腹腔热灌注重组改构人肿瘤坏死因子和雷替曲塞治疗结肠癌腹膜转移的研究
发布时间：2021-10-28 23:57
结肠癌是高死亡率的胃肠道恶性肿瘤之一。腹膜转移常发生于结肠癌晚期,是患者不良预后的重要标志。目前临床上推荐治疗结肠癌腹膜转移的方法是细胞减灭术加腹腔热灌注化疗（HIPEC）,能使患者获得生存受益。但临床上用于HIPEC的化疗药物较少,因此有必要开发新的治疗药物为患者提供更多更好的选择。重组改构人肿瘤坏死因子（rmhTNF）是由肿瘤坏死因子-α改造得到,可治疗恶性胸腔积液,非霍奇金淋巴瘤和非小细胞肺癌。但由于潜在的全身毒性,rmhTNF多用于局部治疗。雷替曲塞（RTX）是胸苷酸合成酶的抑制剂,对多种癌症均有疗效,特别是晚期结肠癌。本课题使用体外和体内的实验方法,研究rmhTNF对人结肠癌细胞的作用、rmhTNF与高热（42℃）的协同作用、rmhTNF联合RTX的HIPEC对人结肠癌细胞和小鼠结肠癌腹膜转移瘤的治疗作用。研究结果表明,rmhTNF对人结肠癌细胞具有毒性作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。并且,rmhTNF在高热的作用下能增强对人结肠癌细胞的毒性作用,与热具有一定的协同作用。此外,rmhTNF和RTX在高热的作用下能增强对人结肠癌细胞的毒性、上调细胞中促凋亡蛋白的表达并促进细胞发...
【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１肿瘤的转移过程
定小鼠尾巴。小鼠腹部朝上，头部略微底下，使腹腔内脏器自然地移向于横膈肌，以避??免注射到内部脏器。右手持注射器，针头与小鼠腹部呈４５°，从腹中线偏左或偏右１ｍｍ??处，轻缓进针。待针头穿过皮肤层和腹壁、无应力时，缓慢注射溶液。注射结束，缓慢??将针头拔出。??２．４．１０?小鼠?ＨＩＰＥＣ??小鼠腹腔灌注系统包含有两个回路和热电偶测温系统。回路１是泵入路线：含化疗??药物的灌注液、热交换装置、蠕动泵和针头；回路２是泵出路线：针头、蠕动泵和药物??回收袋。不同装置之间使用硅胶管连接。图２．１是小鼠腹腔灌注系统的示意图。??热电偶?回路１??广卜―＇??１＾５?ｒ＂?＿?菜出一?’??、－、?？?＾―??■汞入??图２．１小鼠腹腔灌注系统的示意图。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｔｈｅ?ｖｉｅｗ?ｏｆ?ＨＩＰＥＣ?ｉｎ?ｍｉｃｅ．??在腹腔灌注前，小鼠先使用１％戊巴比妥钠以ｌ〇〇０／２〇ｇ的剂量腹腔注射进行麻醉。??小鼠麻醉之后，使用胶带将小鼠仰卧固定于手术台上，酒精擦拭消毒小鼠腹部。回路１??中的针头以腹腔注射的方法刺入小鼠腹部的右下方；回路２中的针头以同样方式刺入小??鼠腹部的左上方。使用生理盐水配制相应浓度的含药灌注液，经过热交换装置，将灌注??液加热到相应温度，再通过回路１的针头进入小鼠腹腔内。当灌注液充盈于小鼠整个腹??腔时，灌注液通过回路２的针头，经蠕动泵泵出小鼠腹腔。同时热电偶装置检测泵入口??和泵出口的灌注液的温度。含化疗药物的灌注液结束灌注之后，再使用纯生理盐水的灌??注液以相同方式继续灌注１５ｍｉｎ。整个小鼠腹腔灌注系统能模拟临床上腹腔灌注化疗冲??洗的全过程。小鼠结束腹腔灌注后，轻缓地将针头拔出，
第２８页?华东理工大学硕士学位论文??图３．１?ＭＴＴ法检测在不同作用时间下ｒｍｈＴＮＦ对人结肠癌细胞ＨＣＴ１１６（Ａ，Ｅ＞、ＳＷ４８０（Ｂ，?Ｆ＞、??ＨＣＴ８（Ｃ，Ｇ＞、ＬＯＶＯ（Ｄ，Ｈ）的细胞存活率以及ＩＣＳ０值？数据结果表示为平均值士标准方差，与各组??药物浓度为零的对照组比较，显著性差异表示为：＞＜〇．〇５，?＞＜０．０１，…；７＜０．００１?（Ｓｔｕｄｅｎｔ＇ｓ／ｔｅｓｔ）。??Ｆｉｇ．?３．１?ＨＣＴ１１６（Ａ），?ＳＷ４８０（Ｂ），?ＨＣＴ８（Ｃ）?ａｎｄ?ＬＯＶＯ（Ｄ）?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｉｎｃｕｂａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｍｈＴＮＦ?ｆｏｒ?２４，?４８?ｏｒ?７２ｈ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＭＴＴ??ａｓｓａｙ．?＊ｐ?＜?０．０５，?＊＊ｐ?＜?０．０１，?＊＊＊ｐ?＜?０．００１?ａｓ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?（ｆｒｏｍ?２４，?４８，?ａｎｄ?７２ｈ??ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）?（Ｓｔｕｄｅｎｔ＇ｓ?ｔ?ｔｅｓｔ）．?Ｔｈｅ?ＩＣ５０?ｖａｌｕｅｓ?ｏｆ?ＨＣＴ１１６（Ｅ），?Ｓ＼Ｖ４８０（Ｆ），?ＨＣＴ８（Ｇ）?ａｎｄ?ＬＯＶＯ（Ｈ）?ｃｅｌｌｓ??ｗｅｒｅ?ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＧｒａｐｈＰａｄ?Ｐｒｉｓｍ?５?ｓｏｆｔｗａｒｅ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｍｅａｎ?±?ＳＤ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ．?＊ｐ?＜??０．０５，?＊＊ｐ＜?０．０１，?＊＊＊ｐ?＜?０．００１?
【参考文献】：
期刊论文
[1]重组改构人肿瘤坏死因子治疗恶性胸腔积液的疗效及其在其中的价值[J]. 俞玲,桑琳莉,徐兴祥,许文景,杨俊俊. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2018(05)
[2]注射用重组改构人肿瘤坏死因子治疗国人恶性胸、腹腔积液的前瞻性多中心临床研究[J]. 秦叔逵,刘秀峰,马军,朱军,张伟京,刘晓晴,周建英,顾康生,林勇,吴昌平,庄志祥,史清明,程先平,孟水平,陈群,赵和平,鲍扬漪,袁霞,方灿途,曾柏荣,王至东,冯庆亮,王春堂,杨锡贵,陈友山,武焱旻. 临床肿瘤学杂志. 2016(07)
[3]雷替曲塞联合重组改构人肿瘤坏死因子（TNF-α）治疗腹膜假黏液瘤1例[J]. 姜明静,高扬,邹磊,管杰. 山东大学学报(医学版). 2016(07)
[4]注射用重组改构人肿瘤坏死因子-NC（rhTNF-NC）治疗恶性肿瘤的Ⅱ期临床研究[J]. 张伟京,克晓燕,王杰军,王梅,朱军,张树才,张巧花,于丁,饶智国,于世英,谢丛华. 临床肿瘤学杂志. 2015(09)
[5]Peritoneal metastases of colorectal origin treated by cytoreduction and HIPEC: An overview[J]. Alvaro Arjona-Sánchez,Francisco Javier Medina-Fernández,Francisco Cristobal Mu?oz-Casares,Angela Casado-Adam,Juan Manuel Sánchez-Hidalgo,Sebastián Rufián-Pe?a. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(10)
[6]Cytoreductive surgery and intraperitoneal chemotherapy for colorectal peritoneal metastases[J]. Reza Mirnezami,Brendan J Moran,Kate Harvey,Tom Cecil,Kandiah Chandrakumaran,Norman Carr,Faheez Mohamed,Alexander H Mirnezami. World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[7]Current status of pharmacological treatment of colorectal cancer[J]. Reyhan Akhtar,Shammy Chandel,Pooja Sarotra,Bikash Medhi. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(06)
[8]肿瘤坏死因子治疗肺癌恶性胸腔积液的临床观察[J]. 朱凯,张爱萍,陈胜佳,林晶. 海峡药学. 2014(04)
[9]Peritoneal carcinomatosis[J]. Federico Coccolini,Federico Gheza,Marco Lotti,Salvatore Virzì,Domenico Iusco,Claudio Ghermandi,Rita Melotti,Gianluca Baiocchi,Stefano Maria Giulini,Luca Ansaloni,Fausto Catena. World Journal of Gastroenterology. 2013(41)
[10]Current treatment for colorectal liver metastases[J]. Evangelos P Misiakos,Nikolaos P Karidis,Gregory Kouraklis. World Journal of Gastroenterology. 2011(36)
本文编号：3463558
【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１肿瘤的转移过程
定小鼠尾巴。小鼠腹部朝上，头部略微底下，使腹腔内脏器自然地移向于横膈肌，以避??免注射到内部脏器。右手持注射器，针头与小鼠腹部呈４５°，从腹中线偏左或偏右１ｍｍ??处，轻缓进针。待针头穿过皮肤层和腹壁、无应力时，缓慢注射溶液。注射结束，缓慢??将针头拔出。??２．４．１０?小鼠?ＨＩＰＥＣ??小鼠腹腔灌注系统包含有两个回路和热电偶测温系统。回路１是泵入路线：含化疗??药物的灌注液、热交换装置、蠕动泵和针头；回路２是泵出路线：针头、蠕动泵和药物??回收袋。不同装置之间使用硅胶管连接。图２．１是小鼠腹腔灌注系统的示意图。??热电偶?回路１??广卜―＇??１＾５?ｒ＂?＿?菜出一?’??、－、?？?＾―??■汞入??图２．１小鼠腹腔灌注系统的示意图。??Ｆｉｇ．?２．１?Ｔｈｅ?ｖｉｅｗ?ｏｆ?ＨＩＰＥＣ?ｉｎ?ｍｉｃｅ．??在腹腔灌注前，小鼠先使用１％戊巴比妥钠以ｌ〇〇０／２〇ｇ的剂量腹腔注射进行麻醉。??小鼠麻醉之后，使用胶带将小鼠仰卧固定于手术台上，酒精擦拭消毒小鼠腹部。回路１??中的针头以腹腔注射的方法刺入小鼠腹部的右下方；回路２中的针头以同样方式刺入小??鼠腹部的左上方。使用生理盐水配制相应浓度的含药灌注液，经过热交换装置，将灌注??液加热到相应温度，再通过回路１的针头进入小鼠腹腔内。当灌注液充盈于小鼠整个腹??腔时，灌注液通过回路２的针头，经蠕动泵泵出小鼠腹腔。同时热电偶装置检测泵入口??和泵出口的灌注液的温度。含化疗药物的灌注液结束灌注之后，再使用纯生理盐水的灌??注液以相同方式继续灌注１５ｍｉｎ。整个小鼠腹腔灌注系统能模拟临床上腹腔灌注化疗冲??洗的全过程。小鼠结束腹腔灌注后，轻缓地将针头拔出，
第２８页?华东理工大学硕士学位论文??图３．１?ＭＴＴ法检测在不同作用时间下ｒｍｈＴＮＦ对人结肠癌细胞ＨＣＴ１１６（Ａ，Ｅ＞、ＳＷ４８０（Ｂ，?Ｆ＞、??ＨＣＴ８（Ｃ，Ｇ＞、ＬＯＶＯ（Ｄ，Ｈ）的细胞存活率以及ＩＣＳ０值？数据结果表示为平均值士标准方差，与各组??药物浓度为零的对照组比较，显著性差异表示为：＞＜〇．〇５，?＞＜０．０１，…；７＜０．００１?（Ｓｔｕｄｅｎｔ＇ｓ／ｔｅｓｔ）。??Ｆｉｇ．?３．１?ＨＣＴ１１６（Ａ），?ＳＷ４８０（Ｂ），?ＨＣＴ８（Ｃ）?ａｎｄ?ＬＯＶＯ（Ｄ）?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｉｎｃｕｂａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ??ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｍｈＴＮＦ?ｆｏｒ?２４，?４８?ｏｒ?７２ｈ，?ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＭＴＴ??ａｓｓａｙ．?＊ｐ?＜?０．０５，?＊＊ｐ?＜?０．０１，?＊＊＊ｐ?＜?０．００１?ａｓ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｕｎｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?（ｆｒｏｍ?２４，?４８，?ａｎｄ?７２ｈ??ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）?（Ｓｔｕｄｅｎｔ＇ｓ?ｔ?ｔｅｓｔ）．?Ｔｈｅ?ＩＣ５０?ｖａｌｕｅｓ?ｏｆ?ＨＣＴ１１６（Ｅ），?Ｓ＼Ｖ４８０（Ｆ），?ＨＣＴ８（Ｇ）?ａｎｄ?ＬＯＶＯ（Ｈ）?ｃｅｌｌｓ??ｗｅｒｅ?ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ＧｒａｐｈＰａｄ?Ｐｒｉｓｍ?５?ｓｏｆｔｗａｒｅ．?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｍｅａｎ?±?ＳＤ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ．?＊ｐ?＜??０．０５，?＊＊ｐ＜?０．０１，?＊＊＊ｐ?＜?０．００１?
【参考文献】：
期刊论文
[1]重组改构人肿瘤坏死因子治疗恶性胸腔积液的疗效及其在其中的价值[J]. 俞玲,桑琳莉,徐兴祥,许文景,杨俊俊. 中华肺部疾病杂志(电子版). 2018(05)
[2]注射用重组改构人肿瘤坏死因子治疗国人恶性胸、腹腔积液的前瞻性多中心临床研究[J]. 秦叔逵,刘秀峰,马军,朱军,张伟京,刘晓晴,周建英,顾康生,林勇,吴昌平,庄志祥,史清明,程先平,孟水平,陈群,赵和平,鲍扬漪,袁霞,方灿途,曾柏荣,王至东,冯庆亮,王春堂,杨锡贵,陈友山,武焱旻. 临床肿瘤学杂志. 2016(07)
[3]雷替曲塞联合重组改构人肿瘤坏死因子（TNF-α）治疗腹膜假黏液瘤1例[J]. 姜明静,高扬,邹磊,管杰. 山东大学学报(医学版). 2016(07)
[4]注射用重组改构人肿瘤坏死因子-NC（rhTNF-NC）治疗恶性肿瘤的Ⅱ期临床研究[J]. 张伟京,克晓燕,王杰军,王梅,朱军,张树才,张巧花,于丁,饶智国,于世英,谢丛华. 临床肿瘤学杂志. 2015(09)
[5]Peritoneal metastases of colorectal origin treated by cytoreduction and HIPEC: An overview[J]. Alvaro Arjona-Sánchez,Francisco Javier Medina-Fernández,Francisco Cristobal Mu?oz-Casares,Angela Casado-Adam,Juan Manuel Sánchez-Hidalgo,Sebastián Rufián-Pe?a. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(10)
[6]Cytoreductive surgery and intraperitoneal chemotherapy for colorectal peritoneal metastases[J]. Reza Mirnezami,Brendan J Moran,Kate Harvey,Tom Cecil,Kandiah Chandrakumaran,Norman Carr,Faheez Mohamed,Alexander H Mirnezami. World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[7]Current status of pharmacological treatment of colorectal cancer[J]. Reyhan Akhtar,Shammy Chandel,Pooja Sarotra,Bikash Medhi. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(06)
[8]肿瘤坏死因子治疗肺癌恶性胸腔积液的临床观察[J]. 朱凯,张爱萍,陈胜佳,林晶. 海峡药学. 2014(04)
[9]Peritoneal carcinomatosis[J]. Federico Coccolini,Federico Gheza,Marco Lotti,Salvatore Virzì,Domenico Iusco,Claudio Ghermandi,Rita Melotti,Gianluca Baiocchi,Stefano Maria Giulini,Luca Ansaloni,Fausto Catena. World Journal of Gastroenterology. 2013(41)
[10]Current treatment for colorectal liver metastases[J]. Evangelos P Misiakos,Nikolaos P Karidis,Gregory Kouraklis. World Journal of Gastroenterology. 2011(36)
本文编号：3463558
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