TIM-3配体galectin-9诱导NK/T细胞淋巴瘤凋亡作用的初步研究
发布时间：2021-10-10 14:09
目的:NK/T细胞淋巴瘤（NK/TCL）是一种高度侵袭性血液系统恶性肿瘤,在中国人群中相对高发。现有治疗方案下,仍有部分NK/TCL患者治疗反应不佳,迫切需要新的治疗手段。新近发现阻断免疫检查点的治疗如PD-1抗体对NKT/CL有显著活性,提示免疫治疗可能是一个重要的发展方向。本研究观察另一免疫检查点分子TIM3在NK/TCL的表达,及其配体对NK/TCL的生物学效应。方法:Western-blot测定NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人外周血NK细胞中TIM-3的表达;采用不同浓度重组人galectin-9（rhGAL-9）作用于NK/TCL细胞株24h后,通过CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡;Western-blot检测caspase-3、PARP及其剪接体和MAPK信号通路蛋白磷酸化表达水平变化。结果:NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8的TIM-3表达较健康人外周血NK细胞显著增高,分别是健康人外周血NK细胞的3.13±0.04、2.77±0.64和3.3±1.04倍;CCK-8检测结果显示,...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TIM-3在NK/TCL中的表达Fig1ExpressionofTIM-3inNK/TCLcelllinesA.Western-blot检测三株细胞中TIM-3蛋白的表达情况；B.根据Western-blot条带灰度值计算的相对表达量
上海交通大学医学硕士学位论文三株细胞存活率均下降，分别为（49.80±7.91）%、（74.09±9.±4.64）%。当 rhGAL-9 浓度提高至 5.0 μg/mL 时，三株细胞存活25.70±5.70）%、（31.33±9.22）%和（19.24±4.96）%。上述结果提示制 NK/TCL 细胞株细胞活力，并具有浓度依赖性。其中 2.5 μg 组与对照组相比，差异具有统计学显著性。
图 3.1 不同浓度 rhGal-9 处理 NK/TCL24h 后细胞凋亡率Fig 3.1 apoptotic rate of NK/TCL cell lines treatedwith rhGAL-9 at various concentrations for 24hA. 流式细胞术检测 NK/TCL 凋亡情况；B.与对照组比较 NK/TCL 凋亡比例注：Control：对照组，* P＜0.05，和对照组比较；*** P＜0.001，和对照组比较；# P＜0.05，和 1.0 μg/mL 组比较；### P＜0.001，和 1.0 μg/mL 组比较。3.2 Western Blot 法检测凋亡相关蛋白表达不同浓度 rhGal-9 处理三种细胞株后，采用 Western-blot 检测 caspase-3 和PARP 等凋亡相关蛋白变化情况（图 4），结果显示，caspase-3 和 PARP 剪切蛋白（cleaved-caspase-3 和 cleaved-PARP）表达水平随 rhGAL-9 剂量增加而升高，，当rhGal-9 浓度为 1.0 μg/mL 时，SNK-1、SNK-6 和 SNT-8 三株细胞 cleaved-caspase-3 表达量分别是对照组（Con）的 2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38 倍cleaved-PARP 表达量分别是对照组的 3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77 倍，当 rhGal-
【参考文献】：
期刊论文
[1]The role of T-cell immunoglobulin mucin-3 and its ligand galectin-9 in antitumor immunity and cancer immunotherapy[J]. Riyao Yang,Mien-Chie Hung. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
本文编号：3428528
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TIM-3在NK/TCL中的表达Fig1ExpressionofTIM-3inNK/TCLcelllinesA.Western-blot检测三株细胞中TIM-3蛋白的表达情况；B.根据Western-blot条带灰度值计算的相对表达量
上海交通大学医学硕士学位论文三株细胞存活率均下降，分别为（49.80±7.91）%、（74.09±9.±4.64）%。当 rhGAL-9 浓度提高至 5.0 μg/mL 时，三株细胞存活25.70±5.70）%、（31.33±9.22）%和（19.24±4.96）%。上述结果提示制 NK/TCL 细胞株细胞活力，并具有浓度依赖性。其中 2.5 μg 组与对照组相比，差异具有统计学显著性。
图 3.1 不同浓度 rhGal-9 处理 NK/TCL24h 后细胞凋亡率Fig 3.1 apoptotic rate of NK/TCL cell lines treatedwith rhGAL-9 at various concentrations for 24hA. 流式细胞术检测 NK/TCL 凋亡情况；B.与对照组比较 NK/TCL 凋亡比例注：Control：对照组，* P＜0.05，和对照组比较；*** P＜0.001，和对照组比较；# P＜0.05，和 1.0 μg/mL 组比较；### P＜0.001，和 1.0 μg/mL 组比较。3.2 Western Blot 法检测凋亡相关蛋白表达不同浓度 rhGal-9 处理三种细胞株后，采用 Western-blot 检测 caspase-3 和PARP 等凋亡相关蛋白变化情况（图 4），结果显示，caspase-3 和 PARP 剪切蛋白（cleaved-caspase-3 和 cleaved-PARP）表达水平随 rhGAL-9 剂量增加而升高，，当rhGal-9 浓度为 1.0 μg/mL 时，SNK-1、SNK-6 和 SNT-8 三株细胞 cleaved-caspase-3 表达量分别是对照组（Con）的 2.26±0.33、2.31±0.24、2.85±0.38 倍cleaved-PARP 表达量分别是对照组的 3.46±0.86、1.20±0.57、2.18±0.77 倍，当 rhGal-
【参考文献】：
期刊论文
[1]The role of T-cell immunoglobulin mucin-3 and its ligand galectin-9 in antitumor immunity and cancer immunotherapy[J]. Riyao Yang,Mien-Chie Hung. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
本文编号：3428528
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3428528.html
