双硫仑抑制TGF-β诱导的肺癌细胞上皮间质转化的作用及机制研究

发布时间：2021-08-06 04:37

　　目的肺癌每年的确诊率和死亡率在常见癌症中都是最高的。肺癌转移被认为是造成肺癌患者复发甚至死亡的主要原因。已有大量研究结果表明上皮来源肿瘤通过上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）获得浸润周围组织向远端转移的能力。近年来双硫仑（Disulfiram,DSF）因其广谱抗癌效果而受到广泛的关注。基于以上背景,本研究拟探讨DSF对TGF-β诱导的非小细胞肺癌A549细胞株发生EMT的影响,并对其作用机制初步分析。方法本研究以非小细胞肺癌A549细胞株为研究对象,采用浓度不同的双硫仑及TGF-β处理细胞后开展如下实验:采用MTT实验检测DSF细胞毒性;采用划痕迁移实验和Transwell迁移实验检测细胞发生EMT后的迁移能力改变;采用Transwell小室侵袭实验检测细胞发生EMT后的侵袭能力的改变;通过Western blot检测细胞中EMT相关蛋白（E-cadherin、Vimentin、N-cadherin）的表达改变,并用Western blot检测Snail、ERK1/2、p-ERK1/2的表达来分析DSF通过什么机制影响EMT过程... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

EMT相关细胞表型改变[41]

第1章绪论8统中的肿瘤细胞表现出间充质/部分间充质特征，这能帮助肿瘤细胞扩散（b）；肿瘤细胞扩散到远处组织后，可能通过逆转EMT，即激活MET程序帮助肿瘤细胞在新位置定居(c)。图1.1EMT相关细胞表型改变[41]图1.2肿瘤转移过程上皮-间质表型的启动[41]

第4章实验结果与讨论25第4章实验结果与讨论4.1MTT检测DSF对肺癌A549的细胞毒性作用为确定DSF抗肿瘤的作用并非是通过对肿瘤细胞增殖的抑制，在不同浓度DSF（1μM、2μM、5μM、10μM、20μM、40μM、80μM）处理A549细胞后，用MTT实验分析细胞生存率。结果如图4.1所示：A549细胞给药24小时之后，1μM至20μM实验组中，与空白对照组细胞相比无明显差异，DSF对细胞生存率没有明显抑制作用，20μM时细胞生存率为97%，40μM时细胞生存率下降为77%，在80μM时细胞的生存率为65%，因此，后续实验中将用1μM、2μM、5μM、10μM和20μM浓度DSF进行检测。图4.1DSF对肺癌A549细胞生存率的影响（*P<0.05，***P<0.001）

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3325083