METTL14介导的LncRNA NEAT1的m6A甲基化在肾癌发展和转移中的作用及机制研究

发布时间：2021-08-03 13:52

　　研究背景及目的长非编码RNA（Lnc RNAs）已成为多种癌症新的基因调控因子和预后标志物。lnc RNA核丰富转录本1（NEAT1）与肿瘤的发生有关,已有研究报道NEAT1在肾透明细胞癌（Clear cell renal cell carcinoma,cc RCC）表达上调。在肾癌患者中,NEAT1的高表达与肿瘤进展和生存不良有关。NEAT1基因敲除抑制肾癌细胞增殖,通过抑制上皮向间充质转化表型抑制肾癌细胞迁移和侵袭。目前在生物体内已发现100多种RNA修饰。一些研究已经广泛地报道了某些类型的RNA修饰有核m RNA,包括N1-甲基腺苷（m1A）、N6-甲基腺苷（m6A）和5-甲基胞嘧啶（m5C）,其中m6A是在20世纪70年代首次发现的。目前,m6A的表位转录修饰引起了人们的关注。m6A RNA修饰是大多数真核生物中最丰富的m RNA和非编码RNA的内部修饰,m6A RNA修饰的生理重要性已被其在组织发育和分化中的关键作用所证实。m6A RNA修饰在不同的水平上调节m RNA,如结构、成熟、稳定、剪接、输出、翻译和衰退。此外,m6A RNA修饰还参与细胞命运的决定、细胞周期调控、细... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肾癌组织芯片中METTL14的表达水平*p<0.05，n=64

METTL14介导的LncRNANEAT1的m6A甲基化在肾癌发展和转移中的作用及机制研究-21-图1D肾癌组织芯片中METTL14的表达水平*p<0.05，n=64图1ETCGA数据库中METTL14肾癌和正常肾组织表达水平及METTL14在肾癌不同分级的表达水平

图1F TCGA 数据库中METTL14对肾癌总生存期和无疾病生存期的影响 （二）干扰 METTL14 促进肾癌细胞的增殖、迁移表型 为了探究METTL14是否影响肾癌细胞的表型，我们设计了METTL14的两个siRNA，成功干扰786-O、769-P肾癌细胞并PCR验证其干扰效率（图2A），进一步通过WB验证对METTL14蛋白的干扰效率（图2B）。成功干扰肾癌细胞系后，我们通过CCK8实验、平板克隆实验检测到干扰METTL14相对于对照组促进肾癌细胞的增殖（图2C、2D），通过transwell小室实验检测到相对于对照组干扰METTL14促进肾癌细胞的迁移（图2E），通过以上实验，我们发现抑制METTL14在肾癌细胞中的表达可以促进肾癌的增殖和迁移表型。

【参考文献】：
期刊论文
[1]The RNA Modification N6-methyladenosine and Its Implications in Human Disease[J]. Pedro J.Batista.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2017(03)



本文编号：3319736