基于能量代谢异常的肺癌患者体液中稀有肿瘤细胞的鉴定

发布时间：2021-08-19 22:20

　　恶性肿瘤在转移的过程中通常会有恶性细胞进入体液、血液等循环系统,在这些样本中检测到恶性细胞能够直接判定肿瘤的转移,具有重要的临床意义。当前主要依靠细胞学、组织学检查、细胞侵袭实验以及小鼠成瘤等方法,根据细胞异形性、低分化程度、快速增殖和高侵袭性等特点鉴定恶性细胞,但是在体液中恶性细胞数量稀少,依靠形态学与功能学方法鉴定稀有恶性细胞费时费力。因此本文希望找到一种更为灵敏、简便的稀有恶性细胞检测方法。能量代谢异常是肿瘤细胞的基本特征之一,Warburg效应是最主要的肿瘤代谢异常现象:肿瘤细胞在有氧条件下大量摄取葡萄糖并通过糖酵解途径快速获取能量并提供生物合成的原料。恶性细胞与正常细胞的葡萄糖摄取水平差异显著,放射标记的葡萄糖类似物FDG在临床已被广泛用于恶性肿瘤组织的检测。因此本文根据恶性细胞具有高糖代谢活性这一特征,利用荧光葡萄糖类似物2-NBDG建立了一种快速、高灵敏度的单细胞检测技术,并用于恶性胸腔积液的鉴定。在胸腔积液中检测到肿瘤细胞称之为恶性胸腔积液,它是癌症存在及转移的直接病理证据,患者确诊为IV期一般预后较差。灵敏、准确的诊断出胸腔积液的良恶性,对于患者的及时合理治疗非常重要... 

【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英汉缩写名词对照
第一章 绪论
    1.1 恶性胸腔积液
        1.1.1 影像学检查
        1.1.2 胸腔穿刺术
        1.1.3 胸腔积液细胞学诊断
        1.1.4 胸腔积液中的肿瘤标志物
        1.1.5 免疫组织化学染色诊断
        1.1.6 胸膜组织活检
        1.1.7 胸腔镜检查
        1.1.8 支气管镜检查
        1.1.9 新型检测技术
    1.2 稀有细胞检测方法
        1.2.1 基于细胞表面标志物的分离技术
        1.2.2 基于物理性质的分离技术
    1.3 肿瘤糖代谢
    1.4 葡萄糖荧光类似物
        1.4.1 6-NBDG的开发
        1.4.2 2-NBDG的开发与应用
        1.4.3 近红外荧光葡萄糖类似物
        1.4.4 Cy3 标记的荧光葡萄糖类似物
    1.5 本论文研究的内容及意义
第二章 基于肿瘤细胞糖代谢异常检测肺癌患者胸腔积液中稀有恶性肿瘤细胞·
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 主要材料与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 可寻址微孔阵列芯片模板的制作
        2.2.4 可寻址微孔阵列芯片制做及表面修饰
        2.2.5 可寻址微孔阵列芯片表面修饰
        2.2.6 细胞系培养
        2.2.7 患者信息及样本收集
        2.2.8 胸腔积液中鉴定疑似肿瘤细胞
        2.2.9 外周血液中鉴定疑似肿瘤细胞
        2.2.10 单细胞显微操作及疑似肿瘤细胞测序
        2.2.11 免疫荧光检测胸腔积液中肿瘤细胞
    2.3 实验结果与讨论
        2.3.1 可寻址微孔阵列芯片模板的设计和制作
        2.3.2 微孔阵列芯片的细胞捕获效率
        2.3.3 2-NBDG用于高代谢活性肿瘤细胞的检测
        2.3.4 肺癌患者胸腔积液中检测高代谢活性肿瘤细胞
        2.3.5 肺癌患者胸腔积液中各类细胞的荧光强度分析
        2.3.6 显微操作取出高代谢活性疑似肿瘤细胞
        2.3.7 疑似肿瘤细胞的基因鉴定
        2.3.8 检测方法优于传统的细胞学检查
        2.3.9 高葡萄糖摄取肺癌细胞CK表达的异质性
        2.3.10 肺癌患者外周血样本中检测循环肿瘤细胞
    2.4 本章小结
第三章 总结与展望
    3.1 主要工作总结
    3.2 本工作的主要创新点
    3.3 展望
参考文献
致谢
攻读博士学位期间发表或录用的论文



本文编号：3352249