LncRNA BZRAP1-AS1介导THBS1甲基化在肝细胞癌血管生成中的机制研究

发布时间：2021-10-21 06:30

　　背景:肝细胞癌是最常见的原发性肝癌,死亡率很高。长链非编码RNA（LncRNA）最近已出现作为癌症发展和进程中的调节剂,并可作为新的治疗靶标。在本研究中,我们旨在探讨LncRNA BZRAP1-AS1与肝细胞癌血管生成的关系。方法:采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测临床肝细胞癌组织样本及肝细胞癌细胞系中LncRNA BZRAP1-AS1的表达情况;荧光原位杂交（FISH）、核质分离法检测BZRAP1-AS1在肝细胞癌细胞内的定位;小管形成实验显示体外血管生成情况;鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成试验显示体内血管生成情况。qRT-PCR检测基因表达表达,甲基化特异性PCR（MSP）、亚硫酸盐修饰测序法（BSP）、RNA Pull-down、RNA免疫共沉淀（RIP）、双荧光素酶报告基因实验、染色质免疫共沉淀（ChIP）检测BZRAP1-AS1、DNMT3b、THBS1的相互作用关系。采用BALB/C裸鼠构建肝癌细胞移植瘤模型;苏木素伊红（HE）染色观察肿瘤组织病理学改变;免疫组织化学染色、免疫荧光染色技术检测体内血管生成情况。结果:LncRNA BZRAP1-AS1在肝细胞癌组... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．３荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）检测ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１在肝细胞癌细胞内的定位??ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１?ＤＡＰＩ?Ｍｅｒｇｅ??

?第一部分ＬｎｃＲＮＡＢＺＲＡＰｌ－ＡＳｌ在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义???图１．５?ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１在肝旁组织和肝细胞癌组织中的相对表达??

?第二部分?ＬｎｃＲＮＡＢＺＲＡＰｌ－ＡＳｌ、ＤＮＭＴ３ｂ、ＴＨＢＳ１?的相互作用关系???图２．?７?ＨＣＣ芯片低表达基因Ｖｅｅｎ图??ＧＳＥ４５２６７?ＧＳＥ４９５１５??４５０?１２?２３１??３??２１６?３??１０３??ＧＳＥ８９３７７??图２．?８?ＧＳＥ４９５１５芯片数据中ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１与ＴＨＢＳ１表达的相关性分析??〇７ｉ?ｒ?＝?－０．６７２??Ｐ?＝?０．００１??０．６－??｜〇．５－?？??０．４－??ｎ?３－?．?．?．?．?ｉ?■??＇?１＾８?Ｔｏ?２２?２Ａ?Ｚ６?？８?？０??ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１??２．?２．?２?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１对ＴＨＢＳ１基因转录表达的影响??ｑＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＴＨＢＳ１在ＨｕＨ７中的相对表达量显著低于Ｌ－０２中的相对??表达量（图２．?９，?Ｐ〈?０．?０５），在ＨｕＨ７细胞系中，敲低ＢＺＲＡＰ１－ＡＳ１明显上调ＴＨＢＳ１??表达水平（图２．?１０，Ｐ〈?０．０５）??３８??


本文编号：3448430