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乙型肝炎病毒X蛋白表观激活SIP1诱导上皮细胞间质化转变及肝细胞肝癌进程

发布时间:2021-07-19 18:05
  目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白诱导上皮细胞间质化转变和肝细胞肝癌进程的机制及SIP1在其中发挥的作用。方法:1、pHBx质粒转染SMMC-7721细胞与HepG2细胞后,运用Transwell实验观察细胞迁移能力变化,检测细胞中SIP1及EMT相关蛋白的表达情况。2、构建稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-X,运用Trasnwell实验观察细胞迁移能力变化,运用Western-blot、qPCR及免疫荧光技术检测细胞SIP1及EMT相关蛋白的表达情况。3、siHBx质粒转染HepG-X细胞,或者在表达HBx的HepG2细胞中敲减SIP1,用Western-blot验证HBx及SIP1敲减情况并检测相关蛋白的表达水平。4、用质粒pRL-PK与pGL3-Basic或pGL3-E-cadherin-luc共转染由HBx处理的肝癌细胞系,酶标仪检测相对荧光素活性。5、HBX转染HepG2细胞12、24、36及48h后,用q-PCR检测各时间点E-cadherin mRNA的变化,选取mRNA发生明显变化的时间作为最佳时间点,用ChIP检测该时间点的E-cadherin基因启动子与SIP1结... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

乙型肝炎病毒X蛋白表观激活SIP1诱导上皮细胞间质化转变及肝细胞肝癌进程


WesternBlot检测HBx对肝癌细胞细胞HepG2中E-cadherin(上皮细胞标志物),Vimentin和N-cadherin(间质细胞标志物)表达水平的影响.

肝癌细胞,细胞


26BX 对肝癌细胞细胞 SMMC-7721 中adherin and Vimentin in SMMC-t analysis.rin 和Vimentin的mRNA水平,A 水平降低,而 Vimentin 的 发现 HBx 的引入能够使细胞中 1.4)。

转染,细胞,肝癌细胞


细胞 HepG2 转染 pHBX 后 E-cadherins of E-cadherin and Vimentin in Hepime RT-PCR analysis.

【参考文献】:
期刊论文
[1]Hepatitis B virus X protein accelerates the development of hepatoma[J]. Xiao-Dong Zhang,Yuan Wang,Li-Hong Ye.  Cancer Biology & Medicine. 2014(03)
[2]Hepatitis B virus,HBx mutants and their role in hepatocellular carcinoma[J]. Ashraf Ali,Hany Abdel-Hafiz,Mohd Suhail,Amany Al-Mars,Mohammad Khalid Zakaria,Kaneez Fatima,Sultan Ahmad,Esam Azhar,Adeel Chaudhary,Ishtiaq Qadri.  World Journal of Gastroenterology. 2014(30)
[3]肝纤维化病理过程中ZEB1和ZEB2的动态表达变化及意义[J]. 韩冰,谢汝佳,洪琴,张成俊,杨勤,程明亮.  中国病理生理杂志. 2012(09)



本文编号:3291172

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