家蝇幼虫抗菌肽对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM的影响
发布时间：2021-07-19 10:03
目的:阿霉素诱导建立人肝癌多药耐药细胞系,检测家蝇幼虫抗菌肽对耐药细胞的抑制作用,探究抗菌肽对肝癌细胞耐药性的逆转作用及机制。方法:1.采用阿霉素小剂量持续培养、浓度梯度递增法建立人肝癌耐药细胞系。2.培养细胞,绘制细胞的生长曲线,计算细胞倍增时间。3.采用MTT法检测细胞对抗菌肽和阿霉素、紫杉醇等化疗药物的敏感性。4.细胞侵袭实验检测抗菌肽对细胞侵袭性的影响。5.荧光显微镜观察细胞内阿霉素的荧光强度。6.流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡率、细胞内阿霉素含量以及细胞表面P-gp表达情况。7.荧光定量PCR法检测细胞多药耐药基因的表达情况。结果:1.建成了可以在含0.5μg/mL阿霉素的完全培养基中稳定生长的细胞,命名为Bel-7402/ADM细胞,细胞的形态和大小与亲本细胞基本相似,但是Bel-7402/ADM细胞的倍增时间较亲本细胞延长（P<0.05）,细胞增殖速度减慢。2.MTT检测结果:（1）建成的Bel-7402/ADM细胞对阿霉素的耐药指数为10.96,且细胞对5-Fu、长春新碱、紫杉醇、顺铂以及吉西他滨也不同程度耐药,是多药耐药的细胞系。（2）抗菌肽对细胞的毒性作...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
光学显微镜下观察细胞形态（×100）
图 1-2：光学显微镜下观察细胞形态（×100）线和倍增时间为细胞的生长曲线，根据回归方程计算得两细胞的32）h 和（35.04 ± 2.09）h，Bel-7402/ADM 细胞的倍0.05），提示细胞增殖速度减慢。
表 1-1 细胞对化疗药的敏感性检测2.4 流式细胞仪检测耐药细胞 Bel-7402/ADM 的周期变化图1-4所示为细胞周期分布结果，Bel-7402细胞的周期分布：G0/G1期：（42.48± 2.2）%，S 期：（38.68 ± 1.97）%，G2/M 期：（18.84 ± 1.34）%；Bel-7402/ADM细胞的周期分布：G0/G1 期：（52.75 ± 3.44）%，S 期：（22.66 ± 4.5）%，G2/M期：（24.6 ± 4.5）%。Bel-7402/ADM 细胞的周期分布较亲本细胞发生明显变化：处于 G0/G1 期的细胞比例明显升高，S 期的细胞比例下降（P＜0.05，图 1-5）。细胞处于 G0/G1 期的 Bel-7402/ADM 细胞比例增高
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用[J]. 李军,回丽媛,战仕胜,王秀青. 肿瘤防治研究. 2017(10)
[2]美洲大蠊提取物逆转BEL-7402/5-Fu多药耐药性的作用及机制研究[J]. 王瑶,李婷,乔婷婷,刘俊勇,沈琦,彭芳. 药学研究. 2017(06)
[3]锯缘青蟹Scygonadin抗菌肽的毕赤酵母表达及其产物抑菌活性分析[J]. 郭子好,方华,李春源,夏志生,张冬冬,冯晓青,李世超. 饲料研究. 2017(10)
[4]乳铁蛋白抗菌肽抑制胃癌细胞增殖诱导其凋亡的体外研究[J]. 杨雪,石皖荣,杨伟杰,何韬,胡阳生,王珊珊,韦文美,秦宜德. 安徽医科大学学报. 2017(06)
[5]ATP结合盒转运体与肝癌化疗耐药相关性的研究进展[J]. 刘文斌,曹广文. 上海预防医学. 2017(04)
[6]抗菌肽17BIPHE2对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制作用[J]. 回丽媛,李军,朱明星,王秀青. 微生物学通报. 2017(04)
[7]吉西他滨诱导胰腺癌PANC-1细胞耐药与C-IAP2表达关系的研究[J]. 张帆,黄鹤光. 中国临床药理学杂志. 2016(06)
[8]抗菌肽Temporin-1CEa及其改造肽抑制血管新生和黑色素瘤转移侵袭的作用研究[J]. 任会丹,张琳,赵颖,司新红,张亮,王澈. 中国生化药物杂志. 2016 (02)
[9]索拉非尼诱导的耐药性肝癌细胞的生物学特征分析[J]. 李明远,徐艳敏,钱程. 第三军医大学学报. 2016(06)
[10]中药对P-糖蛋白的影响及机制的研究进展[J]. 梁晓玲,冯立影,孙德春,刘高峰. 实用药物与临床. 2016(01)
硕士论文
[1]抗菌肽Temporin-1CEa降低MCF-7/Adr细胞耐药性的作用研究[D]. 黄静.辽宁师范大学 2016
[2]家蝇幼虫抗菌肽defensin对食管癌细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用研究[D]. 原发家.山西医科大学 2015
[3]抗菌肽Temporin-1CEa对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADR的作用研究[D]. 郎蕾.辽宁师范大学 2014
[4]人乳腺癌耐药细胞株的建立及其耐药机制研究[D]. 李文静.南京医科大学 2012
本文编号：3290501
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
光学显微镜下观察细胞形态（×100）
图 1-2：光学显微镜下观察细胞形态（×100）线和倍增时间为细胞的生长曲线，根据回归方程计算得两细胞的32）h 和（35.04 ± 2.09）h，Bel-7402/ADM 细胞的倍0.05），提示细胞增殖速度减慢。
表 1-1 细胞对化疗药的敏感性检测2.4 流式细胞仪检测耐药细胞 Bel-7402/ADM 的周期变化图1-4所示为细胞周期分布结果，Bel-7402细胞的周期分布：G0/G1期：（42.48± 2.2）%，S 期：（38.68 ± 1.97）%，G2/M 期：（18.84 ± 1.34）%；Bel-7402/ADM细胞的周期分布：G0/G1 期：（52.75 ± 3.44）%，S 期：（22.66 ± 4.5）%，G2/M期：（24.6 ± 4.5）%。Bel-7402/ADM 细胞的周期分布较亲本细胞发生明显变化：处于 G0/G1 期的细胞比例明显升高，S 期的细胞比例下降（P＜0.05，图 1-5）。细胞处于 G0/G1 期的 Bel-7402/ADM 细胞比例增高
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗菌肽17BIPHE2对人肺腺癌细胞A549的抑制作用[J]. 李军,回丽媛,战仕胜,王秀青. 肿瘤防治研究. 2017(10)
[2]美洲大蠊提取物逆转BEL-7402/5-Fu多药耐药性的作用及机制研究[J]. 王瑶,李婷,乔婷婷,刘俊勇,沈琦,彭芳. 药学研究. 2017(06)
[3]锯缘青蟹Scygonadin抗菌肽的毕赤酵母表达及其产物抑菌活性分析[J]. 郭子好,方华,李春源,夏志生,张冬冬,冯晓青,李世超. 饲料研究. 2017(10)
[4]乳铁蛋白抗菌肽抑制胃癌细胞增殖诱导其凋亡的体外研究[J]. 杨雪,石皖荣,杨伟杰,何韬,胡阳生,王珊珊,韦文美,秦宜德. 安徽医科大学学报. 2017(06)
[5]ATP结合盒转运体与肝癌化疗耐药相关性的研究进展[J]. 刘文斌,曹广文. 上海预防医学. 2017(04)
[6]抗菌肽17BIPHE2对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制作用[J]. 回丽媛,李军,朱明星,王秀青. 微生物学通报. 2017(04)
[7]吉西他滨诱导胰腺癌PANC-1细胞耐药与C-IAP2表达关系的研究[J]. 张帆,黄鹤光. 中国临床药理学杂志. 2016(06)
[8]抗菌肽Temporin-1CEa及其改造肽抑制血管新生和黑色素瘤转移侵袭的作用研究[J]. 任会丹,张琳,赵颖,司新红,张亮,王澈. 中国生化药物杂志. 2016 (02)
[9]索拉非尼诱导的耐药性肝癌细胞的生物学特征分析[J]. 李明远,徐艳敏,钱程. 第三军医大学学报. 2016(06)
[10]中药对P-糖蛋白的影响及机制的研究进展[J]. 梁晓玲,冯立影,孙德春,刘高峰. 实用药物与临床. 2016(01)
硕士论文
[1]抗菌肽Temporin-1CEa降低MCF-7/Adr细胞耐药性的作用研究[D]. 黄静.辽宁师范大学 2016
[2]家蝇幼虫抗菌肽defensin对食管癌细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用研究[D]. 原发家.山西医科大学 2015
[3]抗菌肽Temporin-1CEa对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADR的作用研究[D]. 郎蕾.辽宁师范大学 2014
[4]人乳腺癌耐药细胞株的建立及其耐药机制研究[D]. 李文静.南京医科大学 2012
本文编号：3290501
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