MicroRNA-196a-5p和MicroRNA-196b-5p影响结直肠癌转移和生物学行为的机制研究

发布时间：2021-07-11 22:36

　　目的:结直肠癌为常见的人恶性肿瘤之一。目前,结直肠癌的治疗方式主要根据癌症发生的部位、分期及癌症进展情况来选择。早期癌症主要依靠外科手术或辅以术前或术后放化疗,内分泌治疗等,但是,当癌症进入中晚期时,尤其发生严重转移后,则无法通过手术治疗达到预期效果。传统的治疗方法主要利用了化疗药物同时配合放射治疗来控制癌症的扩散和恶化。近些年来,基因的靶向治疗成为了肿瘤治疗新的热点,也为结直肠癌的治疗提供了许多新的方向,在多方面提高了结直肠癌患者的治愈率生存质量。在多年的研究中发现,结直肠癌最主要的转移部位是肝脏,在确诊为结直肠原发癌的六个月内,约有25%-30%的患者发生了肝转移。结直肠癌肝转移是一个非常复杂的生物学过程,其机制尚不十分明显,肝转移是结直肠癌发生和预后不良的主要原因。Micro RNA（mi RNA）作为一种内源的、长度约为20-24个核苷酸的小RNA,在细胞内具有多种非常重要的调节作用。Mi RNA突变与异位表达与多种人类癌症密切相关,mi RNA可以起到抑制肿瘤的发生发展或者促进肿瘤进展的作用,同时可以抑制或促进多种肿瘤相关基因表达。大量的研究表明,mi RNA在肿瘤的发生、发... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 :Micro RNA-196a-5p对结直肠癌细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响和机制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 细胞转染
            2.2.3 细胞计数及铺板
            2.2.4 Real-time PCR
            2.2.5 CCK8实验
            2.2.6 细胞划痕实验
            2.2.7 细胞侵袭实验
            2.2.8 Western blot
            2.2.9 免疫荧光检测
            2.2.10 HE染色
            2.2.11 体内肿瘤转移实验
            2.2.12 双荧光素酶报告基因实验
            2.2.13 统计学方法
    3 实验结果
        3.1 MiR-196a-5p促进结直肠癌细胞的增殖
        3.2 MiR-196a-5p促进结直肠癌细胞的迁移和侵袭
        3.3 MiR-196a-5p促进结直肠癌肝转移
        3.4 Mi R-196a-5p促进结直肠癌细胞的上皮间充质转化(EMT)
        3.5 抑制NF-κB信号通路可以抑制结直肠癌细胞的EMT
        3.6 IκBα是 mi R-196a-5p的下游靶基因
        3.7 Mi R-196a-5p通过与IκBα的靶向结合促进了结直肠癌细胞的EMT和结直肠癌细胞的迁移和侵袭
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :Micro RNA-196b-5p通过靶向结合ING5 影响结直肠癌恶性生物学行为的机制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 主要试剂
            2.1.2 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 细胞培养
            2.2.2 细胞转染
            2.2.3 细胞计数及铺板
            2.2.4 Real-time PCR
            2.2.5 CCK8
            2.2.6 细胞迁移实验
            2.2.7 细胞侵袭实验
            2.2.8 Western blot
            2.2.9 体内肿瘤转移实验
            2.2.10 双荧光素酶报告基因实验
            2.2.11 细胞凋亡实验
            2.2.12 细胞周期检测
            2.2.13 统计学方法
    3 实验结果
        3.1 MiR-196b-5p在结直肠癌组织和细胞中高表达
        3.2 MiR-196b-5p影响结直肠癌细胞增殖和凋亡
        3.3 MiR-196b-5p影响结直肠癌细胞迁移和侵袭
        3.4 ING5影响结直肠癌细胞增殖和凋亡
        3.5 ING5影响结直肠癌细胞迁移和侵袭
        3.6 ING5是mi R-196b-5p的靶基因
        3.7 ING5 敲低同时抑制mi R-196b-5p在结直肠癌细胞中的表达,影响结直肠癌细胞增殖和凋亡
        3.8 ING5 敲低同时抑制mi R-196b-5p在结直肠癌细胞中的表达,影响结直肠癌细胞迁移和侵袭
        3.9 MiR-196b-5影响裸鼠肿瘤生长
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]生长抑制蛋白家族成员5（ING5）在人乳腺癌细胞的核质转运与不良临床病理特征的相关性分析[J]. 宋洋,赵树鹏,齐凤杰,郑华川.  细胞与分子免疫学杂志. 2018(01)
[2]MiR-196a与ZG16蛋白在结直肠癌中的表达意义及相关性分析[J]. 樊鑫鑫,赵青芳,关露露,刘奇,王茂勋,吕慧芳,陈小兵.  中华结直肠疾病电子杂志. 2017(04)
[3]MicroRNA-196a对食管癌预后的评估价值及其生物学行为的调控机制[J]. 吴晓鹏,陈强,刘勤,乔滨,张卫国.  中国现代医学杂志. 2017(13)
[4]miR-196a2 T>C基因多态与宫颈癌易感性的关系研究[J]. 丁波,王美林,张正东,韩素萍.  南京医科大学学报(自然科学版). 2016(01)
[5]miR-374b-5p suppresses RECK expression and promotes gastric cancer cell invasion and metastasis[J]. Juan Xie,Zhi-Hui Tan,Xia Tang,Ming-Shu Mo,Yan-Ping Liu,Run-Liang Gan,Yi Li,Li Zhang,Guo-Qing Li.  World Journal of Gastroenterology. 2014(46)
[6]Micro RNAs in colorectal cancer:Role in metastasis and clinical perspectives[J]. Shan Muhammad,Kavanjit Kaur,Rui Huang,Qian Zhang,Paviter Kaur,Hamza Obaid Yazdani,Muhammad Umar Bilal,Jiang Zheng,Liu Zheng,Xi-Shan Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2014(45)
[7]Colorectal cancer:Current imaging methods and future perspectives for the diagnosis, staging and therapeutic response evaluation[J]. Maka Kekelidze,Luigia D’Errico,Michele Pansini,Anthony Tyndall,Joachim Hohmann.  World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
[8]High miR-196a levels promote the oncogenic phenotype of colorectal cancer cells[J]. Carl Christoph Schimanski,Kirsten Frerichs,Fareed Rahman,Martin Berger,Hauke Lang,Peter R Galle,Markus Moehler,Ines Gockel.  World Journal of Gastroenterology. 2009(17)



本文编号：3278712