二烯丙基二硫通过产生硫化氢抑制胃癌及其初步机制探讨
发布时间：2021-08-27 15:26
目的:二烯丙基二硫（DADS）是大蒜中脂溶性物质的主要成分。研究发现DADS可以抑制多种肿瘤,并具有低毒性的优势,是一种极具开发潜力的抗肿瘤药物。本课题组前期研究证实了DADS能抑制人胃癌细胞的增殖,阻滞胃癌细胞于G2/M期,抑制胃癌细胞的EMT。硫化氢（H2S）是继NO和CO之后,人体内第三种重要的内源性气体信使分子。有研究证明,H2S对胃粘膜有保护作用并可以抑制癌症的生长。DADS是含硫化合物,可能作为H2S的供体。因此,我们探讨DADS是否通过产生H2S抑制胃癌细胞的生长并初步研究其机制。方法:本研究通过亚甲蓝法硫化氢检测试剂盒和荧光探针检测试剂盒检测各处理组人胃癌SGC-7901细胞中H2S含量情况;免疫荧光检测H2S生成关键酶CSE和CBS蛋白在细胞中的表达和定位;通过CCK8、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验、划痕实验、流式实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等方面对胃癌细胞的影响;加入CSE抑制剂PPG后,观察各处理组...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硫化氢试剂盒检测不同处理组SGC-7901细胞中H2S含量情况
22明了DADS能产生H2S，还提示H2S产生的量与DADS浓度有关。图3.2荧光探针检测不同处理组SGC-7901细胞中H2S含量情况（10X）3.3不同处理组细胞形态学对比使用DADS、NaHS分别处理人胃癌SGC-7901细胞，观察细胞形态变化。如图3.3所示，Control组、DADS组、NaHS组中细胞形态上具有一定的差异。Control
23组中细胞呈多边形或者梭形，边界清楚。DADS组和NaHS组中部分细胞形态由多边形变圆形或者椭圆形。其中DADS组细胞基本变圆，梭型细胞基本消失。结果提示NaHS对SGC7901细胞形态的影响与DADS类似。A:ControlB:DADSC:NaHS图3.3不同处理组SGC-7901细胞的形态学对比图（4X）3.4CSE、CBS在不同细胞系中的表达情况据文献报道，在胃癌细胞中，H2S主要由两种关键内源性酶产生：CSE、CBS，其中胃癌细胞中主要表达CSE。为观察CSE和CBS在胃粘膜上皮细胞和胃癌细胞中的表达情况，我们通过WesternBlot实验检测CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1细胞、人胃癌SGC-7901细胞与人胃癌MGC-803细胞中的表达。如图3.4和3.5所示，CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1细胞中的表达相比胃癌SGC-7901细胞与人胃癌MGC-803细胞高，而CSE、CBS蛋白在人胃癌SGC-7901细胞中的表达相较于人胃癌MGC-803细胞低。这表明胃癌的发生发展可能与内源性H2S生成酶CSE、CBS表达下降有关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大蒜的化学成分及生物活性影响因素研究进展[J]. 史守纪,章海风. 中国调味品. 2019(11)
[2]Therapeutic effects of garlic in cardiovascular atherosclerotic disease[J]. Igor A.Sobenin,Veronika A.Myasoedova,Maria I.Iltchuk,ZHANG Dong-Wei,Alexander N.Orekhov. Chinese Journal of Natural Medicines. 2019(10)
[3]Diallyl disulfide suppresses growth of HL-60 cell through increasing his-tone acetylation and p21WAF1expression in vivo and in vitro[J]. Jie ZHAO~(2,3)Wei-guo HUANG~2 Jie HE~2 Hui TAN~2 Qian-jin LIAO~2 Qi SU~(2,4)2 Cancer Research Institute,Nanhua University,Hengyang 421001,China;3 Department of Pathology,Mawangdui Hospital,Changsha 410016.China. Acta Pharmacologica Sinica. 2006(11)
[4]Diallyl disulfide-induced G2/M arrest of human gastric cancer MGC803 cells involves activation of p38 MAP kinase pathways[J]. Jing-Ping Yuan Gui-Hua Wang Yue-Hong Yang Department of Pathology,Central Hospital of Wuhan,Wuhan 430014,Hubei Province ChinaHui Ling Qi Su Ying Song Rong-Jun Tang Yao Liu Chen Huang,Institute of Oncology,Medical College,Nanhua University,Hengyang 421001,Hunan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(18)
本文编号：3366606
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硫化氢试剂盒检测不同处理组SGC-7901细胞中H2S含量情况
22明了DADS能产生H2S，还提示H2S产生的量与DADS浓度有关。图3.2荧光探针检测不同处理组SGC-7901细胞中H2S含量情况（10X）3.3不同处理组细胞形态学对比使用DADS、NaHS分别处理人胃癌SGC-7901细胞，观察细胞形态变化。如图3.3所示，Control组、DADS组、NaHS组中细胞形态上具有一定的差异。Control
23组中细胞呈多边形或者梭形，边界清楚。DADS组和NaHS组中部分细胞形态由多边形变圆形或者椭圆形。其中DADS组细胞基本变圆，梭型细胞基本消失。结果提示NaHS对SGC7901细胞形态的影响与DADS类似。A:ControlB:DADSC:NaHS图3.3不同处理组SGC-7901细胞的形态学对比图（4X）3.4CSE、CBS在不同细胞系中的表达情况据文献报道，在胃癌细胞中，H2S主要由两种关键内源性酶产生：CSE、CBS，其中胃癌细胞中主要表达CSE。为观察CSE和CBS在胃粘膜上皮细胞和胃癌细胞中的表达情况，我们通过WesternBlot实验检测CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1细胞、人胃癌SGC-7901细胞与人胃癌MGC-803细胞中的表达。如图3.4和3.5所示，CSE、CBS蛋白在胃黏膜GES-1细胞中的表达相比胃癌SGC-7901细胞与人胃癌MGC-803细胞高，而CSE、CBS蛋白在人胃癌SGC-7901细胞中的表达相较于人胃癌MGC-803细胞低。这表明胃癌的发生发展可能与内源性H2S生成酶CSE、CBS表达下降有关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大蒜的化学成分及生物活性影响因素研究进展[J]. 史守纪,章海风. 中国调味品. 2019(11)
[2]Therapeutic effects of garlic in cardiovascular atherosclerotic disease[J]. Igor A.Sobenin,Veronika A.Myasoedova,Maria I.Iltchuk,ZHANG Dong-Wei,Alexander N.Orekhov. Chinese Journal of Natural Medicines. 2019(10)
[3]Diallyl disulfide suppresses growth of HL-60 cell through increasing his-tone acetylation and p21WAF1expression in vivo and in vitro[J]. Jie ZHAO~(2,3)Wei-guo HUANG~2 Jie HE~2 Hui TAN~2 Qian-jin LIAO~2 Qi SU~(2,4)2 Cancer Research Institute,Nanhua University,Hengyang 421001,China;3 Department of Pathology,Mawangdui Hospital,Changsha 410016.China. Acta Pharmacologica Sinica. 2006(11)
[4]Diallyl disulfide-induced G2/M arrest of human gastric cancer MGC803 cells involves activation of p38 MAP kinase pathways[J]. Jing-Ping Yuan Gui-Hua Wang Yue-Hong Yang Department of Pathology,Central Hospital of Wuhan,Wuhan 430014,Hubei Province ChinaHui Ling Qi Su Ying Song Rong-Jun Tang Yao Liu Chen Huang,Institute of Oncology,Medical College,Nanhua University,Hengyang 421001,Hunan Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2004(18)
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