光动力疗法对乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/ADR细胞损伤及死亡应答的比较

发布时间：2021-10-26 18:55

　　研究背景及目的光动力疗法（Photodynamic Therapy, PDT）主要利用肿瘤细胞及正常细胞对光敏剂有不同的亲和特性,肿瘤细胞摄取和存留光敏剂较多,经特定波长的光照射,在生物组织中氧的参与下发生光化学反应,产生单态氧和自由基,破坏组织和细胞中的多种生物大分子,最终引起肿瘤细胞死亡。光动力疗法以其有效、安全、副作用小、可协同性、相对成本低等优点脱颖而出,己被加拿大、美国、法国、荷兰等国家批准用于一定范围内的抗肿瘤和非肿瘤疾病的临床治疗。光动力反应需要具备的两个基本的要素：光敏剂、光。理想的光敏剂应该满足良好的化学稳定性、水溶性好、肿瘤选择性高、单态氧产量高、肿瘤组织滞留时间短等特点。迄今研究发现的可用于光动力治疗的光敏剂主要分为卟啉衍生物类和叶绿素衍生物类。光照是光动力反应的另一个关键要素,某些特定波长的光被吸收,使光敏剂从基态转入激发态,从而将电子传递给氧分子,形成单线态氧。影响光动力疗法的因素不仅包括光照剂量大小及光敏剂种类,同时还包括细胞中光敏剂的富集量。光敏剂的前期研究表明,过表达ABCG2的H1650 MX50能够显著减少细胞内PhA、Ce6、MPPa、HpIX的富... 

【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
第1章 绪论
    1.1 乳腺癌及其研究进展
    1.2 光动力疗法
        1.2.1 光动力疗法简介
        1.2.2 光敏剂
        1.2.3 PDT在乳腺癌中的研究
    1.3 肿瘤细胞多药耐药及相关蛋白
        1.3.1 肿瘤细胞多药耐药
        1.3.2 ABC家族蛋白简介
    1.4 细胞凋亡与细胞自噬
第2章 研究论文的立论依据、内容和目的意义
第3章 乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/ADR细胞对Ce6-PDT有不同的敏感性
    3.1 实验材料和仪器
        3.1.1 实验用细胞系
        3.1.2 实验用主要仪器
        3.1.3 实验用主要试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 MCF-7及MCF-7/ADR细胞的培养
        3.2.2 MCF-7/ADR细胞的生长曲线
        3.2.3 MTT检测阿霉素、顺铂、紫杉醇对MCF-7及MCF-7/ADR细胞毒性
        3.2.4 MTT法检测光照强度和Ce6浓度对MCF-7及MCF-7/ADR的细胞毒效应。
    3.3 实验结果
        3.3.1 MCF-7/ADR细胞的生长曲线
        3.3.2 阿霉素、顺铂、紫杉醇对MCF-7及MCF-7/ADR细胞毒性
        3.3.3 Ce6-PDT对MCF-7、MCF-7/ADR细胞生长抑制
    3.4 讨论
第4章 MCF-7及MCF-7/ADR活性氧生成量不同,从而引起不同程度的细胞损伤
    4.1 实验材料和仪器
        4.1.1 实验细胞系
        4.1.2 主要仪器
        4.1.3 实验试剂
    4.2 实验方法
        4.2.1 划痕实验检测Ce6-PDT后细胞迁移能力
        4.2.2 细胞内活性氧水平检测
        4.2.3 Hochest33342染色观察细胞核损伤
        4.2.4 彗星电泳观察细胞DNA损伤
        4.2.5 加入ABCG2及P-gp抑制剂后对细胞存活率影响
        4.2.6 流式细胞仪测定加入ABCG2及P-gp抑制剂之后细胞内Ce6进入量
        4.2.7 扫描电子显微镜观察Ce6-PDT处理后MCF-7及MCF-7/ADR形态变化
    4.3 实验结果
        4.3.1 划痕实验检测Ce6-PDT处理后MCF-7、MCF-7/ADR迁移能力
        4.3.2 流式细胞仪检测Ce6-PDT处理后MCF-7及MCF-7/ADR细胞中活性氧的水平
        4.3.3 荧光显微镜结合Hochest33342显示细胞核损伤
        4.3.4 彗星电泳结合荧光显微镜检测DNA损伤
        4.3.5 加入ABCG2及P-gp抑制剂之后细胞存活率及细胞内Ce6富集量
        4.3.6 扫描电子显微镜观察Ce6-PDT处理后细胞形态变化
    4.4 讨论
第5章 Ce6-PDT诱导MCF-7发生凋亡应答,MCF-7/ADR发生自噬性应答
    5.1. 实验材料
        5.1.1 实验用细胞系
        5.1.2 实验用仪器
        5.1.3 实验用试剂
    5.2 实验方法
        5.2.1 Annexin V-FITC结合流式细胞仪检测细胞凋亡
        5.2.2 MTT检测加入自噬抑制剂检测Ce6-PDT处理后细胞存活率
        5.2.3 MDC染色
        5.2.4 蛋白免疫印迹法检测LC3蛋白表达
    5.3 实验结果
        5.3.1 Annexin V-FITC/PI结合流式细胞仪检测MCF-7及MCF-7/ADR细胞凋亡
        5.3.2 MTT检测加入自噬抑制剂检测Ce6-PDT处理后细胞存活率
        5.3.3 MDC结合荧光显微镜观察MCF-7/ADR细胞中自噬溶酶体的变化
        5.3.4 免疫印迹法检测MCF-7/ADR细胞中LC-3表达变化
    5.4 讨论
总结
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]二氢卟吩e6在艾氏荷瘤小鼠体内的分布[J]. 秦晓飞,史海涛,崔兴业,田元龙,王攀,刘全宏.  中国实验动物学报. 2011(02)
[2]肿瘤光动力学疗法与免疫效应分子[J]. 张鑫,张南征.  徐州医学院学报. 2008(04)
[3]肿瘤光动力治疗研究进展[J]. 杨栋.  应用激光. 2003(06)
[4]二氢卟吩e6的合成及其光敏化力和肿瘤光生物活性[J]. 姚建忠,沈卫镝,陈文晖,刘建飞,周有骏.  中国医药工业杂志. 2000(05)



本文编号：3460027