MiR-146a异常表达及其单核苷酸多态位点rs2910164与肝癌易感性的相关研究

发布时间：2021-08-02 12:45

　　研究背景肝癌是第六常见的癌症,同时致死率排名第三,每年有超过700000人被诊断为肝癌,平均每10万人的发病人数为16。肝癌患者的五年生存率约为5-9%,而导致生存率低的原因主要是因为肝癌发现时多数已经处于晚期。通常情况下约70-90%肝癌的发生都与慢性肝脏内疾病的发生有关,大约有80%的肝癌发生在东亚以及撒哈拉以南非洲地区,而这主要与慢性乙肝病毒感染以及黄曲霉素B的摄入有关。而在北美,欧洲以及日本,慢性丙肝病毒感染是肝癌发生的主要危险因素,其次是饮酒。肝癌的发生是一个复杂的过程,与多种突变以及信号通路改变有关,其中最常见的基因突变是抑癌基因TP53的失活突变,大约有20-40%的肝癌病人有TP53的基因突变,并且其突变频率与肝癌的发展阶段有关。CTNNB1,编码βcatenin,发生突变的概率约为25%,主要在HCV相关的肝癌中出现。同时在染色体1q,6p,8q,17q和20q发生的基因扩增以及4q,8p,11q,13q,16q和17p的片段缺失突变在肝癌中较为常见,它们影响了一些重要的致癌基因和抑癌基因。表皮生长因子受体EGFR及Ras信号通路在超过50%的肝癌患者中都被激活,而m... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１肝癌患者肿瘤组织和癌旁组织ｍｉＲ－１４６ａ表达水平

为了进一步验证ｍｉＲ－１４６ａ是否在肝癌中呈表达下调，本文选择了肝癌细胞??系ＬＭ３，?ＱＧＹ－７７０１，ＳＭＭＣ－７７２１，?ＨｅｐＧ２以及正常肝细胞系Ｌ０２进行验证。??采用荧光定量ＰＣＲ对上述细胞系ｍｉＲ－１４６ａ表达进行检测，结果如图３所示，??ｍｉＲ－１４６ａ在正常肝细胞系Ｌ０２以及ＬＭ３中表达较高，而在肝癌细胞系ＨｅｐＧ２，??ＳＭＭＣ－７７２１和ＱＧＹ－７７０１中表达较低，表明部分肝癌细胞系如ＨｅｐＧ２?，??１２??

．所用的统计数据均使用ＳＰＳＳ?１９．０进行分析，数据均重复测量上次，表示方??均为ｒｎｅａｎＳ±ＳＤ，独立样品均采用ｔ校验进行分析。ＰＣ０．０５被认为是具有显著??性差异。??３?？结果??３．１?ｍｉＲ－１４６ａ在肝癌细胞系ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ－７７２１中的稳定表达检测??将ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ－７７２１细胞按照５ｘｌ〇５／孔铺板在六孔板中，待细胞铺满??底部３０－５０％即进行慢病毒转染，分别在六孔板不同的孔中加入ｌｍＬｍｉＲ－１４６ａ，??或者ｌｍＬ?ＰＬＫ０．１慢病毒以及终浓度８ｕｇ／ｍＬ的Ｐｏｌｙｂｒｅｎｅ，并在病毒感染２４ｈ过??后加入ｌｕｇ／ｕＬ的ｐｕｒｏｍｙｃｉｎ进行筛选，继续培养７２ｈ后米用ＴＲｉｚｏｌ试剂收细胞??品的总ＲＮＡ，然后采用荧光定量ＰＣＲ对ｍｉＲ－１４６ａ的表达进行检测，如图４??所示，结果表明，在ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ－７７２１细胞中稳定转染ｍｉＲ－１４６ａ后，与感??染ＰＬＫ０．１以及亲代细胞相比，ｍｉＲ－１４６ａ表达明显上调（＊ｐ＜０．０５）。??Ｈｅｐ２－

【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatocellular carcinoma,human immunodeficiency virus and viral hepatitis in the HAART era[J]. Douglas C Macdonald,Mark Nelson,Mark Bower,Thomas Powles.  World Journal of Gastroenterology. 2008(11)



本文编号：3317588