盐霉素通过Notch/Hedgehog信号转导通路对乳腺癌干细胞作用机制的研究

发布时间：2021-07-09 22:49

　　研究背景:乳腺癌在现如今世界上是女性最常见的恶性肿瘤,是引发女性死亡的主要原因。目前虽然在治疗水平有了很大的提高,但仍不能使大多数患者受益。“肿瘤起源于肿瘤干细胞”这一学说的提出及对乳腺癌干细胞的深入研究为乳腺癌的治疗提供了新的方向。肿瘤干细胞作为肿瘤组织的起始细胞,不仅具有自我更新和无限增殖的特征,还拥有重建肿瘤组织和放化疗抵抗的能力,也是肿瘤放化疗失败和复发的重要原因所在。近些年来和乳腺癌干细胞相关的信号转导通路的深入研究也为乳腺癌的临床治疗提供了新的依据。盐霉素的分子结构是特殊的环状结构,属于一元羧酸聚醚类,是一种新型的离子载体型抗生素,起初在白色链霉菌中被发现。它能通过中和抵消细胞内的大多数阳离子,对大部分的球虫和各种革兰氏阳性菌均有较强的杀灭作用,且不易产耐药性和抗药性,主要用于治疗家禽球虫病。而近些年,有研究人员提出盐霉素具有抵抗肿瘤的作用特性,且在杀伤乳腺癌干细胞方面比普通化疗药物作用显著。盐霉素可通过Wnt/β-catenin、ER、MAPK以及Akt/NF-k B这些信号转导通路对多种肿瘤细胞发挥作用,并且这些信号转导通路与乳腺癌干细胞也有着密切的联系。而近期关于No... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

盐霉素抑制乳腺癌细胞的增殖，阻滞细胞周期，促进其凋亡（A）CCK8检测盐霉素作用48h后不同浓度的盐霉素对MCF-7细胞的抑制率,IC50为1umol/L（B）CCK8检测不同浓度盐霉素作用不同时间所对应的OD.值

图 2.盐霉素抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移(A)划痕实验检测盐霉素对乳腺癌细胞转移的抑制作用（B）Transwell 检测盐霉素对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用（C）不同浓度的盐霉素处理后细胞侵袭的数量表 7 各组的细胞划痕实验结果细胞分组 移动距离（均数±标准差）DMSO 32.1±3.10.5umol/L 17.8±2.71.0umol/L 8.6±1.71.5umol/L 4.2±1.13. 盐霉素能抑制乳腺癌干细胞采用流式细胞仪检测具有 CD44+CD24-表型的细胞所占比例的结果显示;盐霉素能够减少 MCF-7 细胞中 CD44+CD24-的比例。经 0.5、1、1.5umol/L 的盐霉素处理的细胞组中 CD44+CD24-的比例分别为（1.71%±0.42%）、（1.01%±0.21%）、

图 3.盐霉素抑制乳腺癌细胞的侵袭和转移（A）流式细胞仪检测经不同浓度盐霉素作用后 CD44+CD24-比例的变化。（B）成球试验检测经不同浓度盐霉素作用后乳腺球的体积和数量的变化。（C）Western blot和 RT-PCR 检测经盐霉素处理后乳腺癌干细胞标记 ALDH1 的 mRNA 和蛋白的表达情况。4. 盐霉素可通过抑制Notch/Hedgehog信号通路的激活这一作用机制抑制乳腺癌干细胞为进一步探讨盐霉素抑制乳腺癌干细胞的机制，采用 RT-PCR 和 Western blot方法检测经不同浓度盐霉素处理后 Notch/Hedgehog 通路中重要组成成分的基因水平和蛋白水平随着药物浓度的增加而产生变化。实验结果显示经盐霉素处理的细胞中 Notch/Hedgehog 通路中重要的分子的基因水平和蛋白水平均明显降低，显著低于对照组（图 4）。


本文编号：3274639