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CDK3/KLF4在肺癌侵袭转移中的作用及机制研究

发布时间:2021-09-28 09:15
  目的:细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶3(CDK3)在肺癌侵袭转移的作用目前还不明确。我们实验室前期的研究发现CDK3能磷酸化转录因子krüppel-like factor 4(KLF4)的丝氨酸244(Ser244)位点。本课题的目的是研究CDK3/KLF4在肺癌侵袭转移的作用及机制。方法:(1)Western Blot检测CDK3和KLF4在肺癌细胞系的表达;(2)TCGA数据库、肺癌组织芯片、肺癌病人临床样本中CDK3和KLF4表达水平的检测以及分析;(3)构建CDK3过表达和敲低的肺癌细胞稳转株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay实验研究其对肺癌细胞侵袭转移能力的影响;(4)构建KLF4以及其Ser244位点突变的质粒KLF4-S244A的过表达肺癌细胞稳转株,Transwell migration assay和Transwell invasion assay实验研究其对肺癌细胞侵袭转移能力的影响,探索CDK3磷酸化KLF4的Ser244位点对KLF4的功能产生的影响;(5)动物实验构建肺癌转移模型研究CDK3、KLF... 

【文章来源】:深圳大学广东省

【文章页数】:104 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

CDK3/KLF4在肺癌侵袭转移中的作用及机制研究


qPCR检测肺癌细胞系中CDK3的mRNA表达水平以BEAS-2B细胞的2-ΔΔCt为标准值,分别用各组的2-ΔΔCt除该值,算出相对值后作图

内参,细胞的,蛋白,肺癌组织


图 2 Western blot 检测肺癌细胞系中 CDK3 的蛋白表达水平3 在肺癌细胞株及 BEAS-2B 对照细胞的蛋白表达水平,以 β-actin 蛋白作为内参DK3 条带的灰度值,除以内参 β-actin 的灰度值算出相对灰度值,再以 BEAS-2B对灰度值作为标准值,分别用各组的相对灰度值除以该值,算出值后作图。CGA 数据库肺癌病人临床样本中 CDK3 的表达水平 TCGA 数据库中肺癌病人的临床信息和组织样本中各个基因在 mRN汇总结果,对照临床信息找出同时有肺癌组织样本中 CDK3 表达结果 CDK3 表达结果的患者的数据,统计并加以分析,结果如图 3 所示:同时有肺癌组织样本中 CDK3 表达结果和癌旁组织样本,CDK3 表达,相较于癌旁组织而言,CDK3 在肺癌组织中的表达量更高。CDK3 组织中表达量的不同提示 CDK3 可能在肺癌的发生发展中发挥了一定

肺癌组织,样本,数据库,表达水平


3 TCGA 数据库中在肺癌病人临床样本中 CDK3 的 mRNA 表达水本 100 例,与之匹配的肺癌组织样本 100 例。P<0.05 为有统计学差显著统计学差异,P<0.001 为有极其显著的统计学差异。织芯片中 CDK3 表达水平的检测的肺癌组织芯片,其上包括 110 例肺癌组织样本和 10 例癌染色后,分析结果并进行打分。对打分结果进行统计分析, CDK3 在肺癌组织中的表达高于在癌旁组织中的表达,和上析结果相吻合。图5显示当肺癌具体分类为腺癌和鳞状细胞织而言,CDK3 的表达水平也是上调。


本文编号:3411635

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