双香叶酰化信号在肿瘤细胞增殖和迁移中的作用机制研究

发布时间：2021-08-27 12:41

　　背景:双香叶酰化是细胞内一种重要的蛋白质修饰方式。多种细胞内信号分子需经双香叶酰化修饰后方能发挥其在细胞增殖、分化、迁移及存活等方面的生物学功能。双香叶酰化介导的蛋白质修饰过程已被证明在肿瘤的发生发展中起重要作用,但目前其促肿瘤作用的机理及信号途径仍不清楚。目的:本课题以胃癌以及三阴性乳腺癌为研究系统,着重探讨双香叶酰化信号对促癌蛋白YAP/TAZ的调控作用,确定双香叶酰化-YAP/TAZ信号通路对肿瘤生长、转移及浸润的促进效应,揭示双香叶酰化-YAP/TAZ信号通路激活肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭的内在机制。同时鉴定胃癌及三阴性乳腺癌诊断和治疗的新型分子靶标,为临床开发新的靶向治疗药物以及为肿瘤患者预后预测等提供理论依据。方法:1、用阿托伐他汀（Atorvastatin,简称AT）、双香叶酰基转移酶I抑制剂（GGTI-298）处理细胞以抑制细胞内双香叶酰化信号,同时加入香叶基香叶醇（GGOH）以恢复双香叶酰化信号。2、用慢病毒表达系统在三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞和胃癌AGS细胞中构建YAP1、TAZ、CYR61、E2F1等基因敲低的细胞株。3、对于不同处理组细胞与不同敲低细胞株... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

Hippo通路示意图[83]

双香叶酰化信号在肿瘤细胞增殖和迁移中的作用机制研究 括肺癌[133-138]、乳腺癌[119]、大肠癌[139]、肝癌[140]、胃癌[141]、胰腺癌[142]和神经胶质瘤[143]等。多种结果表明 YAP/TAZ 表达升高或核定位增强与肿瘤恶性程度（如组织学分级高、TNM 分期晚、淋巴结转移）呈正相关[133-136]，YAP/TAZ 基因表达量高或活性强的癌症患者，肿瘤转移率高，预后差[139,141]。

江苏大学博士学位论文15（6）逆转录PCR：检测不同药物处理组细胞或不同细胞株内相关基因表达差异。（7）实时荧光定量PCR：检测不同细胞株和不同处理组细胞之间相关基因的mRNA表达水平差异。（8）WesternBlotting：检测不同细胞株和不同处理组细胞之间蛋白水平差异。（9）免疫荧光：观察和检测不同细胞株与不同处理组细胞内相关基因表达及亚细胞定位情况。（10）活细胞染色：观察和检测不同细胞株以及不同处理组细胞内细胞核与有丝分裂状态。（11）免疫组化：检测胃贲门癌和癌旁组织CYR61的表达。（12）基因芯片：检测AT和GGOH处理后细胞内各基因的变化水平。1.4.3实验设计（1）验证双香叶酰化信号对YAP/TAZ通路的调控作用图1.5双香叶酰化信号对YAP/TAZ通路的调控作用

【参考文献】：
期刊论文
[1]非酒精性脂肪肝的患病率及与代谢综合征关系的研究[J]. 王凌,沈振海,徐勤,陆昀.  中国疗养医学. 2010(05)



本文编号：3366374