990细胞株中上调Linc-RoR表达（*P<0.05）Fig.2.2Up-regulatingLinc-RoRinBxPC-3andSW1990cells(*P<0.05)2.2.2.2验证sh-RoR质粒转染效率依据Linc-RoR在不同胰腺癌细胞株中的差异性表达，我们通过质粒转染技术在Linc-RoR表达量相对较高的SW1990、PaTu-8988细胞中转入sh-RoR与sh-NC，结果表明转入sh-RoR后胰腺癌细胞中Linc-RoR的相对表达量明显低于对照组（图2.3），差异具有统计学意义（P<0.05）。
长链非编码RNARoR通过Wnt/β-catenin信号通路增强胰腺癌细胞干性22图2.3SW1990和PaTu-8988细胞株中下调Linc-RoR表达（*P<0.05）Fig.2.3Down-regulatingLinc-RoRinSW1990andPaTu-8988cells(*P<0.05)2.2.3Linc-RoR调节胰腺癌细胞干性2.2.3.1Westernblot技术检测干性相关基因的表达通过Westernblot技术从蛋白水平检测转染后的胰腺癌细胞中干性相关基因CD133、C-myc、Nanog、Oct4、Sox2的表达，结果表明上调胰腺癌细胞BxPC-3和SW1990中Linc-RoR的表达后，干性相关基因的蛋白表达量与对照组（pCDH-Vector组）相比明显增高，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2.4）；同时，下调胰腺癌细胞SW1990和PaTu-8988中Linc-RoR的表达后，干性相关基因的蛋白表达量与对照组（sh-NC组）相比明显下降，差异具有统计学意义（P<0.05）（图2.5）。2.4上调Linc-RoR，WesternBlot检测胰腺癌细胞中干性相关基因的表达BA
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cancer stem cell plasticity and tumor hierarchy[J]. Marina Carla Cabrera,Robert E Hollingsworth,Elaine M Hurt. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
[2]Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions[J]. ZHU JuanJuan,FU HanJiang,WU YongGe,ZHENG XiaoFei. Science China（Life Sciences）. 2013(10)
本文编号：3273278
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