CCT3在甲状腺乳头状癌中的表达及对癌细胞增殖的影响
发布时间：2021-09-17 07:04
背景甲状腺癌（Thyroid cancer）是临床上最常见的内分泌恶性肿瘤,包括分化良好的甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer,PTC）,占甲状腺癌发病率的80%～90%。疑似甲状腺结节的患者通常通过超声,计算机断层扫描（CT）等进行检查,随后经术前超声引导细针穿刺细胞学检查（fine needle aspiration cytology,FNAC）和术中病理检查冷冻切片检查诊断甲状腺乳头状癌患者。FNAC是目前术前最可靠的临床诊断方法,但是有约20%左右的甲状腺病理组织经FNAC诊断为未确定意义的非典型性的滤泡性病变、滤泡性肿瘤或疑似滤泡性肿瘤、或疑似的恶性肿瘤。无法进行术前的准确诊断造成了非要手术的增加,研究发现,5%的病人经手术切除组织后,诊断发现仍然需要进行二次甲状腺全切手术,而且两次手术的复发发病率明显高于FNA检出后的一次手术的发病率。利用分子标记物辅助诊断能够提高肿瘤的检出,CCT3是参与细胞的蛋白质结构的折叠,调控肿瘤细胞的增殖和发展,在肝癌、肺癌等癌症的临床诊断和预后检查中具有重要的实用价值和参考意义。甲状腺乳头状癌的治疗方法主要为甲状腺全...
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：90 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．甲状腺乳头状癌组织的ＨＥ染色结果
在本研宄的甲状腺乳头状癌组织样本中表达高，而在癌旁组织表达相对很低（图??２Ａ－Ｂ）。其中，ＣＣＴ３主要在甲状腺乳头状癌组织的细胞核位置表达，胞浆也有??表达，相对较少（图２Ａ－Ｂ）。这一结果表明，ＣＣＴ３在甲状腺乳头状癌组织中表??达丰度高，提示我们ＣＣＴ３与甲状腺乳头状癌发生发展具有重要关联。??为了进一步研宄ＣＣＴ３表达与甲状腺乳头状癌的关系，本研究定量分析了??ＣＣＴ３在甲状腺乳头状癌组织中的表达强度和阳性率（具有ＣＣＴ３表达的细胞占??全部细胞的比例）。即将免疫俎化的结果按照颜色深度不同评定为４个等级并计??分，颜色最淡的记为０分；颜色最深的记为３分，统计结果如表１所示；同时，??对多个视野下表达ＣＣＴ３的细胞进行计数，统计其占视野中总细胞数目的比例，??即丰度（或称阳性率）；同样将丰度分为４个等级并计分，统计结果如表２所示。??我们将表达强度和阳性率打分结果的乘积作为ＣＣＴ３在肿瘤组织中表达情况的??暈化指标，比较病人甲状腺乳头状癌组织和癌旁对照组织之间ＣＣＴ３表达差异。??结果如图２Ｃ所示，所有甲状腺乳头状癌组织样本均存在ＣＣＴ３表达，而癌旁组??织中ＣＣＴ３表达量极低
长期稳定表达ｓｈＲＮＡ。感染阴性对照（ｓｈＣＴＲＬ）慢病毒作为本研宄的阴性??对照。通过荧光显微镜观察感染ｓｈＲＮＡ慢病毒７２小时后Ｋ丨细胞表达绿色荧光??蛋白（ＧＦＰ）的荧光强度来评价感染效果，结果如图４Ａ－Ｂ所示，视野下＞９０％的??细胞成功感染了携带ｓｈＣＣＴ３或ｓｈＣＴＲＬ的慢病毒，并成功表达载体序列和蛋白。??为了对ＲＮＡ干扰ＣＣＴ３表达的效果进行定量，我们采用ｑＰＣＲ检测ＣＣＴ３??的ｍＲＮＡ的表达水平并且用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测ＣＣＴ３的蛋白表达水平。实时定量??ＰＣＲ结果显示，与阴性对照ｓｈＣＴＲＬ组相比，ｓｈＣＣＴ３组ＣＣＴ３的ｍＲＮＡ表达量??约为ｓｈＣＴＲＬ组的丨０％左右（图４Ｃ）。同时，Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ结果显示，ｓｈＣＣＴ３??组的细胞中的ＣＣＴ３蛋白表达水平显著低于ｓｈＣＴＲＬ组的ＣＣＴ３的蛋白的表达水??平（图４Ｄ）。??以上这些结果表明，我们成功建立了利用慢病毒ＲＮＡｉ沉默甲状腺乳头状癌??细胞系Ｋ１细胞中ＣＣＴ３的表达的方法，获得了有效沉默ＣＣＴ３的Ｋ１细胞，将??该细胞作为研究沉默ＣＣＴ３对甲状腺乳头状癌细胞影响的工具。??３１??
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状腺乳头状癌B-raf基因突变及Caveolin-1和COX-2蛋白表达的临床意义[J]. 张杰东,朱传东,刘杜先,刘兰侠,方媛. 临床与病理杂志. 2018(07)
[2]甲状腺微小乳头状癌的超声诊断价值与准确性分析[J]. 杜长云. 临床研究. 2018(05)
[3]甲状腺乳头状癌远处转移16例临床病理特征分析[J]. 丁美琳,蔡奕锋,李晨,陈巧超,李杰,苏磊. 中华普通外科学文献(电子版). 2018(02)
[4]甲状腺乳头状癌相关基因的研究进展[J]. 赵竞,刘生. 岭南现代临床外科. 2016(06)
[5]侵犯喉气管或/和下咽颈段食管的甲状腺癌的外科治疗[J]. 张亮,刘业海,吴开乐,赵益,张燕影,王大明,周涛. 中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志. 2016(05)
[6]CART细胞在血液系统恶性肿瘤疾病中的临床转化研究[J]. 韩为东,魏建树,罗灿. 临床血液学杂志. 2016(04)
[7]RET/PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达[J]. 潘瑞蓉,张海鸣,王济芳,龙卫国,钱唯韵,袁国跃,王宏星. 广东医学. 2016(04)
[8]Overexpression of chaperonin containing TCP1, subunit 3 predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. Xiao Cui,Zhi-Ping Hu,Zhao Li,Peng-Ji Gao,Ji-Ye Zhu. World Journal of Gastroenterology. 2015(28)
[9]Guide for diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Magdy Hamed Attwa,Shahira Aly El-Etreby. World Journal of Hepatology. 2015(12)
[10]天津城市居民甲状腺乳头状癌发病率和构成比的长期时间趋势分析[J]. 钱碧云,何敏,陈可欣,高明. 中国实用外科杂志. 2011(05)
博士论文
[1]CCT3基因调控胃癌细胞增殖及机制研究[D]. 李莉娟.兰州大学 2017
本文编号：3398207
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：90 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．甲状腺乳头状癌组织的ＨＥ染色结果
在本研宄的甲状腺乳头状癌组织样本中表达高，而在癌旁组织表达相对很低（图??２Ａ－Ｂ）。其中，ＣＣＴ３主要在甲状腺乳头状癌组织的细胞核位置表达，胞浆也有??表达，相对较少（图２Ａ－Ｂ）。这一结果表明，ＣＣＴ３在甲状腺乳头状癌组织中表??达丰度高，提示我们ＣＣＴ３与甲状腺乳头状癌发生发展具有重要关联。??为了进一步研宄ＣＣＴ３表达与甲状腺乳头状癌的关系，本研究定量分析了??ＣＣＴ３在甲状腺乳头状癌组织中的表达强度和阳性率（具有ＣＣＴ３表达的细胞占??全部细胞的比例）。即将免疫俎化的结果按照颜色深度不同评定为４个等级并计??分，颜色最淡的记为０分；颜色最深的记为３分，统计结果如表１所示；同时，??对多个视野下表达ＣＣＴ３的细胞进行计数，统计其占视野中总细胞数目的比例，??即丰度（或称阳性率）；同样将丰度分为４个等级并计分，统计结果如表２所示。??我们将表达强度和阳性率打分结果的乘积作为ＣＣＴ３在肿瘤组织中表达情况的??暈化指标，比较病人甲状腺乳头状癌组织和癌旁对照组织之间ＣＣＴ３表达差异。??结果如图２Ｃ所示，所有甲状腺乳头状癌组织样本均存在ＣＣＴ３表达，而癌旁组??织中ＣＣＴ３表达量极低
长期稳定表达ｓｈＲＮＡ。感染阴性对照（ｓｈＣＴＲＬ）慢病毒作为本研宄的阴性??对照。通过荧光显微镜观察感染ｓｈＲＮＡ慢病毒７２小时后Ｋ丨细胞表达绿色荧光??蛋白（ＧＦＰ）的荧光强度来评价感染效果，结果如图４Ａ－Ｂ所示，视野下＞９０％的??细胞成功感染了携带ｓｈＣＣＴ３或ｓｈＣＴＲＬ的慢病毒，并成功表达载体序列和蛋白。??为了对ＲＮＡ干扰ＣＣＴ３表达的效果进行定量，我们采用ｑＰＣＲ检测ＣＣＴ３??的ｍＲＮＡ的表达水平并且用Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测ＣＣＴ３的蛋白表达水平。实时定量??ＰＣＲ结果显示，与阴性对照ｓｈＣＴＲＬ组相比，ｓｈＣＣＴ３组ＣＣＴ３的ｍＲＮＡ表达量??约为ｓｈＣＴＲＬ组的丨０％左右（图４Ｃ）。同时，Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ结果显示，ｓｈＣＣＴ３??组的细胞中的ＣＣＴ３蛋白表达水平显著低于ｓｈＣＴＲＬ组的ＣＣＴ３的蛋白的表达水??平（图４Ｄ）。??以上这些结果表明，我们成功建立了利用慢病毒ＲＮＡｉ沉默甲状腺乳头状癌??细胞系Ｋ１细胞中ＣＣＴ３的表达的方法，获得了有效沉默ＣＣＴ３的Ｋ１细胞，将??该细胞作为研究沉默ＣＣＴ３对甲状腺乳头状癌细胞影响的工具。??３１??
【参考文献】：
期刊论文
[1]甲状腺乳头状癌B-raf基因突变及Caveolin-1和COX-2蛋白表达的临床意义[J]. 张杰东,朱传东,刘杜先,刘兰侠,方媛. 临床与病理杂志. 2018(07)
[2]甲状腺微小乳头状癌的超声诊断价值与准确性分析[J]. 杜长云. 临床研究. 2018(05)
[3]甲状腺乳头状癌远处转移16例临床病理特征分析[J]. 丁美琳,蔡奕锋,李晨,陈巧超,李杰,苏磊. 中华普通外科学文献(电子版). 2018(02)
[4]甲状腺乳头状癌相关基因的研究进展[J]. 赵竞,刘生. 岭南现代临床外科. 2016(06)
[5]侵犯喉气管或/和下咽颈段食管的甲状腺癌的外科治疗[J]. 张亮,刘业海,吴开乐,赵益,张燕影,王大明,周涛. 中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志. 2016(05)
[6]CART细胞在血液系统恶性肿瘤疾病中的临床转化研究[J]. 韩为东,魏建树,罗灿. 临床血液学杂志. 2016(04)
[7]RET/PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达[J]. 潘瑞蓉,张海鸣,王济芳,龙卫国,钱唯韵,袁国跃,王宏星. 广东医学. 2016(04)
[8]Overexpression of chaperonin containing TCP1, subunit 3 predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. Xiao Cui,Zhi-Ping Hu,Zhao Li,Peng-Ji Gao,Ji-Ye Zhu. World Journal of Gastroenterology. 2015(28)
[9]Guide for diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma[J]. Magdy Hamed Attwa,Shahira Aly El-Etreby. World Journal of Hepatology. 2015(12)
[10]天津城市居民甲状腺乳头状癌发病率和构成比的长期时间趋势分析[J]. 钱碧云,何敏,陈可欣,高明. 中国实用外科杂志. 2011(05)
博士论文
[1]CCT3基因调控胃癌细胞增殖及机制研究[D]. 李莉娟.兰州大学 2017
本文编号：3398207
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