USP22促进缺氧诱导的肝细胞癌干性的研究
发布时间：2021-08-07 20:46
研究背景:肝细胞癌（以下简称肝癌）,是我国目前普遍的恶性肿瘤之一。其中90%以上患者的肝癌与乙型肝炎相关。以手术切除为主,经动脉化疗栓塞,射频消融等为辅的治疗方法虽然对患者的预后有所帮助,但对晚期肝癌并无显著疗效。因此,探索肝癌的发生发展机制,寻找肝癌治疗的新靶点,对于提高肝癌患者生存率至关重要。由于无限制增殖以及血管生成异常,包括肝癌在内的实体肿瘤内部普遍缺氧。HIF1α是缺氧诱导因子HIF1的关键亚基,在缺氧时稳定,参与调控肿瘤干性相关基因的表达。泛素特异性肽酶USP22在前期研究中被认为是肿瘤干性标志物,本研究团队前期已发现USP22可通过促进MRP1表达调控肝癌细胞对化疗药物耐药。TP53作为最重要的抑癌基因之一,在乙肝相关肝癌患者中突变频率高。本研究发现USP22在缺氧条件下促进HIF1α的表达;而HIF-1α在TP53基因突变时可反向促进USP22的转录表达水平。因此,本项目研究在缺氧条件下USP22/HIF1α对肝癌耐药、转移、成瘤等干性表型的影响,阐明在分子层面USP22与HIF1α的相互调节机制,评估在肝癌组织标本中USP22/HIF1α的表达状态及关联性,验证USP...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
USP22对肿瘤干性相关基因表达的影响
浙江大学博士学位论文3.2USP22在缺氧条件下促进肝癌细胞增殖在PLC/PRF/5和BEL各组间细胞数的变化。如图USP22表达降低组的细胞数为对照组的20%。在BEL-7402细胞系中和BEL-7402细胞系中过表达过表达组细胞数为对照组的细胞中，则分别为134%，图3.2细胞计数测定图注：A在PLC/PRF/5氧（20%O2）或缺氧（20%O数(NC，对照组；shUSP22癌细胞系中过表达USP22小时，台盼蓝染色后进行细胞计数15EL-7402细胞系中降低USP22的表达，通过细胞计数检测如图3.2A所示，在PLC/PRF/5细胞系中，常氧条件培养的60%左右，而缺氧培养时则小于对照组的细胞系中，两组数据则分别为65%，40%。如图3.2USP22。48小时后，在SK-Hep-1细胞中129%，缺氧培养是则为对照组148%。197%。USP22对常氧及缺氧培养的肝癌细胞增殖影响和BEL-7402肝癌细胞系中降低USP222）培养箱中培养48小时，台盼蓝染色后进行细胞计，USP22表达降低组)。B在SK-Hep-1和，在常氧（20%O2）或缺氧（20%O2）培养箱中培养台盼蓝染色后进行细胞计数（NC，对照组；USP22，USP22第一部分结果通过细胞计数检测常氧条件培养的而缺氧培养时则小于对照组的3.2B，在SK-Hep-1,常氧培养的。在BEL-7402的表达，在常台盼蓝染色后进行细胞计BEL-7402肝48过表达组）。
浙江大学博士学位论文3.3USP22在缺氧条件下促进肝癌细胞克隆形成如图3.3A所示，在PLC/PRF/5增多以及克隆的体积增大少并且克隆体积显著减小达USP22在缺氧条件下导致了克隆数目显著增加并且克隆体积显著增大图3.3USP22图注：A在PLC/PRF/5降低组（shUSP22），常氧克隆形态。B在SK-Hep过表达组（USP22）,常氧或缺氧培养16和BEL-7402细胞系中，缺氧促进了克隆数目增多以及克隆的体积增大。降低USP22的表达在缺氧条件下导致克隆数目显著减少并且克隆体积显著减校如图3.3B所示，在SK-Hep-1和BEL-7402在缺氧条件下对肝癌细胞克隆形成的影响细胞和BEL-7402细胞中构建对照组（（20%O2）或缺氧（1%O2）培养10天后Hep-1细胞和BEL-7402细胞中构建对照组（10天后，显微镜观察克隆形态第一部分结果缺氧促进了克隆数目7402的中，过表在缺氧条件下导致了克隆数目显著增加并且克隆体积显著增大。的影响（NC）和USP22天后，显微镜观察（NC）和USP22显微镜观察克隆形态。（*p<0.05）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Recent advances in multidisciplinary management of hepatocellular carcinoma[J]. Asmaa I Gomaa,Imam Waked. World Journal of Hepatology. 2015(04)
[2]凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率[J]. 沈雁,涂家生,庞卉,朱家壁. 药学学报. 2009(04)
本文编号：3328513
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
USP22对肿瘤干性相关基因表达的影响
浙江大学博士学位论文3.2USP22在缺氧条件下促进肝癌细胞增殖在PLC/PRF/5和BEL各组间细胞数的变化。如图USP22表达降低组的细胞数为对照组的20%。在BEL-7402细胞系中和BEL-7402细胞系中过表达过表达组细胞数为对照组的细胞中，则分别为134%，图3.2细胞计数测定图注：A在PLC/PRF/5氧（20%O2）或缺氧（20%O数(NC，对照组；shUSP22癌细胞系中过表达USP22小时，台盼蓝染色后进行细胞计数15EL-7402细胞系中降低USP22的表达，通过细胞计数检测如图3.2A所示，在PLC/PRF/5细胞系中，常氧条件培养的60%左右，而缺氧培养时则小于对照组的细胞系中，两组数据则分别为65%，40%。如图3.2USP22。48小时后，在SK-Hep-1细胞中129%，缺氧培养是则为对照组148%。197%。USP22对常氧及缺氧培养的肝癌细胞增殖影响和BEL-7402肝癌细胞系中降低USP222）培养箱中培养48小时，台盼蓝染色后进行细胞计，USP22表达降低组)。B在SK-Hep-1和，在常氧（20%O2）或缺氧（20%O2）培养箱中培养台盼蓝染色后进行细胞计数（NC，对照组；USP22，USP22第一部分结果通过细胞计数检测常氧条件培养的而缺氧培养时则小于对照组的3.2B，在SK-Hep-1,常氧培养的。在BEL-7402的表达，在常台盼蓝染色后进行细胞计BEL-7402肝48过表达组）。
浙江大学博士学位论文3.3USP22在缺氧条件下促进肝癌细胞克隆形成如图3.3A所示，在PLC/PRF/5增多以及克隆的体积增大少并且克隆体积显著减小达USP22在缺氧条件下导致了克隆数目显著增加并且克隆体积显著增大图3.3USP22图注：A在PLC/PRF/5降低组（shUSP22），常氧克隆形态。B在SK-Hep过表达组（USP22）,常氧或缺氧培养16和BEL-7402细胞系中，缺氧促进了克隆数目增多以及克隆的体积增大。降低USP22的表达在缺氧条件下导致克隆数目显著减少并且克隆体积显著减校如图3.3B所示，在SK-Hep-1和BEL-7402在缺氧条件下对肝癌细胞克隆形成的影响细胞和BEL-7402细胞中构建对照组（（20%O2）或缺氧（1%O2）培养10天后Hep-1细胞和BEL-7402细胞中构建对照组（10天后，显微镜观察克隆形态第一部分结果缺氧促进了克隆数目7402的中，过表在缺氧条件下导致了克隆数目显著增加并且克隆体积显著增大。的影响（NC）和USP22天后，显微镜观察（NC）和USP22显微镜观察克隆形态。（*p<0.05）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Recent advances in multidisciplinary management of hepatocellular carcinoma[J]. Asmaa I Gomaa,Imam Waked. World Journal of Hepatology. 2015(04)
[2]凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率[J]. 沈雁,涂家生,庞卉,朱家壁. 药学学报. 2009(04)
本文编号：3328513
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