PLCε通过AKT/GSK-3β/Cdc25a信号通路促进膀胱癌的瓦伯格效应和增殖
发布时间：2021-08-10 12:31
目的:研究人膀胱移行上皮细胞癌（transitional cell carcinoma of bladder,TCCB）中磷脂酶Cε（PLCε）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）、细胞周期蛋白A（Cdc25a）的表达、相关性,且与膀胱癌病理分级分期的关系。探讨PLCε对人膀胱癌T24和BIU细胞瓦伯格效应及TCCB增殖的影响,以及分子机制。方法:（1）免疫组织化学法检测56例人膀胱移行上皮细胞癌组织及29例癌旁组织中PLCε和LDHA蛋白的表达,正置显微镜下拍照,统计学方法分析PLCε和LDHA的表达与临床病理参数之间的关系及二者的相关性。（2）利用干扰PLCε表达的慢病毒感染T24细胞和BIU细胞敲减PLCε的表达,收集各组细胞按照葡萄糖测定试剂盒和乳酸测定试盒的说明书分别检测各组膀胱癌细胞利用葡萄糖和生成乳酸的情况,MTT试验检测T24和BIU细胞的增殖情况,FCM检测T24和BIU细胞的细胞周期变化情况,western blot检测PLCε、AKT、p-AKT、p GSK-3β、Cdc25a、c-myc、Cyclind1及瓦伯格效应相关分子PKM2、GLUT1、LDHA的表达变化情...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HE染色和免疫化
重庆医科大学硕士研究生学位论文同第一部分2 结果2.1 慢病毒成功感染膀胱癌细胞并检测 PLCε 的干扰效果荧光显微镜下观察到慢病毒成功感染 T24 细胞和 BIU 细胞（图 2.1A）。qP结果显示在 T24 细胞和 BIU 细胞中，感染 LV-shPLCε 组 mRNA 水平 PLCε 的表均低于 LV-shNC 组（P＜0.01）；而空白对照组、LV-shNC 组 PLCε 表达无统计学异（P＞0.05）(图 2. 1B、C),实验结果为后续实验顺利进行奠定基础。
重庆医科大学硕士研究生学位论文葡萄糖消耗检测实验结果显示，在 T24 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 利用葡萄糖的能力较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）(图 2.2A)，在 BIU 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 利用葡萄糖的能力较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）(图 2.2c);乳酸生成检测实验显示，在 T24 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h生成乳酸的量较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）（图 2.2B）; 在 BIU 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 生成乳酸的量较 LV-NC 组和 Blank 组均减弱（P<0.01）（图 2.2D）。结果表明下调 PLCε 表达降低了 T24 和 BIU 细胞利用葡萄糖及生成乳酸的能力。
本文编号：3334067
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HE染色和免疫化
重庆医科大学硕士研究生学位论文同第一部分2 结果2.1 慢病毒成功感染膀胱癌细胞并检测 PLCε 的干扰效果荧光显微镜下观察到慢病毒成功感染 T24 细胞和 BIU 细胞（图 2.1A）。qP结果显示在 T24 细胞和 BIU 细胞中，感染 LV-shPLCε 组 mRNA 水平 PLCε 的表均低于 LV-shNC 组（P＜0.01）；而空白对照组、LV-shNC 组 PLCε 表达无统计学异（P＞0.05）(图 2. 1B、C),实验结果为后续实验顺利进行奠定基础。
重庆医科大学硕士研究生学位论文葡萄糖消耗检测实验结果显示，在 T24 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 利用葡萄糖的能力较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）(图 2.2A)，在 BIU 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 利用葡萄糖的能力较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）(图 2.2c);乳酸生成检测实验显示，在 T24 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h生成乳酸的量较 LV-shNC 组和 Blank 组均减弱（P<0.001）（图 2.2B）; 在 BIU 细胞中转染 LV-shPLCε 组 24h 生成乳酸的量较 LV-NC 组和 Blank 组均减弱（P<0.01）（图 2.2D）。结果表明下调 PLCε 表达降低了 T24 和 BIU 细胞利用葡萄糖及生成乳酸的能力。
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