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LncRNA LOC100506123对胰腺癌细胞增殖及迁移的影响

发布时间:2021-08-30 19:21
  目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)LOC100506123对胰腺癌细胞增殖及迁移的影响。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测胰腺癌组织及细胞系(AsPC-1、BxPC-3、Panc-1、CFPAC-1,以正常胰腺导管上皮细胞HPDE为对照)中LOC100506123的表达情况。并通过siRNA技术下调LOC100506123表达,构建siRNA经Lipofectamine 2000TM脂质体转染细胞(对照组为siR-NC,实验组为siR-1、siR-2),采用CCK-8、Transwell小室实验分别检测胰腺癌细胞增殖和转移能力。结果 1LncRNA LOC100506123在胰腺癌组织及细胞系中表达显著升高(P<0.05)。2下调LOC100506123表达,胰腺癌细胞的增殖及迁移能力显著降低(P<0.05)。结论高表达的LncRNA LOC100506123能促进胰腺癌细胞的增殖及迁移。 

【文章来源】:第三军医大学学报. 2017,39(09)北大核心CSCD

【文章页数】:6 页

【图文】:

LncRNA LOC100506123对胰腺癌细胞增殖及迁移的影响


LOC100506123在胰腺癌组织及细胞系中的表达

形态图,转染,形态,干扰效率


LOC100506123在胰腺癌组织中的表达显著高于正常胰腺(P<0.05,图1A)。检测LOC100506123在细胞株的表达情况,结果表明:LOC100506123在胰腺癌细胞系AsPC-1、BxPC-3、Panc-1、CFPAC-1中的表达明显高于正常胰腺导管上皮细胞系HPDE(P<0.01)。其中尤以AsPC-1、CFPAC-1更为显著,分别是正常细胞的20、18.8倍(图1B)。2.2胰腺癌细胞对siRNA片段的有效摄取及干扰效率在胰腺癌AsPC-1细胞转染FAM-siRNA后,经24h培养换液后在荧光显微镜下观察显示:细胞状态良好,FAM-siRNA荧光强度高,且均匀分布在细胞内,转染效率约达90%(图2)。分别在24、48h收集转染siRNA(NC、siR-1、siR-2、siR-3)的胰腺癌细胞,提取细胞总RNA后采用qRT-PCR检测LncRNALOC100506123的干扰效率,结果显示,siR-1、siR-2干扰效率更为明显(图3)。A:在正常胰腺与胰腺癌组织中的表达a:P<0.01,与正常胰腺组织比较;B:在正常胰腺细胞与胰腺癌细胞中的表达b:P<0.01,与HPDE细胞比较图1LOC100506123在胰腺癌组织及细胞系中的表达A:白光;B:荧光图2转染FAM-siRNA后24h胰腺细胞形态(×100)842第三军医大学学报,2017,39(9)http://aammt.tmmu.edu.cn

转染,细胞迁移,细胞,细胞增殖


A:24h;B:48h图3转染siRNA后不同时间各组胰腺癌细胞LncRNALOC100506123的表达2.3干扰LOC100506123表达后对胰腺癌细胞增殖的影响在胰腺癌细胞系AsPC-1、CFPAC-1中下调LOC100506123表达后,采用CCK-8检测细胞的增殖情况。结果显示,AsPC-1、CFPAC-1的细胞增殖能力明显减弱(图4)。a:P<0.05,b:P<0.01,与NC组比较A:AsPC-1细胞;B:CFPAC-1细胞图4LOC100506123对AsPC-1和CFPAC-1细胞增殖的影响2.4干扰LOC100506123表达后对胰腺癌细胞迁移的影响在胰腺癌细胞系AsPC-1、CFPAC-1中下调LOC100506123表达后,采用Transwell检测细胞的迁移情况。结果显示,AsPC-1、CFPAC-1的细胞迁移能力明显减弱(图5)。图5LOC100506123对AsPC-1和CFPAC-1细胞迁移的影响(HE×200)http://aammt.tmmu.edu.cn第三军医大学学报,2017,39(9)843

【参考文献】:
期刊论文
[1]过表达长链非编码RNA H19促进miR-124-3p表达抑制肝癌细胞增殖[J]. 吕细林,黄刚,肖曼,刘孟刚,陈玥琦,张楠,张艳,何凤田.  第三军医大学学报. 2016(06)
[2]BRAF激活的长链非编码RNA在结直肠癌中的表达及功能[J]. 郭勤浩,赵岩,陈洁静,胡俊,汪舒伟,张冬生,孙跃明.  中华消化外科杂志. 2014 (05)



本文编号:3373359

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