A20通过抑制ERK信号下调TNFα诱导HCT116细胞CXC趋化因子的产生

发布时间：2021-11-04 18:03

　　目的:研究TNFα预处理诱导的CXC趋化因子生成耐受的机制。方法:培养与扩增结直肠癌HCT116细胞。建立TNFα预处理诱导结直肠癌HCT116细胞CXC趋化因子生成耐受的模型,ELISA及q RT-PCR分析上清液中CXC趋化因子的分泌及HCT116细胞中CXC趋化因子m RNA的表达。RT-PCR及FACS检测TNFα对HCT116细胞TNFR1、TNFR2表达的影响。q RT-PCR及Western blot分析检测MAPKs及NFκB通路活化与CXC趋化因子的产生的关系。q RT-PCR及Western blot分析检测TNFα对A20表达的影响。用A20过表达质粒转染HCT116细胞并用Western blot分析检测A20过表达对TNFα诱导趋化因子生成的影响。在si RNA抑制HCT116细胞A20表达后,用q RT-PCR检测TNFα预处理诱导趋化因子生成耐受的情况。结果:1.TNFα预处理诱导HCT116细胞中CXC趋化因子生成出现耐受。2.TNFα不影响HCT116细胞TNF受体的表达。3.TNFα通过ERK信号通路诱导HCT116细胞CXC趋化因子生成。4.TNF... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CXCL8mRNA的荧光定量PCR的扩增曲线图、熔解曲线图

与对照组相比，P <0.05比，P <0.05。2. TNFα对 TNF 受体表达的影响了阐明 TNFα诱导的趋化因子产生的负调控机制，我们检测了 TN TNF 受体 1（TNFR1）和 2（TNFR2）表达的影响。 RT-PCR 结果 20ng / ml 的 TNFα处理 HCT116 细胞 1h 后，各组的 HCT116 细平的 TNFR1，但不表达 TNFR2（图 4A-4B）。RT-PCR 结果显示 T调控 TNFR1 和 TNFR2 的 mRNA 表达水平（图 4A）。用 20ng / ml HCT116 细胞不同时间段（1-24 小时），RT-PCR 结果显示 TNFα不 TNFR2 的 mRNA 表达水平（图 4B）。TNFR1TNFα(ng/ml)0 .5 1 5 10 20arkerMATNFα (h)0 1 3 6 12 24arkerMTNBre-T 0 0 1 5 20 20e-T 0 20 20 20 20 0TNFα (ng/ml)

TNFα诱导MAPKs及NF-κB活化


本文编号：3476218