MSC及其exosome在胃炎/癌微环境中的作用与机制研究
发布时间：2021-09-04 09:15
目的：本研究旨在探讨MSC在胃炎微环境中的特性,MSC如何重塑胃炎微环境,通过研究MSC与炎症微环境的相互作用理解MSC促非可控性炎症恶性转化的作用及与胃癌发生的关系；本研究还将揭晓MSC在胃癌微环境中的生物学功能及其参与重塑胃癌微环境的潜在机制；将为胃癌的预防和治疗提供理论基础和实验依据。方法：（1）清洁级雄性Wistar大鼠随机分为2组,对照组正常饮食饮水,模型组采用含N-甲基-N’-硝基-N’-亚硝基胍（N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG）的水溶液配合高盐饲料喂养。影像学核磁共振成像观察大鼠胃部结构变化情况,采集不同时间点的血标本和组织标本通过血清学Luminex液相芯片技术和组织学切片染色动态观察大鼠胃炎恶性转化的情况。分离正常胃组织的MSC （RGN-MSC）和炎症微环境下的胃组织MSC （RGI-MSC）,通过细胞诱导分化染色,流式分析表面标记,干细胞相关指标检测等实验鉴定两者的多向分化潜能和自我更新能力。（2）采用细胞生长曲线,平板克隆,细胞周期,transwell实验,Luminex液相芯片等技术比较RGN-MSC和RGI...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２横踏共振成像观察靑部结构??Ｆｉｇ?２．２?Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｓｔｒｕ幻ｕｒｅ?ｂｙ?ｕｓｉｎｇ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｒ巧ｏｎａｎｃｅ?ｉｍａｇｉｎｇ??
正常大鼠胃壁肥厚有弹性，胃内表面黏膜光滑呈浅红色，皱裳完整且排列整齐，不??见异常增生或结节。模型组大鼠的胃壁普遍缺乏弹性，胃熟膜呈灰黄或灰白色，黏膜层??变薄，皱髮变浅甚至消失（图２．４）。造模达６月时，胃内壁可见散在出血点或糜烂，表??面可有粘液性渗出物覆盖，可出现增生结节或溃瘍样改变。造模时间达９月时，可在胃??贵口部见菜花样隆起。造模达１２月时，不仅贵口部见菜花样肿块，胃体部或近幽口部有??结节样肿块形成，肿块组织颜色发白，质地较硬，活动性差。??ｌｉｌ?繼ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＭＮＮＧ－３?ＭＮＮＧ－６??ＭＮＮＧ－９?ＭＮＮＧ－１２??图２．４肉眼观察胃黏膜内表面??Ｆｉｇ?２．４?Ｍａｃｒｏｓｃｏｐｉｃ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏ打?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｉｎｎｅｒ?ｗａｌｌ??２．３．５组织学??如图２．５所示，正常大鼠胃ＨＥ染色可见胃粘膜完整；腺管和腺上皮分界清楚；腺??体密集分布，大小均一；腺体管腔形状规则；细胞形态一致，排列整齐。造模达３月的??大鼠胃ＨＥ染色显示黏膜浅层即黏膜层上１／３发生病变，呈化状或弥漫分布，表浅上皮??坏死脱落，熟膜层稍变薄，腺体未见明显异常，可诊断为浅表性胃炎。造模达６月时，??镜下发现腺体变小
（ＡＢｐＨ２．５）反应阳性，呈蓝色；中酸性混合的粘蛋白呈紫色。为进一步判断胃粘膜??肠化生的分型，我们对胃组织切片进行阿利新蓝一雪夫氏（ＡＢ－ＰＡＳ）染色后发现黏膜??腺体混合存在蓝色和紫色的细胞核，说明肠化生亚型为小肠型化生（图２．７）。??图２．７?ＡＢ－ＰＡＳ染色判断肠化生类型??Ｆｉｇ?２．７?Ｔｈｅ?ｔｙｐｅ?ｏｆ?ｉｒＵｅｓｔｉｎａｌ?ｍｅｔａｐｌａｓｉａ?ｓｈｏｗｅｄ?ｂｙ?ＡＢ－ＰＡＳ?ｓｔａｉｎｉｎｇ??注：左图放大倍率，＞＜１〇〇；右图放大倍率，＞＜２００；比例尺＝５０＾１１１。??２．３．６胃ＭＳＣ形态学??胃组织贴壁培养约１４天后，镜下观察可见单个或少量纺键形贴壁细胞集落样生长，??细胞集落可逐渐扩大、融合。Ｐ３代细胞大多呈长梭形，透亮饱满，有立体感，无颗粒。??当细胞达９０％融合时，细胞可呈旋祸状排列（图２．８）。??国瞧??ＲＧＮ－ＭＳＣ?民?ＧＩ－ＭＳＣ??图２．８?ＲＧＮ－ＭＳＣ与ＲＸＨ－ＭＳＣ的形态观寨??Ｆｉｇ?２．８?孔ｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ＲＧＮ－ＭＳＣ?ａｎｄ?民ＧＩ－ＭＳＣ??注：放大倍率，Ｘ?１００；比例尺＝５０｜ｉｍ。??２．３．７染色体分析??Ｗｉｓｔａｒ系大鼠细胞染色体数目２ｎ＝４２，其中１对性染色体，２０对常染色体（图２．９）。??根据Ｈｕｎｇｅｒｇｏｒｄ的大鼠染色体分类标准，将大鼠染色体分组、编号。Ａ组包括１￣３号，??其中１号体积最大
【参考文献】：
期刊论文
[1]2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,曾红梅,邹小农,张思维,赫捷. 中国肿瘤. 2015(01)
[2]中国慢性胃炎共识意见（2012年,上海）[J]. 房静远,刘文忠,李兆申,杜亦奇,纪小龙,戈之铮,李延青,姒健敏,吕农华,吴开春,陈萦,萧树东. 中国医学前沿杂志(电子版). 2013(07)
[3]非可控性炎症和肿瘤细胞上皮间质转化关系的研究进展[J]. 倪建波,郭传勇,王兴鹏. 中华肿瘤防治杂志. 2011(17)
[4]高盐饲料配合甲基硝基亚硝基胍诱发大鼠胃癌[J]. 朱晓东,林庚金,许祖德,陈忠清. 上海实验动物科学. 2003(02)
硕士论文
[1]慢性胃炎内镜和病理诊断的临床分析[D]. 隋晓艳.大连医科大学 2012
本文编号：3382995
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２横踏共振成像观察靑部结构??Ｆｉｇ?２．２?Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｓｔｒｕ幻ｕｒｅ?ｂｙ?ｕｓｉｎｇ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｒ巧ｏｎａｎｃｅ?ｉｍａｇｉｎｇ??
正常大鼠胃壁肥厚有弹性，胃内表面黏膜光滑呈浅红色，皱裳完整且排列整齐，不??见异常增生或结节。模型组大鼠的胃壁普遍缺乏弹性，胃熟膜呈灰黄或灰白色，黏膜层??变薄，皱髮变浅甚至消失（图２．４）。造模达６月时，胃内壁可见散在出血点或糜烂，表??面可有粘液性渗出物覆盖，可出现增生结节或溃瘍样改变。造模时间达９月时，可在胃??贵口部见菜花样隆起。造模达１２月时，不仅贵口部见菜花样肿块，胃体部或近幽口部有??结节样肿块形成，肿块组织颜色发白，质地较硬，活动性差。??ｌｉｌ?繼ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＭＮＮＧ－３?ＭＮＮＧ－６??ＭＮＮＧ－９?ＭＮＮＧ－１２??图２．４肉眼观察胃黏膜内表面??Ｆｉｇ?２．４?Ｍａｃｒｏｓｃｏｐｉｃ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏ打?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｉｎｎｅｒ?ｗａｌｌ??２．３．５组织学??如图２．５所示，正常大鼠胃ＨＥ染色可见胃粘膜完整；腺管和腺上皮分界清楚；腺??体密集分布，大小均一；腺体管腔形状规则；细胞形态一致，排列整齐。造模达３月的??大鼠胃ＨＥ染色显示黏膜浅层即黏膜层上１／３发生病变，呈化状或弥漫分布，表浅上皮??坏死脱落，熟膜层稍变薄，腺体未见明显异常，可诊断为浅表性胃炎。造模达６月时，??镜下发现腺体变小
（ＡＢｐＨ２．５）反应阳性，呈蓝色；中酸性混合的粘蛋白呈紫色。为进一步判断胃粘膜??肠化生的分型，我们对胃组织切片进行阿利新蓝一雪夫氏（ＡＢ－ＰＡＳ）染色后发现黏膜??腺体混合存在蓝色和紫色的细胞核，说明肠化生亚型为小肠型化生（图２．７）。??图２．７?ＡＢ－ＰＡＳ染色判断肠化生类型??Ｆｉｇ?２．７?Ｔｈｅ?ｔｙｐｅ?ｏｆ?ｉｒＵｅｓｔｉｎａｌ?ｍｅｔａｐｌａｓｉａ?ｓｈｏｗｅｄ?ｂｙ?ＡＢ－ＰＡＳ?ｓｔａｉｎｉｎｇ??注：左图放大倍率，＞＜１〇〇；右图放大倍率，＞＜２００；比例尺＝５０＾１１１。??２．３．６胃ＭＳＣ形态学??胃组织贴壁培养约１４天后，镜下观察可见单个或少量纺键形贴壁细胞集落样生长，??细胞集落可逐渐扩大、融合。Ｐ３代细胞大多呈长梭形，透亮饱满，有立体感，无颗粒。??当细胞达９０％融合时，细胞可呈旋祸状排列（图２．８）。??国瞧??ＲＧＮ－ＭＳＣ?民?ＧＩ－ＭＳＣ??图２．８?ＲＧＮ－ＭＳＣ与ＲＸＨ－ＭＳＣ的形态观寨??Ｆｉｇ?２．８?孔ｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ＲＧＮ－ＭＳＣ?ａｎｄ?民ＧＩ－ＭＳＣ??注：放大倍率，Ｘ?１００；比例尺＝５０｜ｉｍ。??２．３．７染色体分析??Ｗｉｓｔａｒ系大鼠细胞染色体数目２ｎ＝４２，其中１对性染色体，２０对常染色体（图２．９）。??根据Ｈｕｎｇｅｒｇｏｒｄ的大鼠染色体分类标准，将大鼠染色体分组、编号。Ａ组包括１￣３号，??其中１号体积最大
【参考文献】：
期刊论文
[1]2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,曾红梅,邹小农,张思维,赫捷. 中国肿瘤. 2015(01)
[2]中国慢性胃炎共识意见（2012年,上海）[J]. 房静远,刘文忠,李兆申,杜亦奇,纪小龙,戈之铮,李延青,姒健敏,吕农华,吴开春,陈萦,萧树东. 中国医学前沿杂志(电子版). 2013(07)
[3]非可控性炎症和肿瘤细胞上皮间质转化关系的研究进展[J]. 倪建波,郭传勇,王兴鹏. 中华肿瘤防治杂志. 2011(17)
[4]高盐饲料配合甲基硝基亚硝基胍诱发大鼠胃癌[J]. 朱晓东,林庚金,许祖德,陈忠清. 上海实验动物科学. 2003(02)
硕士论文
[1]慢性胃炎内镜和病理诊断的临床分析[D]. 隋晓艳.大连医科大学 2012
本文编号：3382995
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