GRHL2通过调节RhoG的转录活性抑制非小细胞肺癌的迁移

发布时间：2021-08-15 09:49

　　背景及目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,对人类的生命安全造成了极大的威胁。肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,而其中非小细胞肺癌占据了肺癌的80%-85%,所以寻找新型的非小细胞肺癌靶点刻不容缓。转录因子GRHL2是GRHL基因家族中的成员之一,现已知与各类生物学过程有关,例如:损伤修复,上皮的完整性和上皮间质转换等;然而,GRHL2在肿瘤中的具体机制还不清楚,并且在不同的肿瘤中发挥不同的作用,甚至作用相反。方法:在肺癌组织及癌旁组织标本中、正常人支气管上皮细胞及肺癌细胞系运用Western Blotting、real-time PCR、IHC技术,分析其中GRHL2的蛋白及mRNA表达水平;通过转染GRHL2治理构建过表达及干扰稳定细胞株,运用Western Blotting技术验证其表达水平;采用细胞生长、克隆集落形成Transwell、Wound Healing实验,检测GRHL2过表达和干扰后,细胞生长、转移能力是否发生变化;生物信息学分析,检测其可能调控的靶向基因位点,运用Western Blotting验证靶点基因及通路相关基因的蛋白表达水平是否随GRHL2过表达和干扰而发生... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GRHL2在非小细胞肺癌中高表达A和B、用蛋白免疫印记和荧光定量PCR分析了GRHL2在HBE和NSCLC细胞的蛋白和mRNA表达水平

图 2.2 GRHL2 对非小细胞肺癌的生长的影响A、转染 48h 后收样，蛋白免疫印迹检测 OXCT1 干扰效率。B、HBE、H1299 和 A549 细胞分别转染 GRHL2 特异 SiRNA 干扰 GRHL2 基因表达后进行结晶紫染色实验。C、H1299 细胞和 H292 细胞分别转染 OXCT1 特异 SiRNA 干扰 OXCT1 基因表达后进行克隆集落形成实验。3.3. 干扰 OXCT1 基因表达抑制了非小细胞肺癌的迁移我们将 GRHL2 的特异 siRNA 转染到 H1299 细胞，对 H1299 细胞都进行了划痕实验。结果显示，和对照组相比，干扰 GRHL2 却能促进 H1299 细胞的迁移（图 3.1-A）然后，对 H1299 细胞进行 Transwell 实验，结果显示，与对照组相比，敲低GRHL2增加了H1299细胞穿过小室的细胞数（图3.1-B）。这说明GRHL2被干扰后，迁移能力反而得到提高。

结果显示，和对照组相比，干扰 GRHL2 却能促进 H1299 细胞的迁移（图 3.1-A）然后，对 H1299 细胞进行 Transwell 实验，结果显示，与对照组相比，敲低GRHL2增加了H1299细胞穿过小室的细胞数（图3.1-B）。这说明GRHL2被干扰后，迁移能力反而得到提高。

【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年中国分地区恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,孙可欣,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷.  中国肿瘤. 2018(01)



本文编号：3344319