全反式视黄酸通过下调LncRNA HOXA10异常表达抑制胃癌前病变的恶性转化的研究
发布时间：2021-09-05 02:22
目的本研究检测了胃癌前病变患者血清外泌体中长链非编码RNA（Long noncoding RNA,Lnc RNA）的特异性表达,研究胃癌前病变患者血清外泌体对GES-1细胞活性的作用;使用全反式视黄酸（All trans retinoic acid,ATRA）进行干预,观察ATRA对GES-1细胞活性的调节作用。同时构建胃癌前病变的大鼠模型,造模成功后使用ATRA进行持续干预,通过观察大鼠血清外泌体及胃组织中Lnc RNA HOXA10的表达,结合病理表现探讨ATRA通过下调Lnc RNA HOXA10的表达来实现抑制胃癌前病变状态恶性转化的作用。方法提取胃癌前病变患者及正常对照人群血清中的外泌体,根据课题组前期测序结果,采用q RT-PCR检测差异表达的Lnc RNA;将胃癌前病变患者血清外泌体与GES-1细胞在无外泌体血清培养基中共培养作为实验组,在培养基中加入5μM ATRA作为实验干预组,其中外泌体及视黄酸浓度为0为空白对照组,仅在培养基中加入5μM ATRA作为干预对照组,观察各组细胞增殖、凋亡及周期的变化,检测各组细胞中Lnc RNA HOXA10的表达;购买3周龄的雌性W...
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物模型建立及相关干预示意图
安徽医科大学硕士学位论文273.9分析实验数据每个实验重复至少三次，使用SPSS23.0进行数据分析。所有数值均表示为平均值±SEM。Studentt检验用于两组间的比较，ANOVA用于两组以上的实验。P<0.05为具有统计学意义。4结果4.1外泌体的鉴定外泌体试剂盒提取外泌体后，在透射电子显微镜(TEM)下验证外泌体的形态(图2)。图2透射电镜下血清中外泌体形态鉴定。Figure2Morphologicalidentificationofexosomesinserumundertransmissionelectronmicroscope.4.2外泌体中差异LncRNA的特异性表达荧光定量PCR的结果如图3所示，在胃癌前病变患者血清外泌体提取的总RNA中检测前期课题组发现的11条差异表达LncRNA后发现，探针名为P33715的LncRNA表达差异最为明显，此LncRNA为LncRNAHOXA10。
安徽医科大学硕士学位论文28图3胃癌前病变患者(n=20)与健康对照组(n=10)差异性表达的LncRNA在血清外泌体中的检测。**,P<0.01Figure3DetectionofdifferentiallyexpressedlncRNAsinserumexosomesbetweenpatientswithgastricprecancerouslesions(n=20)andhealthycontrols(n=10).*,P<0.014.3LncRNA序列的验证由于LncRNA的实际序列通常与其预测序列不同，我们通过cDNA末端快速扩增(RACE)，得到了5’端及3’端的序列并与LncRNAHOXA10全长序列对比，结果如图所示。LncRNAHOXA10的全长转录本是1785nt。序列全长检索自GenBank(NR_037939.2)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体对上皮-间质转化调控作用的研究进展[J]. 全景羽,卢子滨,余林中,范春林,曹惠慧,刘俊珊. 南方医科大学学报. 2019(03)
[2]亚硝胺及前体化合物的致癌效应及其食用安全性研究进展[J]. 徐淼,张倩男,杨辉,张立实,贾旭东. 癌变·畸变·突变. 2018(01)
[3]草河车治疗不同阶段胃癌病变的实验动物研究[J]. 施建平,金怒云,邬梅花,李玉琴,王凯,辜新奇. 氨基酸和生物资源. 2016(02)
[4]Expression of p-STAT3 and vascular endothelial growth factor in MNNG-induced precancerous lesions and gastric tumors in rats[J]. Xiao-Yan Wang,Lou-Lei Wang,Xuan Zheng,Li-Na Meng,Bin Lyu,Hai-Feng Jin. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(03)
[5]Historical review of the causes of cancer[J]. Clarke Brian Blackadar. World Journal of Clinical Oncology. 2016(01)
[6]肿瘤衍生外泌体传递的微RNA在肿瘤进展中作用的研究进展[J]. 张干,刘彦龙,杨艳梅,孙梓程,崔滨滨. 肿瘤. 2014(12)
[7]坐珠达西对MNNG致大鼠慢性萎缩性胃炎的作用[J]. 宋春红,王海苹,宫明华,薛玲. 中国实验方剂学杂志. 2014(20)
[8]肿瘤细胞来源的外泌体与恶性肿瘤的进展及化疗[J]. 刘长红,武明花,李桂源. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(06)
[9]Simple animal model of Helicobacter pylori infection[J]. Duangporn Werawatganon. World Journal of Gastroenterology. 2014(21)
[10]复方隔山消颗粒对慢性萎缩性胃炎模型大鼠白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的影响[J]. 罗兴菊,李文胜,陈骏,郭莲军. 现代中西医结合杂志. 2013(11)
博士论文
[1]参七消痞颗粒对MNNG负荷多因素致大鼠慢性萎缩性胃炎的干预作用及机制探讨[D]. 李俊青.北京中医药大学 2013
本文编号：3384480
【文章来源】：安徽医科大学安徽省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
动物模型建立及相关干预示意图
安徽医科大学硕士学位论文273.9分析实验数据每个实验重复至少三次，使用SPSS23.0进行数据分析。所有数值均表示为平均值±SEM。Studentt检验用于两组间的比较，ANOVA用于两组以上的实验。P<0.05为具有统计学意义。4结果4.1外泌体的鉴定外泌体试剂盒提取外泌体后，在透射电子显微镜(TEM)下验证外泌体的形态(图2)。图2透射电镜下血清中外泌体形态鉴定。Figure2Morphologicalidentificationofexosomesinserumundertransmissionelectronmicroscope.4.2外泌体中差异LncRNA的特异性表达荧光定量PCR的结果如图3所示，在胃癌前病变患者血清外泌体提取的总RNA中检测前期课题组发现的11条差异表达LncRNA后发现，探针名为P33715的LncRNA表达差异最为明显，此LncRNA为LncRNAHOXA10。
安徽医科大学硕士学位论文28图3胃癌前病变患者(n=20)与健康对照组(n=10)差异性表达的LncRNA在血清外泌体中的检测。**,P<0.01Figure3DetectionofdifferentiallyexpressedlncRNAsinserumexosomesbetweenpatientswithgastricprecancerouslesions(n=20)andhealthycontrols(n=10).*,P<0.014.3LncRNA序列的验证由于LncRNA的实际序列通常与其预测序列不同，我们通过cDNA末端快速扩增(RACE)，得到了5’端及3’端的序列并与LncRNAHOXA10全长序列对比，结果如图所示。LncRNAHOXA10的全长转录本是1785nt。序列全长检索自GenBank(NR_037939.2)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]外泌体对上皮-间质转化调控作用的研究进展[J]. 全景羽,卢子滨,余林中,范春林,曹惠慧,刘俊珊. 南方医科大学学报. 2019(03)
[2]亚硝胺及前体化合物的致癌效应及其食用安全性研究进展[J]. 徐淼,张倩男,杨辉,张立实,贾旭东. 癌变·畸变·突变. 2018(01)
[3]草河车治疗不同阶段胃癌病变的实验动物研究[J]. 施建平,金怒云,邬梅花,李玉琴,王凯,辜新奇. 氨基酸和生物资源. 2016(02)
[4]Expression of p-STAT3 and vascular endothelial growth factor in MNNG-induced precancerous lesions and gastric tumors in rats[J]. Xiao-Yan Wang,Lou-Lei Wang,Xuan Zheng,Li-Na Meng,Bin Lyu,Hai-Feng Jin. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(03)
[5]Historical review of the causes of cancer[J]. Clarke Brian Blackadar. World Journal of Clinical Oncology. 2016(01)
[6]肿瘤衍生外泌体传递的微RNA在肿瘤进展中作用的研究进展[J]. 张干,刘彦龙,杨艳梅,孙梓程,崔滨滨. 肿瘤. 2014(12)
[7]坐珠达西对MNNG致大鼠慢性萎缩性胃炎的作用[J]. 宋春红,王海苹,宫明华,薛玲. 中国实验方剂学杂志. 2014(20)
[8]肿瘤细胞来源的外泌体与恶性肿瘤的进展及化疗[J]. 刘长红,武明花,李桂源. 中国生物化学与分子生物学报. 2014(06)
[9]Simple animal model of Helicobacter pylori infection[J]. Duangporn Werawatganon. World Journal of Gastroenterology. 2014(21)
[10]复方隔山消颗粒对慢性萎缩性胃炎模型大鼠白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的影响[J]. 罗兴菊,李文胜,陈骏,郭莲军. 现代中西医结合杂志. 2013(11)
博士论文
[1]参七消痞颗粒对MNNG负荷多因素致大鼠慢性萎缩性胃炎的干预作用及机制探讨[D]. 李俊青.北京中医药大学 2013
本文编号：3384480
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